Desenvolvimento de métodos cromatográficos (HPLC/DAD) e eletroforético (CZE/DAD) para a análise de flavonóides em \"espinheira-santa\" (Maytenus ilicifolia Martius e Maytenus aquifolium Martius)

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2003
Autor(a) principal: Souza, Cristina Aparecida Diagone Fontana de
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-08082025-145959/
Resumo: Este trabalho descreve a aplicação da HPLC e CE para analisar os flavonóides presentes nas folhas de duas plantas medicinais brasileiras: Maytenus llicifolia Martius e Maytenus aquifolium Martius. A primeira parte deste trabalho foi otimizar por HPLC as condições para análise dos flavonóides presentes em ambas as espécies de Maytenus. As melhores condições foram: C-18 a 35ºC, fase móvel (A) 2% de ácido fórmico em água e fase móvel (B) acetonitrila ao fluxo .de 1 ml/min, detecção a 350 nm. O gradiente otimizado para o extrato de M. ilicifolia foi: 0-2 min 10% B, 2-15 min 10- 15% B, 15-22 min 15-18% B, 22-37 min 18-30% B, 37-42 min 30-40% B, enquanto que para M. aquifolium o melhor gradiente foi: 0-20 min 15-80% B. A identificação das geninas dos flavonóides foi realizada por comparação dos espectros de UV com os padrões. A análise mostrou diferenças significativas em relação à concentração dos flavonóides em Maytenus dependendo da região e do ano de coleta das amostras. Apenas 21,0% das amostras comerciais analisadas eram autênticas (15,8% de M. ilicifolia e 5,2% de M. aquifolium). O objetivo da segunda parte deste trabalho foi estabelecer por CZE as condições para a separação dos flavonóides . Desta forma, as melhores condições foram alcançadas com 50 mM de tampão tetrabarato de sódio e 30 mM de tampão fosfato a pH 8,5, empregando 12% de metanol como modificador orgânico e 20 kV de voltagem aplicada. Constatou-se que a presença do tampão tetrabarato é muito importante para a separação, devido a complexação borato­ flavonóide . Os resultados mostraram que os flavonóides presentes em ambas as espécies de Maytenus são diferentes, embora eles sejam derivados glicosilados de quercetina e kaempferol (uma a três unidades de açúcar). Devido à HPLC ser uma técnica robusta, sensível e versátil, ela é ainda a técnica de escolha para a análise de flavonóides em \"espinheira-santa \", embora a CZE tenha apresentado algumas vantagens tais como: maior eficiência e resolução, menor tempo de análise, custo operacional reduzido e pouco consumo de solvente . Estas vantagens indicam o futuro promissor da CE no controle de qualidade de fitomedicamentos da \"espinheira-santa\".
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As melhores condições foram: C-18 a 35ºC, fase móvel (A) 2% de ácido fórmico em água e fase móvel (B) acetonitrila ao fluxo .de 1 ml/min, detecção a 350 nm. O gradiente otimizado para o extrato de M. ilicifolia foi: 0-2 min 10% B, 2-15 min 10- 15% B, 15-22 min 15-18% B, 22-37 min 18-30% B, 37-42 min 30-40% B, enquanto que para M. aquifolium o melhor gradiente foi: 0-20 min 15-80% B. A identificação das geninas dos flavonóides foi realizada por comparação dos espectros de UV com os padrões. A análise mostrou diferenças significativas em relação à concentração dos flavonóides em Maytenus dependendo da região e do ano de coleta das amostras. Apenas 21,0% das amostras comerciais analisadas eram autênticas (15,8% de M. ilicifolia e 5,2% de M. aquifolium). O objetivo da segunda parte deste trabalho foi estabelecer por CZE as condições para a separação dos flavonóides . Desta forma, as melhores condições foram alcançadas com 50 mM de tampão tetrabarato de sódio e 30 mM de tampão fosfato a pH 8,5, empregando 12% de metanol como modificador orgânico e 20 kV de voltagem aplicada. Constatou-se que a presença do tampão tetrabarato é muito importante para a separação, devido a complexação borato­ flavonóide . Os resultados mostraram que os flavonóides presentes em ambas as espécies de Maytenus são diferentes, embora eles sejam derivados glicosilados de quercetina e kaempferol (uma a três unidades de açúcar). Devido à HPLC ser uma técnica robusta, sensível e versátil, ela é ainda a técnica de escolha para a análise de flavonóides em \"espinheira-santa \", embora a CZE tenha apresentado algumas vantagens tais como: maior eficiência e resolução, menor tempo de análise, custo operacional reduzido e pouco consumo de solvente . Estas vantagens indicam o futuro promissor da CE no controle de qualidade de fitomedicamentos da \"espinheira-santa\".This work describes the application of HPLC and CE to analyze the flavonoids present in the leaves of two Brazilian medicinal plants: Maytenus ilicifolia Martius and Maytenus aquifolium Martius. The first part of this study was to optimize, by HPLC, the conditions for the analysis of the flavonoids present in both Maytenus species. The best conditions were: C-18 column at 35 °C, mobile phase (A) 2% formic acid in water, and mobile phase (B) acetonitrile, at a flow rate of 1 mL/min, detection at 350 nm. The optimized gradient for the M. ilicifolia extract was: 02 min 10% B, 215 min 1015% B, 1522 min 1518% B, 2237 min 1830% B, 3742 min 3040% B; whereas for M. aquifolium the best gradient was: 020 min 1580% B. Identification of the flavonoid aglycones was carried out by comparing the UV spectra with standards. The analysis showed significant differences in the flavonoid concentrations in Maytenus depending on the region and year of sample collection. Only 21.0% of the commercial samples analyzed were authentic (15.8% of M. ilicifolia and 5.2% of M. aquifolium). The objective of the second part of this study was to establish, by CZE, the conditions for the separation of flavonoids. The best conditions were achieved with 50 mM sodium tetraborate buffer and 30 mM phosphate buffer at pH 8.5, employing 12% methanol as organic modifier and an applied voltage of 20 kV. The presence of tetraborate buffer was found to be very important for separation, due to the borateflavonoid complexation. The results showed that the flavonoids present in both Maytenus species are different, although they are glycosylated derivatives of quercetin and kaempferol (one to three sugar units). Because HPLC is a robust, sensitive, and versatile technique, it remains the method of choice for the analysis of flavonoids in espinheira-santa, although CZE presented some advantages, such as higher efficiency and resolution, shorter analysis time, lower operating cost, and reduced solvent consumption. These advantages indicate the promising future of CE in the quality control of espinheira-santa herbal medicines.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPYariwake, Janete HarumiSouza, Cristina Aparecida Diagone Fontana de2003-08-22info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-08082025-145959/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-08-11T13:33:09Zoai:teses.usp.br:tde-08082025-145959Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-08-11T13:33:09Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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