Influência do secretoma de células-tronco da polpa dentária e de odontoblastos na diferenciação e atividade clástica in vitro

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Sarra, Giovanna
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Células-tronco da polpa dentária; Clastic differentiation; Dental pulp stem cells; Diferenciação clástica; Internal root resorption; Odontoblastos; Odontoblasts; Reabsorção dentária interna; Secretoma; Secretome
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/23/23156/tde-14102025-131147/

A reabsorção dentária é a perda de tecido dentário duro que ocorre como resultado da atividade de células clásticas que pode ocorrer de maneira fisiológica ou patológica. A reabsorção interna é um processo patológico que se inicia no interior da cavidade pulpar e requer a presença de ao menos uma parte do tecido pulpar vital. Os mecanismos que levam a essa alteração patológica resultante da diferenciação e função de células clásticas no interior do tecido pulpar ainda são pouco elucidados na literatura. O objetivo desse trabalho in vitro foi avaliar a participação de células-tronco mesenquimais da polpa dentária (DPSCs) e de odontoblastos submetidos ou não a um microambiente similar a inflamação na diferenciação e função de células clásticas. DPSCs isoladas de incisivos de camundongos Balb-C e células odontoblásticas de camundongos da linhagem MDPC-23 foram ativadas ou não com lipopolissacarídeos (LPS). O meio em que essas células foram cultivadas, contendo seu secretoma (proteínas secretadas), foi coletado e utilizado como meio condicionado. Células indiferenciadas da medula óssea de camundongos Balb-C foram isoladas, plaqueadas e cultivadas com os diferentes meios condicionados, utilizando ou não a suplementação de vitamina D como estímulo clastogênico. A viabilidade celular foi avaliada através do ensaio de MTT e a diferenciação clástica foi avaliada através do método histoquímico da TRAP, imunofluorescência para RANKL e análise da expressão gênica de OPG e RANKL por RTqPCR. Foi utilizada microscopia eletrônica de varredura para avaliar lacunas de reabsorção presentes no substrato dentinário no qual as células foram cultivadas. Os dados foram analisados estatisticamente através de ANOVA seguido pelo teste de Tukey adotando-se nível de significância de 5% (p 0,05). O secretoma das DPSC foi capaz de aumentar a viabilidade celular, diminuir o número de células TRAP+ mesmo na presença de vitamina D, diminuir a expressão gênica de RANKL na presença de vitamina D e diminuir a presença de células RANKL+. O secretoma dos odontoblastos diminuiu a viabilidade celular, aumentou o número de células TRAP+ na ausência de vitamina D, a expressão gênica de OPG na presença de vitamina D, a presença de células RANKL+ e levou a lacunas de reabsorção de maior área na presença da vitamina D. Em geral, a presença de LPS não influenciou os resultados. Assim, podemos concluir que os secretomas das células-tronco da polpa dentária e dos odontoblastos interferiram na diferenciação clástica de células indiferenciadas da medula óssea. De maneira geral, o secretoma das DPSC aumentou a proliferação celular atenuando a diferenciação clástica, enquanto o secretoma dos odontoblastos diminuiu a proliferação, aumentando a diferenciação clástica.