Produção e caracterização funcional de uma nova evasina putativa de carrapatos Rhipicephalus microplus

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2019
Autor(a) principal: Mariana Oliveira Nascimento
Orientador(a): Beatriz Rossetti Ferreira
Banca de defesa: Maria Cristina Roque Antunes Barreira, Carlo José Freire de Oliveira
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade de São Paulo
Programa de Pós-Graduação: Imunologia Básica e Aplicada
Departamento: Não Informado pela instituição
País: BR
Link de acesso: https://doi.org/10.11606/D.17.2019.tde-05082019-125602
Resumo: Carrapatos são parasitas hematófagos que secretam, em sua saliva, componentes imunomoduladores capazes de promover sua alimentação e suprimir as respostas imunológicas do hospedeiro. Dentre as classes de imunomoduladores presentes na saliva, encontram-se as evasinas, proteínas com capacidade de ligarem-se a quimiocinas, inibindo sua atividade relacionada ao recrutamento de células imunes. Neste trabalho, nós descrevemos a produção recombinante e caracterização estrutural e funcional de uma nova evasina putativa, a proteína Bm-nr-264079, identificada no sialotranscriptoma do carrapato bovino R. microplus. Observamos que a proteína Bm-nr-264079 apresenta similaridade estrutural com outras evasinas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus já caracterizadas. A proteína foi produzida na forma recombinante com sucesso a partir da expressão em Escherichia coli Rosetta e purificação em condição desnaturante por cromatografia de afinidade a metais. Esta proteína apresentou atividade inibitória sobre o desenvolvimento de psoríase em modelo animal, limitando o desenvolvimento de lesão local nos animais tratados após a indução da doença por aplicação de imiquimode. A proteína Bm-nr- 264079 não apresentou efeito inibidor do crescimento de Staphylococcus aureus e Streptococcus uberis, bactérias que comumente colonizam a pele de bovinos suscetíveis à infestação por R. microplus. Os resultados aqui apresentados demonstram que a proteína Bm-nr-264079, em sua forma recombinante, apresenta atividade inibidora da inflamação, com potencial atividade de evasina. Novos estudos são necessários para uma caracterização mais específica das possíveis atividades farmacológicas desta proteína
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spelling info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis Produção e caracterização funcional de uma nova evasina putativa de carrapatos Rhipicephalus microplus Production and functional characterization of a novel putative evasin from Rhipicephalus microplus ticks 2019-05-09Beatriz Rossetti FerreiraMaria Cristina Roque Antunes BarreiraCarlo José Freire de OliveiraMariana Oliveira NascimentoUniversidade de São PauloImunologia Básica e AplicadaUSPBR Evasin Evasina Psoríase Psoriasis Rhipicephalus microplus Rhipicephalus microplus Carrapatos são parasitas hematófagos que secretam, em sua saliva, componentes imunomoduladores capazes de promover sua alimentação e suprimir as respostas imunológicas do hospedeiro. Dentre as classes de imunomoduladores presentes na saliva, encontram-se as evasinas, proteínas com capacidade de ligarem-se a quimiocinas, inibindo sua atividade relacionada ao recrutamento de células imunes. Neste trabalho, nós descrevemos a produção recombinante e caracterização estrutural e funcional de uma nova evasina putativa, a proteína Bm-nr-264079, identificada no sialotranscriptoma do carrapato bovino R. microplus. Observamos que a proteína Bm-nr-264079 apresenta similaridade estrutural com outras evasinas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus já caracterizadas. A proteína foi produzida na forma recombinante com sucesso a partir da expressão em Escherichia coli Rosetta e purificação em condição desnaturante por cromatografia de afinidade a metais. Esta proteína apresentou atividade inibitória sobre o desenvolvimento de psoríase em modelo animal, limitando o desenvolvimento de lesão local nos animais tratados após a indução da doença por aplicação de imiquimode. A proteína Bm-nr- 264079 não apresentou efeito inibidor do crescimento de Staphylococcus aureus e Streptococcus uberis, bactérias que comumente colonizam a pele de bovinos suscetíveis à infestação por R. microplus. Os resultados aqui apresentados demonstram que a proteína Bm-nr-264079, em sua forma recombinante, apresenta atividade inibidora da inflamação, com potencial atividade de evasina. Novos estudos são necessários para uma caracterização mais específica das possíveis atividades farmacológicas desta proteína Ticks are hematophagous parasites that secrete, in their saliva, immunomodulatory components capable of promoting their feeding and suppressing the immune responses of the host. Among the classes of immunomodulators present in saliva, we have the evasins, proteins capable of binding to chemokines, inhibiting the recruitment of immune cells. In this work, we describe the recombinant production and structural and functional characterization of a novel putative evasin, the protein Bm-nr-264079, identified in the sialotranscriptome of the R. microplus cattle tick. We have found that the protein Bm-nr-264079 shows structural similarity to other already characterized Rhipicephalus sanguineus tick evasins. The protein was successfully produced with expression in Escherichia coli Rosetta and purification in denaturing condition by metal affinity chromatography. This protein showed inhibitory activity on the development of psoriasis in the animal model, limiting the development of local lesion in the treated animals after the induction of the disease by the application of imiquimod. The protein Bm-nr-264079 showed no inhibitory effect on the growth of Staphylococcus aureus and Streptococcus uberis, bacteria that commonly colonize the skin of cattle susceptible to R. microplus infestations. The results presented herein demonstrate that Bm-nr-264079, in its recombinant form, exhibits antiinflammatory activity with potential evasin activity. Further studies are needed to characterize more specifically the pharmacological activities of this protein https://doi.org/10.11606/D.17.2019.tde-05082019-125602info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USP2023-12-21T18:16:28Zoai:teses.usp.br:tde-05082019-125602Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212019-11-08T20:42:52Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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