Desenvolvimento de scaffolds porosos com sistema de macro-canais orientados: associação das técnicas de bubbling-effect e impressão tridimensional
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Tese |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25148/tde-24032026-171724/ |
Resumo: | A busca por materiais capazes de induzir a regeneração do complexo dentina-polpa tem estimulado o desenvolvimento de scaffolds bioativos que combinem propriedades físico-químicas adequadas e arquitetura tridimensional favorável ao recrutamento e à diferenciação celular. Considerando o potencial da quitosana como matriz polimérica e a importância dos íons cálcio na modulação fenotípica odontogênica, foi proposta a fabricação de scaffolds porosos contendo fases minerais bioativas e apresentando macro-canais orientados, obtidos por meio da associação das técnicas de bubblingeffect e impressão 3D indireta. Inicialmente foram preparadas formulações de quitosana submetidas a diferentes velocidades de agitação e combinadas a hidróxido de cálcio, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio e silicato de cálcio. Após etapas graduais de congelamento e liofilização, realizou-se o crosslinking para estabilização estrutural. Os materiais foram avaliados quanto à morfologia, porosidade, degradação, liberação de cálcio e intumescimento, além de sua interação com células da polpa dentária humana, tanto por contato direto quanto por meio de extratos, bem como potencial quimiotático. As composições mais promissoras foram selecionadas para a fabricação de scaffolds com macro-canais definidos por moldes tridimensionais contendo canais cilíndricos transestruturais de 700 µm de diâmetro. A caracterização incluiu análises de MEV, mensuração dos canais, porosidade, ensaios físicoquímicos, viabilidade celular, metabolismo, atividade de fosfatase alcalina e deposição de matriz mineralizada. Os resultados demonstraram que a agitação a 5.000 rpm proporcionou maior uniformidade de poros e melhor interconectividade. A incorporação das fases minerais promoveu integração homogênea na matriz polimérica, confirmada por FTIR, bem como liberação controlada de íons Ca². Dentre as formulações testadas, aquelas com maior proporção da fase mineral (2:1) apresentaram desempenho superior na modulação celular, estimulando maior metabolismo, atividade de ALP e deposição de matriz mineralizada. A introdução das macro-canaletas potencializou ainda mais esses efeitos, resultando em maior viabilidade celular nas fases iniciais e incremento expressivo da mineralização, especialmente nos grupos contendo hidróxido e carbonato de cálcio. Os scaffolds com canais apresentaram aumento aproximado de 1,9 vezes na deposição mineral quando comparados às composições equivalentes sem canaletas. A presença dos macrocanais contribuiu para respostas celulares compatíveis com diferenciação odontogênica. Os achados demonstram que a integração entre uma matriz polimérica biocompatível, fases minerais bioativas e design arquitetônico controlado resulta em um biomaterial com propriedades físico-químicas e biológicas adequadas para aplicações em terapias regenerativas do complexo dentina-polpa mediadas por cell homing. A abordagem proposta oferece uma plataforma promissora, reprodutível e de baixo custo, com potencial translacional para estudos in vivo e aplicações clínicas futuras. |
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Desenvolvimento de scaffolds porosos com sistema de macro-canais orientados: associação das técnicas de bubbling-effect e impressão tridimensionalDevelopment of porous scaffolds with oriented macro-channels network: association of bubbling-effect and three-dimensional printing techniquesBiocompatible materialsDentinDentinaEngenharia tecidualMateriais biocompatíveisTissue engineeringA busca por materiais capazes de induzir a regeneração do complexo dentina-polpa tem estimulado o desenvolvimento de scaffolds bioativos que combinem propriedades físico-químicas adequadas e arquitetura tridimensional favorável ao recrutamento e à diferenciação celular. Considerando o potencial da quitosana como matriz polimérica e a importância dos íons cálcio na modulação fenotípica odontogênica, foi proposta a fabricação de scaffolds porosos contendo fases minerais bioativas e apresentando macro-canais orientados, obtidos por meio da associação das técnicas de bubblingeffect e impressão 3D indireta. Inicialmente foram preparadas formulações de quitosana submetidas a diferentes velocidades de agitação e combinadas a hidróxido de cálcio, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio e silicato de cálcio. Após etapas graduais de congelamento e liofilização, realizou-se o crosslinking para estabilização estrutural. Os materiais foram avaliados quanto à morfologia, porosidade, degradação, liberação de cálcio e intumescimento, além de sua interação com células da polpa dentária humana, tanto por contato direto quanto por meio de extratos, bem como potencial quimiotático. As composições mais promissoras foram selecionadas para a fabricação de scaffolds com macro-canais definidos por moldes tridimensionais contendo canais cilíndricos transestruturais de 700 µm de diâmetro. A caracterização incluiu análises de MEV, mensuração dos canais, porosidade, ensaios físicoquímicos, viabilidade celular, metabolismo, atividade de fosfatase alcalina e deposição de matriz mineralizada. Os resultados demonstraram que a agitação a 5.000 rpm proporcionou maior uniformidade de poros e melhor interconectividade. A incorporação das fases minerais promoveu integração homogênea na matriz polimérica, confirmada por FTIR, bem como liberação controlada de íons Ca². Dentre as formulações testadas, aquelas com maior proporção da fase mineral (2:1) apresentaram desempenho superior na modulação celular, estimulando maior metabolismo, atividade de ALP e deposição de matriz mineralizada. A introdução das macro-canaletas potencializou ainda mais esses efeitos, resultando em maior viabilidade celular nas fases iniciais e incremento expressivo da mineralização, especialmente nos grupos contendo hidróxido e carbonato de cálcio. Os scaffolds com canais apresentaram aumento aproximado de 1,9 vezes na deposição mineral quando comparados às composições equivalentes sem canaletas. A presença dos macrocanais contribuiu para respostas celulares compatíveis com diferenciação odontogênica. Os achados demonstram que a integração entre uma matriz polimérica biocompatível, fases minerais bioativas e design arquitetônico controlado resulta em um biomaterial com propriedades físico-químicas e biológicas adequadas para aplicações em terapias regenerativas do complexo dentina-polpa mediadas por cell homing. A abordagem proposta oferece uma plataforma promissora, reprodutível e de baixo custo, com potencial translacional para estudos in vivo e aplicações clínicas futuras.The search for materials capable of inducing regeneration of the dentinpulp complex has driven the development of bioactive scaffolds that integrate suitable physicochemical properties with a three-dimensional architecture favorable to cell recruitment and differentiation. Considering the potential of chitosan as a polymeric matrix and the relevance of calcium ions in odontogenic phenotypic modulation, this study proposed the fabrication of porous scaffolds containing bioactive mineral phases and oriented macro-channels, obtained through the combination of the bubbling-effect technique and indirect 3D printing. Initially, chitosan formulations subjected to different agitation speeds were prepared and combined with calcium hydroxide, calcium carbonate, calcium phosphate and calcium silicate. After gradual freezing and lyophilization steps, crosslinking was performed for structural stabilization. The materials were evaluated for morphology, porosity, degradation, calcium release, swelling behavior, interaction with human dental pulp cellsboth by direct contact and by extractsand chemotactic potential. The most promising compositions were selected for the fabrication of scaffolds with macro-channels generated by threedimensional molds containing trans-structural cylindrical channels with a diameter of 700 µm. Characterization included SEM analysis, channel measurements, porosity determination, physicochemical tests, and assessments of cell viability, metabolism, alkaline phosphatase activity, and mineralized matrix deposition. The results indicated that agitation at 5,000 rpm provided greater pore uniformity and interconnectivity. Incorporation of the mineral phases resulted in homogeneous integration into the polymeric matrix, confirmed by FTIR, along with controlled Ca² release. Among the tested formulations, those with higher mineral proportion (2:1) presented superior performance in modulating cellular behavior, stimulating metabolism, increasing ALP activity, and enhancing mineral deposition. The introduction of macro-channels further potentiated these effects, resulting in higher cell viability in the early culture phases and a marked increase in mineralization, especially in scaffolds containing calcium hydroxide and calcium carbonate. An approximate 1.9-fold increase in mineral deposition was observed when compared with the equivalent compositions without channels. The presence of macro-channels contributed to cellular responses compatible with odontogenic differentiation. The findings demonstrate that integrating a biocompatible polymeric matrix, bioactive mineral phases, and controlled architectural design results in a biomaterial with suitable physicochemical and biological properties for regenerative therapies of the dentinpulp complex mediated by cell homing. The proposed approach offers a promising, reproducible, and low-cost platform with translational potential for future in vivo studies and clinical applications.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPPassos, Diana Gabriela Soares dosCassiano, Fernanda Balestrero2025-12-08info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25148/tde-24032026-171724/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPReter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-03-25T18:35:02Zoai:teses.usp.br:tde-24032026-171724Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-03-25T18:35:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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