Estudos estruturais de enzimas antioxidantes relacionadas à doença de Lou Gehrig e à esquistossomose

• Ano de defesa: 2002
• Autor(a) principal: Cardoso, Rosa Maria Fernandes
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: glutationa s-transferase; amyotrophic lateral sclerosis; antioxidant enzymes; enzimas antioxidantes; esclerose amiotrófica lateral; esquistossomose; glutathione s-transferase; schistosomiasis; superoxide dismutase; superóxido dismutase
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75131/tde-12032026-164110/

As enzimas Cu,Zn superóxido dismutase (Cu,Zn SOD) e glutationa S-transferase são enzimas importantes na defesa dos seres vivos contra a toxicidade dos radicais livres derivados do oxigênio. Mutações pontuais na Cu,Zn SOD humana estão associadas à patogênese e progressão da forma hereditária da esclerose amiotrófica lateral (FALS). Visando compreender a relação entre o efeito estrutural da mutação com a ocorrência da doença, as estruturas do mutante-FALS A4V/C6A/C111S da Cu,Zn SOD humana (A4V) e do mutante \"wild type\" C6A/C111S da Cu,Zn SOD humana (HSAS) foram refinadas, respectivamente, às resoluções de 1,9 Å e 1,8 Å. A comparação estrutural entre A4V e HSAS revelou pequenas diferenças, próximas ao sítio de mutação, que podem ser responsáveis pela desestabilização tanto da arquitetura do barril-β quanto da interface do dímero da proteína A4V. Por outro lado, a Cu,Zn SOD citosólica do Schistosoma mansoni (SmCtSOD) pode representar um \"calcanhar de Aquiles\" no metabolismo do parasita, podendo ser utilizada no desenvolvimento de novos fármacos contra a esquistossomose. Para caracterizar estruturalmente este alvo molecular, a SmCtSOD foi expressa, purificada, cristalizada e sua estrutura resolvida e refinada às resoluções de 2,2 Å e 1,55 Å. A SmCtSOD apresenta o mesmo enovelamento em barril-β das outras Cu,Zn SODs de eucariotos. As diferenças estruturais mais interessantes entre a SmCtSOD e a Cu,Zn SOD humana (HSOD) estão nos loops usados para o guia eletrostático do substrato até o sítio ativo da enzima. Outro alvo molecular contra a esquistossomose é a glutationa S-transferase de 26 kDa do S. japonicum (Sj26GST). Para a caracterização estrutural dos sítios G e H e a otimização de inibidores seletivos para a Sj26GST, as estruturas desta enzima em complexo com os análogos da glutationa, sulfonato de glutationa, S-hexil glutationa e 2-iodo-benzil glutationa foram refinadas até 2,3 Å, 2,1 Å e 2,6 Å, respectivamente. A análise dos complexos em conjunto com simulações de docking permitiu a modelagem do modo de ligação de substratos fisiológicos e a identificação de novos compostos de partida para o desenvolvimento de inibidores seletivos para a Sj26GST.