Pesquisa elementar com Viscum album: aspectos regulatórios e controle de qualidade de tinturas hidroalcoólicas

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Pignaton, Cassiana Santos de Oliveira
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60137/tde-19082025-110043/
Resumo: O Viscum album (VA) é uma planta semiparasita com importante papel na terapia do câncer. As diferenças na composição fitoquímica, bem como a influência da árvore hospedeira no metaboloma da subespécie VA foram descritas. Neste projeto foi revisada a legislação sanitária brasileira que regulamenta as boas práticas de manipulação e o preparo de insumos vegetais, discutindo parâmetros físicos químicos do V. album. O objetivo principal deste projeto foi avaliar a aplicabilidade da cromatografia circular de Pfeiffer (PCC), como metodologia qualitativa capaz de diferenciar as Tinturas-mãe (TM) de V. album. Os ensaios foram conduzidos em dois países: Brasil e Suíça de maneira independente e em triplicata, utilizando sempre as mesmas TMs. Três subespécies de VA (abietis, album e austriacum) de cinco árvores hospedeiras (Malus domestica, Quercus robur, Ulmus carpinifolia, Pinus sylvestris e Abies alba) foram colhidas na Suíça no verão (2017) e no inverno (2018). As TMs de VA foram preparadas segundo a Farmacopeia Francesa e a Farmacopeia Homeopática Brasileira. Os experimentos de PCC foram realizados conforme metodologia desenvolvida por Kokornaczyk e colaboradores. A reprodutibilidade dos três ensaios independentes realizados em cada conjunto experimental foi avaliada pelo software ImageJ através da análise de perfil radial. As características mais significativas de cada cromatografia circular foram utilizadas para a diferenciação das TMs: medidas qualitativas das zonas interna e externa; coloração e contraste das imagens e presença de linhas radiais. Além disso, a Cromatografia em Camada Delgada de Alto Desempenho foi realizada adaptando as fases móveis e os padrões das metodologias das Cromatografias em Camada Delgada descritas nas monografias de VA publicadas nas Farmacopeias Homeopáticas Francesa e Alemã. O perfil fitoquímico das tinturas-mãe de V. album foi comparado quanto ao fator de retenção dos compostos (Rf) em comparação aos padrões químicos farmacopeicos de: ácido clorogênico, ácido cafeico, hiperosídeo e rutina. Os resultados obtidos indicaram perfis fitoquímicos semelhantes quando as duas metodologias foram aplicadas; entretanto, as intensidades das bandas se apresentaram diferentes quando as estações e as árvores hospedeiras foram comparadas. Considerando que os padrões de PCC podem estar correlacionados com a composição química da tintura-mãe de VA, este projeto de pesquisa multicêntrico propõe uma metodologia de baixo custo e facilmente reprodutível, focada nos parâmetros de controle de qualidade destas matérias-primas vegetais, e novos estudos contribuirão para comprovar a hipótese gerada. Adicionalmente, foi verificado o conhecimento dos farmacêuticos(as) das farmácias magistrais em relação ao V. album, identificando seu uso e demanda. A pesquisa foi realizada através de questionário estruturado, visando mapear os conhecimentos já existentes em nosso país sobre o uso do VA, que identificou um desconhecimento acerca dos diferentes hospedeiros. Os saberes destes profissionais, aliados aos conhecimentos científicos poderão contribuir para a rastreabilidade destes produtos, além de promover o uso racional destes derivados vegetais no Brasil.
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Os ensaios foram conduzidos em dois países: Brasil e Suíça de maneira independente e em triplicata, utilizando sempre as mesmas TMs. Três subespécies de VA (abietis, album e austriacum) de cinco árvores hospedeiras (Malus domestica, Quercus robur, Ulmus carpinifolia, Pinus sylvestris e Abies alba) foram colhidas na Suíça no verão (2017) e no inverno (2018). As TMs de VA foram preparadas segundo a Farmacopeia Francesa e a Farmacopeia Homeopática Brasileira. Os experimentos de PCC foram realizados conforme metodologia desenvolvida por Kokornaczyk e colaboradores. A reprodutibilidade dos três ensaios independentes realizados em cada conjunto experimental foi avaliada pelo software ImageJ através da análise de perfil radial. As características mais significativas de cada cromatografia circular foram utilizadas para a diferenciação das TMs: medidas qualitativas das zonas interna e externa; coloração e contraste das imagens e presença de linhas radiais. Além disso, a Cromatografia em Camada Delgada de Alto Desempenho foi realizada adaptando as fases móveis e os padrões das metodologias das Cromatografias em Camada Delgada descritas nas monografias de VA publicadas nas Farmacopeias Homeopáticas Francesa e Alemã. O perfil fitoquímico das tinturas-mãe de V. album foi comparado quanto ao fator de retenção dos compostos (Rf) em comparação aos padrões químicos farmacopeicos de: ácido clorogênico, ácido cafeico, hiperosídeo e rutina. Os resultados obtidos indicaram perfis fitoquímicos semelhantes quando as duas metodologias foram aplicadas; entretanto, as intensidades das bandas se apresentaram diferentes quando as estações e as árvores hospedeiras foram comparadas. Considerando que os padrões de PCC podem estar correlacionados com a composição química da tintura-mãe de VA, este projeto de pesquisa multicêntrico propõe uma metodologia de baixo custo e facilmente reprodutível, focada nos parâmetros de controle de qualidade destas matérias-primas vegetais, e novos estudos contribuirão para comprovar a hipótese gerada. Adicionalmente, foi verificado o conhecimento dos farmacêuticos(as) das farmácias magistrais em relação ao V. album, identificando seu uso e demanda. A pesquisa foi realizada através de questionário estruturado, visando mapear os conhecimentos já existentes em nosso país sobre o uso do VA, que identificou um desconhecimento acerca dos diferentes hospedeiros. Os saberes destes profissionais, aliados aos conhecimentos científicos poderão contribuir para a rastreabilidade destes produtos, além de promover o uso racional destes derivados vegetais no Brasil.Viscum album (VA) is a semiparasitic plant with an important role in cancer therapy. Differences in phytochemical composition, as well as the influence of the host tree on the metabolome of the VA subspecies, have been described. This project reviewed Brazilian health legislation regulating good practices for handling and preparing plant materials, discussing the physicochemical parameters of V. album. The main objective of this project was to evaluate the applicability of Pfeiffer\'s Circular Chromatography (PCC) as a qualitative method capable of differentiating V. album Mother Tinctures (MTs). The assays were conducted independently and in triplicate in two countries: Brazil and Switzerland, always using the same MTs. Three VA subspecies (abietis, album and austriacum) from five host trees (Malus domestica, Quercus robur., Ulmus carpinifolia, Pinus sylvestris and Abies alba) were collected in Switzerland in the summer (2017) and winter (2018). The VA MTs were prepared according to the French Pharmacopoeia and the Brazilian Homeopathic Pharmacopoeia. The PCC experiments were performed following the methodology developed by Kokornaczyk and collaborators. The reproducibility of the three independent assays conducted for each experimental set was evaluated using ImageJ software through radial profile analysis. The most significant characteristics of each circular chromatography were used to differentiate the MTs: qualitative measurements of the inner and outer zones; coloration and contrast of the images; and the presence of radial lines. Additionally, High-Performance Thin-Layer Chromatography (HPTLC) was performed by adapting the mobile phases and standards of the Thin-Layer Chromatography methodologies described in the VA monographs published in the French and German Homeopathic Pharmacopoeias. The phytochemical profile of V. album mother tinctures was compared based on the retention factor (Rf) of compounds in comparison to pharmacopoeial chemical standards of chlorogenic acid, caffeic acid, hyperoside, and rutin. The results indicated similar phytochemical profiles when the two methodologies were applied; however, the intensities of the bands varied when comparing different seasons and host trees. Considering that PCC patterns may be correlated with the chemical composition of VA mother tincture, this multicentric research project proposes a low-cost and easily reproducible methodology focused on quality control parameters for these plant raw materials, and further studies will help to validate the generated hypothesis. Additionally, the knowledge of pharmacists in magistral pharmacies regarding V. album was assessed to identify its use and demand. The research was conducted through a structured questionnaire, aiming to map existing knowledge in our country about VA use, which identified a lack of awareness regarding different hosts. The knowledge of these professionals, combined with scientific insights, could contribute to the traceability of these products and promote the rational use of these plant derivatives in Brazil.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPFreitas, Osvaldo deQuaresma, Carla HolandinoPignaton, Cassiana Santos de Oliveira2024-07-30info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60137/tde-19082025-110043/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPReter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-09-16T19:41:06Zoai:teses.usp.br:tde-19082025-110043Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-09-16T19:41:06Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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