Estudo do empacotamento e avaliação de colunas para cromatografia líquida capilar

• Ano de defesa: 1997
• Autor(a) principal: Rezemini, Andréa Lúcia
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: capillary liquid chromatography; chromatographic columns; chromatographic performance; column packing; colunas cromatográficas; cromatografia líquida capilar; desempenho cromatográfico; empacotamento de colunas
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29092025-105835/

A Cromatografia Líquida Capilar surgiu no final da década de 60, quando Horváth, Scott e Ishii iniciaram a redução do diâmetro interno das colunas. Entre muitos atrativos, o pequeno consumo de fase móvel e estacionária e a grande sensibilidade da massa que elui da coluna, são exemplos que despertaram o interesse dos pesquisadores para a miniaturização da Cromatografia Líquida (µ-LC). Neste trabalho foi desenvolvido um sistema pneumático para empacotamento de colunas, utilizando o método \"slurry packing\", ou seja, empacotamento com partículas em suspensão. As colunas preparadas apresentam diferentes comprimentos (150 - 350 mm), diâmetro interno (D.I. de 0,53 e 0,32 mm) e tubo restritor (0,32; 0,25 e 0,10), tubo que sai da coluna para se ligar à cela do detector, fases estacionárias (reversa C-18, C-8 e C-6) e quiral (N,S-dioctil-(D)-penicilamina). Todas as colunas foram testadas em um sistema para Cromatografia Líquida Capilar, com diferentes fluxos de fase móvel e volumes de cela de detecção (Vc). As colunas com fase reversa foram testadas com a mistura de soluções dos padrões de uracila, naftaleno, fenantreno e antraceno, e acetonitrila/água (70/30%) foi a fase móvel utilizada. Uma solução padrão da mistura racêmica, ácido DL-aspártico, foi injetada na coluna quiral, como solução de teste, em diferentes concentrações e valores de pH para a solução de sulfato de cobre (II) em metanol/água, como fase móvel. Foi feito um teste com uma amostra real de Dorstenia brasiliensis, contendo os princípios ativos psoraleno e bergapteno, em uma coluna capilar C-18. Uma coluna convencional de HPLC (4,6 mm) foi testada em um cromatógrafo líquido convencional e os seus resultados foram comparados aos das colunas capilares. Os resultados revelaram que a melhor eficiência com as colunas de fase reversa foi obtida com a coluna P3 (C-18, 0,53 mm de D.I., 300 mm de comprimento e Vc=35 nL), com número de pratos teóricos para o antraceno = 16.318. A amostra real (psoraleno e bergapteno) foi muito bem separada com a coluna P6 (C-18). Para a coluna quiral, as melhores condições de fase móvel escolhida foram com [Cu2+] = 2 mM, metanol/água (15/85%), pH = 5,3 e fluxo = 8 µL/min. As colunas capilares mostraram maiores valores de eficiência em relação à coluna convencional.