Análise do efeito da superexpressão de HSP27 humana em Saccharomyces cerevisiae modelo para a Doença de Huntington.

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Camandona, Vittoria de Lima
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Saccharomyces cerevisiae.; Doença de Huntington; HSP27; Huntingtons Disease
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-19082025-121248/

INTRODUÇÃO: HSP27 humana é uma proteína da família das chaperonas moleculares, envolvida no aumento da atividade proteassomal, efeitos antiapoptóticos e manutenção do equilíbrio redox. Sua expressão em diversos tecidos a torna relevante em doenças neurodegenerativas como a Doença de Huntington, que é causada por uma mutação no gene HTT e não possui cura específica ou tratamento eficaz. OBJETIVO: analisar o efeito de HSP27 humana em modelo humanizado de Saccharomyces cerevisiae para Doença de Huntington. MATERIAIS E MÉTODOS: foram construídas linhagens de S. cerevisiae expressando o exon 1 do gene HTT, contendo as primeiras 17 bases nucleotídicas, seguidos por 25 (controle) ou 103 (mutante) repetições de glutamina (Q), HSP27 em níveis basais (promotor TEF nativo) e superexpressos (promotor mutante TEF8). Linhagens atg1Δ e expressando mutantes de HSP27 também foram construídos. Monitorou-se a longevidade cronológica, assim como realizou-se ensaios de atividade proteassomal e análises proteicas quantitativas por Western Blot. Células foram analisadas por microscopia de fluorescência para detecção de agregados protéicos. RESULTADOS: HSP27 reduziu agregados solúveis e insolúveis de mHTTex1 103Q, e aumentou a longevidade cronológica das células. Esses achados foram mais prevalentes em células que superexpressaram HSP27. Entretanto, mutantes de HSP27 levaram ao aumento da quantificação de mHTTex1 103Q. Não houve diferenças na atividade proteassomal. Em células atg1Δ, houve aumento da quantificação de mHTTex1 103Q em comparação a linhagem com autofagia preservada. Entre as células atg1Δ que superexpressam HSP27 não detectamos diferença. CONCLUSÕES: HSP27 aumenta moderadamente a longevidade de células e atua na via de degradação de mHTTex1 103Q, Sugere-se que este efeito ocorra por outra via para além da proteassomal ou autofágica. Possivelmente o estado de oligomerização pela superexpressão de HSP27 seja crucial.