Caracterização bioquímica e biológica dos venenos de serpentes da espécie Bothrops erythromelas e suas variações ontogenéticas e sexuais
| Ano de defesa: | 2023 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052025-083119/ |
Resumo: | Acidentes ofídicos são considerados doenças tropicais negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde e o estudo dos venenos de serpentes é uma importante área da pesquisa biológica e biotecnológica devido à sua complexa composição. O gênero Bothrops é o maior causador de envenenamentos no Brasil e o veneno das espécies deste gênero é caracterizado, principalmente, por apresentar as seguintes atividades: proteolítica, coagulante e hemorrágica. As serpentes da espécie Bothrops erythromelas são, em geral, pequenas e alimentam-se de rãs, lagartos e pequenos roedores. Os venenos de serpentes estão sujeitos a variações intraespecíficas relacionadas a diversos fatores, incluindo ontogenia e sexo. Estes aspectos dos venenos ainda não foram completamente elucidados na espécie B. eryhtromelas e são importantes para um melhor entendimento clínico, biotecnológico, ecológico e evolutivo. Com isso, o presente estudo teve como objetivo caracterizar e comparar, bioquímica e biologicamente, os venenos de serpentes B. erythromelas, acompanhando-as durante seu desenvolvimento. Os venenos apresentaram uma mudança gradual no perfil das proteínas, partindo de uma abundância maior de proteínas de alta massa molecular para outro com predominância de proteínas de média e baixa massa molecular. As atividades proteolíticas, fosfolipásica A2, hemorrágica e letal aumentaram conforme a idade dos animais. Já as atividades coagulante e citotóxica diminuíram com a idade. Foi interessante encontrar atividade de L-amino ácido oxidase (LAAO) nessa espécie pela primeira vez, de acordo com o nosso conhecimento, e que as atividades proteolíticas foram quase completamente inibidas na presença de EDTA, indicando forte influência de metaloproteases. Em geral, os venenos de fêmeas apresentaram maior atividade proteolítica, enquanto os venenos de machos exibiram maior atividade fosfolipásica A2 e de LAAO. O soro antibotrópico inibiu as atividades colagenolítica, hemorrágica e letal, porém o mesmo não foi observado na atividade caseinolítica. Apesar disso, o ensaio de Western blotting mostrou uma imunointeração similar entre todos os venenos em relação à ontogenia, ao passo que no ELISA, os venenos de adultos foi mais imunorreconhecido que o de filhotes. Esses resultados, em conjunto com a literatura, evidenciam a importância de estudar a variação intraespecífica dos venenos de serpentes visando a melhora no tratamento antiofídico e no entendimento ecológico e evolutivo desses animais. |
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Caracterização bioquímica e biológica dos venenos de serpentes da espécie Bothrops erythromelas e suas variações ontogenéticas e sexuaisBiochemical and biological characterization of the venoms of the Bothrops erythromelas snake species and its ontogenetic and sexual variationsBothrops erythromelas; Veneno; Ontogenia; Variação sexual; Soro antibotrópico;Bothrops erythromelas; Venom; Ontogeny; Sexual variation; Antibothropic serum;Acidentes ofídicos são considerados doenças tropicais negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde e o estudo dos venenos de serpentes é uma importante área da pesquisa biológica e biotecnológica devido à sua complexa composição. O gênero Bothrops é o maior causador de envenenamentos no Brasil e o veneno das espécies deste gênero é caracterizado, principalmente, por apresentar as seguintes atividades: proteolítica, coagulante e hemorrágica. As serpentes da espécie Bothrops erythromelas são, em geral, pequenas e alimentam-se de rãs, lagartos e pequenos roedores. Os venenos de serpentes estão sujeitos a variações intraespecíficas relacionadas a diversos fatores, incluindo ontogenia e sexo. Estes aspectos dos venenos ainda não foram completamente elucidados na espécie B. eryhtromelas e são importantes para um melhor entendimento clínico, biotecnológico, ecológico e evolutivo. Com isso, o presente estudo teve como objetivo caracterizar e comparar, bioquímica e biologicamente, os venenos de serpentes B. erythromelas, acompanhando-as durante seu desenvolvimento. Os venenos apresentaram uma mudança gradual no perfil das proteínas, partindo de uma abundância maior de proteínas de alta massa molecular para outro com predominância de proteínas de média e baixa massa molecular. As atividades proteolíticas, fosfolipásica A2, hemorrágica e letal aumentaram conforme a idade dos animais. Já as atividades coagulante e citotóxica diminuíram com a idade. Foi interessante encontrar atividade de L-amino ácido oxidase (LAAO) nessa espécie pela primeira vez, de acordo com o nosso conhecimento, e que as atividades proteolíticas foram quase completamente inibidas na presença de EDTA, indicando forte influência de metaloproteases. Em geral, os venenos de fêmeas apresentaram maior atividade proteolítica, enquanto os venenos de machos exibiram maior atividade fosfolipásica A2 e de LAAO. O soro antibotrópico inibiu as atividades colagenolítica, hemorrágica e letal, porém o mesmo não foi observado na atividade caseinolítica. Apesar disso, o ensaio de Western blotting mostrou uma imunointeração similar entre todos os venenos em relação à ontogenia, ao passo que no ELISA, os venenos de adultos foi mais imunorreconhecido que o de filhotes. Esses resultados, em conjunto com a literatura, evidenciam a importância de estudar a variação intraespecífica dos venenos de serpentes visando a melhora no tratamento antiofídico e no entendimento ecológico e evolutivo desses animais.Snakebites are considered a neglected tropical disease by the World Health Organization and the study of snake venoms is an important area of biological and biotechnological research due to its complex composition. The genus Bothrops is the main cause of envenoming in Brazil and the venom of this genus species is mainly characterized by presenting the following activities: proteolytic, coagulant, and hemorrhagic. Bothrops erythromelas snakes are generally small and feed on frogs, lizards, and small rodents. Snake venoms are subject to intraspecific variations related to several factors, including ontogeny and sex. These aspects of venoms have not yet been fully elucidated in the species B. eryhtromelas and are primordial for a better clinical, biotechnological, ecological, and evolutionary understanding. Thus, the present study aimed to characterize and compare, biochemically and biologically, the venoms of B. erythromelas snakes, accompanying these animals during their development. The venoms showed a gradual change in protein profile, from a greater abundance of high molecular weight proteins to one with a predominance of medium and low molecular weight proteins. The proteolytic, phospholipasic A2, hemorrhagic and lethal activities increased with the age of the animals. The coagulant and cytotoxic activities decreased with age. It was interesting to find L-amino acid oxidase (LAAO) activity for the first time in this species according to our knowledge, and that proteolytic activities were almost completely inhibited in the presence of EDTA, indicating a strong influence of metalloproteases. In general, venoms from females showed higher proteolytic activity, while venoms from males exhibited higher phospholipase A2 and LAAO activity. The antibothropic serum inhibited the collagenolytic, hemorrhagic, and lethal activities, but the same was not observed in the caseinolytic activity. Despite this, the Western blotting assay showed a similar immunointeraction between all venoms in relation to ontogeny, whereas in the ELISA, venoms from adults were more immunorecognized than venoms from juveniles. These results altogether, along with the literature, show the importance of studying the intraspecific variation of snake venoms in order to improve the antiophidic treatment and the ecological and evolutionary understanding of these animals.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPAzevedo, Anita Mitico TanakaHatakeyama, Daniela Miki2023-07-04info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052025-083119/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-05-16T13:32:01Zoai:teses.usp.br:tde-16052025-083119Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-05-16T13:32:01Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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