Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Wakasuqui, Felipe
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Biotechnology
Biotecnologia
Enzimas
Enzyme Inhibitors
Enzymes
Inibidores de Enzimas
Staphylococcus
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06092024-163446/
Resumo: Staphylococcus aureus é uma bacteria que pode causar infecções severas, cujos sintomas variam de lesões na pele até quadros graves como endocardite, pneumonia e meningite. Diversas cepas desenvolveram multirresistência devido ao uso indevido de antibióticos e se tornaram um grande problema de saúde pública, não restrito apenas ao ambiente hospitalar. Novos tratamentos são necessários e o metabolismo do ácido lipóico em S. aureus parece ser um alvo promissor para o desenvolvimento de fármacos. O ácido lipóico é um cofator essencial dos complexos -cetoácido desidrogenase. S. aureus pode sintetizar ácido lipóico a partir do metabolismo de ácidos graxos e também pode captar ácido lipóico disponível no ambiente, de maneira distinta das células de mamíferos. Neste trabalho, as enzimas LplA1, LplA2, LipA e LipL; e seus substratos, GcvH e E2-PDH, foram clonados e expressos em Escherichia coli. Proteínas solúveis foram purificadas e utilizadas em ensaios enzimáticos ou ensaios de cristalização. Usamos uma metodologia baseada em western blot para triagem qualitativa dos possíveis inibidores da LplA1. Este método também pode ser aplicado à LplA2. Este trabalho deu os passos iniciais na busca de novos compostos, que esperamos que no futuro possam ser usados como antibióticos para combater este patógeno.
id USP_581b6f17187a2da47d0e960fe3661fc1
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-06092024-163446
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str
spelling Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.Evaluation of the druggability of the lipoic acid metabolism in Staphylococcus aureus.BiotechnologyBiotecnologiaEnzimasEnzyme InhibitorsEnzymesInibidores de EnzimasStaphylococcusStaphylococcusStaphylococcus aureus é uma bacteria que pode causar infecções severas, cujos sintomas variam de lesões na pele até quadros graves como endocardite, pneumonia e meningite. Diversas cepas desenvolveram multirresistência devido ao uso indevido de antibióticos e se tornaram um grande problema de saúde pública, não restrito apenas ao ambiente hospitalar. Novos tratamentos são necessários e o metabolismo do ácido lipóico em S. aureus parece ser um alvo promissor para o desenvolvimento de fármacos. O ácido lipóico é um cofator essencial dos complexos -cetoácido desidrogenase. S. aureus pode sintetizar ácido lipóico a partir do metabolismo de ácidos graxos e também pode captar ácido lipóico disponível no ambiente, de maneira distinta das células de mamíferos. Neste trabalho, as enzimas LplA1, LplA2, LipA e LipL; e seus substratos, GcvH e E2-PDH, foram clonados e expressos em Escherichia coli. Proteínas solúveis foram purificadas e utilizadas em ensaios enzimáticos ou ensaios de cristalização. Usamos uma metodologia baseada em western blot para triagem qualitativa dos possíveis inibidores da LplA1. Este método também pode ser aplicado à LplA2. Este trabalho deu os passos iniciais na busca de novos compostos, que esperamos que no futuro possam ser usados como antibióticos para combater este patógeno.Staphylococcus aureus is a commensal bacterium that can lead to severe infections, whose symptoms varies from skin lesions up to serious conditions like endocarditis, pneumonia and meningitis. Several strains have developed multidrug resistance due to antibiotic misuse and became a major public health problem and not solely restricted to the hospital environment. Novel treatments are urgently needed and the metabolism of lipoic acid in S. aureus appears to be a promising target for drug discovery. Lipoic acid is an essential cofactor of the -keto acid dehydrogenase complexes. S. aureus can synthetize lipoic acid from the fatty acid synthesis pathway, and can also salvage lipoic acid from the environment, in a distinct way from the mammalian cells. In this work, the enzymes involved in this pathway, LplA1, LplA2, LipA and LipL; and their substrates, GcvH and E2-PDH, were cloned and expressed in Escherichia coli. Soluble proteins were purified, and used in enzymatic assays or crystallization assays. We used a qualitative screening based on western blot to test inhibitors against LplA1. This method can also be applied to LplA2. This work gave the initial steps in search of new compounds, which we hope in the future can be used as antibiotics to fight this pathogen and relieve its burden.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPWrenger, CarstenWakasuqui, Felipe2020-11-05info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06092024-163446/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2024-09-10T16:09:02Zoai:teses.usp.br:tde-06092024-163446Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212024-09-10T16:09:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
Evaluation of the druggability of the lipoic acid metabolism in Staphylococcus aureus.
title Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
spellingShingle Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
Wakasuqui, Felipe
Biotechnology
Biotecnologia
Enzimas
Enzyme Inhibitors
Enzymes
Inibidores de Enzimas
Staphylococcus
Staphylococcus
title_short Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
title_full Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
title_fullStr Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
title_full_unstemmed Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
title_sort Avaliação do metabolismo de ácido lipóico em Staphylococcus aureus como potencial alvo para desenvolvimento de fármacos.
author Wakasuqui, Felipe
author_facet Wakasuqui, Felipe
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Wrenger, Carsten
dc.contributor.author.fl_str_mv Wakasuqui, Felipe
dc.subject.por.fl_str_mv Biotechnology
Biotecnologia
Enzimas
Enzyme Inhibitors
Enzymes
Inibidores de Enzimas
Staphylococcus
Staphylococcus
topic Biotechnology
Biotecnologia
Enzimas
Enzyme Inhibitors
Enzymes
Inibidores de Enzimas
Staphylococcus
Staphylococcus
description Staphylococcus aureus é uma bacteria que pode causar infecções severas, cujos sintomas variam de lesões na pele até quadros graves como endocardite, pneumonia e meningite. Diversas cepas desenvolveram multirresistência devido ao uso indevido de antibióticos e se tornaram um grande problema de saúde pública, não restrito apenas ao ambiente hospitalar. Novos tratamentos são necessários e o metabolismo do ácido lipóico em S. aureus parece ser um alvo promissor para o desenvolvimento de fármacos. O ácido lipóico é um cofator essencial dos complexos -cetoácido desidrogenase. S. aureus pode sintetizar ácido lipóico a partir do metabolismo de ácidos graxos e também pode captar ácido lipóico disponível no ambiente, de maneira distinta das células de mamíferos. Neste trabalho, as enzimas LplA1, LplA2, LipA e LipL; e seus substratos, GcvH e E2-PDH, foram clonados e expressos em Escherichia coli. Proteínas solúveis foram purificadas e utilizadas em ensaios enzimáticos ou ensaios de cristalização. Usamos uma metodologia baseada em western blot para triagem qualitativa dos possíveis inibidores da LplA1. Este método também pode ser aplicado à LplA2. Este trabalho deu os passos iniciais na busca de novos compostos, que esperamos que no futuro possam ser usados como antibióticos para combater este patógeno.
publishDate 2020
dc.date.none.fl_str_mv 2020-11-05
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06092024-163446/
url https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-06092024-163446/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1865491868920315904

Registros relacionados