Miosina-Va auxilia no transporte de Dinamina-2 e Clatrina para as adesões focais e promove sua desmontagem

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Zenzen, Johnny Alex Rockenbach
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Adesão focal; Dinamina; Dynamin; FAK; Focal adhesions; Miosina-Va; Myosin Va
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-01062020-074350/

A montagem e desmontagem das adesões focais (AFs) desempenham um papel fundamental em vários processos celulares, incluindo migração celular, proliferação e sobrevivência. As adesões focais são desmontadas na parte traseira e montadas na parte dianteira, durante a migração celular. Resultados anteriores do nosso laboratório mostram que a perda ou redução da expressão de miosina-Va (MVa) fibroblastos e células de melanoma causam uma redução significativa nas taxas de migração e invasão. Aqui demonstramos que os fibroblastos silenciados para MVa sofrem um atraso dramático na desmontagem das AFs, o que implica que a atividade motora da MVa é essencial para promover a desmontagem. A desmontagem é necessária para que ocorra a reciclagem de componentes das AFs, permitindo que a célula remonte novas AFs na frente migratória e migre corretamente. Os microtúbulos apresentam um papel fundamental na desmontagem das AFs e são necessários para levar proteínas para as AFs, como a dinamina-2, uma GTPase necessária para a endocitose da integrina mediada por clatrina. Os resultados prévios do meu mestrado mostraram que a miosina-V fosforilada se localiza nas AFs, durante a rápida formação dessas estruturas induzidas por estímulo com soro fetal bovino. Uma vez que ocorre a formação das AFs em fibroblastos deficientes para MVa, formulamos a hipótese de que a localização de miosina-Va nas AFs é necessária para fornecer fatores de desmontagem e / ou sinalização, resultando na formação de estruturas mais dinâmicas do que as formadas na ausência de MVa. O presente projeto propôs monitorar a dinâmica molecular das AFs: montagem, desmontagem e reciclagem, em células controle e deficientes em MVa. Mostramos aqui que componentes do soro fetal bovino, como EGF e LPA induzem a fosforilação da MVa em células quiescentes e que a MVa auxilia no transporte de Dinamina-2 e Clatrina para as adesões focais e promove sua desmontagem.