Tolerância ao lipopolissacarídeo e produtos de glicação avançada regulam a inflamação e o efluxo de colesterol em macrófagos

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Santos, Danielle Ribeiro
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Aterosclerose; Atherosclerosis; Glycation end products advanced; HDL; Inflamação; Inflammation; Lipopolissacarídeos; Lipopolysaccharides; Produtos finais de glicação avançada
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5135/tde-10022026-151904/

O acúmulo de colesterol em macrófagos na íntima arterial é acompanhado pela infiltração de células imunológicas e secreção de citocinas inflamatórias. Nessas células, a elevada expressão de receptores para produtos de glicação avançada (RAGE) e receptor símile ao toll 4 (TLR-4) deflagra vias inflamatórias, após sinalização por lipopolissacarídeos (LPS) e produtos de glicação avançada (AGEs), o que se vincula à evolução da lesão, ruptura da placa e eventos cardiovasculares agudos. A albumina modificada por glicação avançada (albumina-AGE) sensibiliza macrófagos, por longos períodos, à estimulação inflamatória por LPS, com incremento na secreção de citocinas inflamatórias. Este efeito de sensibilização ou priming pode ser contrabalanceado pela tolerância ao LPS. Avaliou-se, em macrófagos, o efeito da tolerância ao LPS, induzida in vitro e in vivo, sobre a sensibilização inflamatória promovida pelos AGEs em macrófagos e seu reflexo sobre a remoção de colesterol. Macrófagos derivados de células da medula óssea (BMDM) de camundongos e da linhagem RAW 264.7 foram incubados com LPS (24 h), tratados com albumina controle (C) ou AGE (48 h), seguindo-se novo insulto com LPS (24 h). Pequenas e repetidas doses de LPS foram injetadas de forma subcutânea em camundongos por cinco dias e, após dois dias, foram obtidos BMDM, os quais foram tratados com LDL acetilada, seguido de tratamento com albumina controle (C) ou AGE (24 h), seguindo-se novo insulto com LPS (24 h). A concentração de citocinas foi determinada no meio de cultura por ELISA e a expressão de genes inflamatórios envolvidos no eixo AGE- RAGE-TLR-4 foi avaliada por RT-qPCR. O meio condicionado, advindo dessas incubações, foi utilizado para tratamento de macrófagos não estimulados para determinação do efluxo de 14C-colesterol, mediado por lipoproteínas de densidade alta (HDL). As comparações foram feitas pelo teste Mann Whitney. Em BMDM in vitro, a indução de tolerância ao LPS não houve diferença para valores de TNF. Em macrófagos RAW, observou-se que tolerância ao LPS, tanto em células tratadas com albumina-C como albumina-AGE, reduziu a secreção de TNF. Em BMDM, isolados de animais tolerantes ao LPS, observou-se redução de 35 % na secreção de TNF em comparação às células isoladas de animais não tolerantes, ambos tratados com albumina-AGE. O tratamento de macrófagos ingênuos com meio condicionado advindo das incubações de macrófagos tolerantes aumentou a remoção de 14C-colesterol em duas vezes para albumina-C e três vezes para albumina-AGE, em comparação ao tratamento com meio advindo das células não tolerantes. Os resultados apontam para uma ação célula específica da tolerência ao LPS em modular a resposta inflamatória elicitada pela albumina-AGE. A interação entre as vias de sinalização dos AGEs e tolerância ao LPS regula a inflamação e o efluxo de colesterol em macrófagos podendo contribuir para modular a evolução da doença macrovascular aterosclerótica.