Diversidade genética e morfológica, relações filogenéticas e taxonomia de tripanossomas de anuros neotropicais.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2022
Autor(a) principal: Sato, Lyslaine Hatsue
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-25112025-184409/
Resumo: O gênero Trypanosoma compreende uma grande diversidade de parasitas presentes em todas as classes de vertebrados distribuídos em duas linhagens filogenéticas principais: Clado Terrestre, composto por tripanossomos de mamíferos, aves e alguns répteis; Clado Aquático, formado por tripanossomas de hospedeiros aquáticos e semiaquáticos, transmitidos por sanguessugas aquáticas e insetos hematófagos; esse clado compreende todos os tripanossomas de peixes e anuros, e alguns de lagartos, quelônios e ornitorrinco. Com o posicionamento filogenético do clado Aquático na base da árvore filogenética do gênero Trypanosoma, esse grupo passou a ser muito importante para estudos evolutivos do gênero. Apesar de inúmeros relatos, em diferentes continentes, de tripanossomas de anuros com notável plasticidade morfológica, apenas recentemente a diversidade e as relações filogenéticas dos tripanossomos desse clado começaram a ser sistematicamente investigadas. Consequentemente, a história evolutiva desse grupo de tripanossoma está longe de ser compreendida. Neste estudo, foram investigadas a diversidade genética e as relações filogenéticas dos tripanossomas de anuros neotropicais. Com esses propósitos, foram obtidas sequências de genes SSU rRNA e gGAPDH de tripanossomas obtidos de culturas e amostras de sangue/tecido. Caracterizamos molecularmente 248 tripanossomas de muitas espécies de Leptodactylidae, Bufonidae e Hilidae, capturados nos biomas brasileiros Amazônia, Mata Atlântica, Pantanal, Caatinga e Cerrado. Além disso, 22 tripanossomas de anuros capturados na Colômbia e Venezuela foram adicionados ao estudo. Inferências filogenéticas apoiaram a monofilia dos tripanossomas de anuros e sugeriram que linhagenes (Anura I e II) formadas por tripanossomos de bufonídeos e ranídeos da Europa, África e América do Norte (clado An04) foram as primeiras a divergir, enquanto todos os tripanossomas de anuros neotropicais foram agrupados em uma linhagem monofilética mais recente. Nossas análises abrangentes apoiam uma história evolutiva complexa de tripanossomas de anuros neotropicais, com duas principais linhagens filogenéticas: Anura III (An03 e An05) e Anura IV (An01, An2, An6 e An07). Descrevemos clados com uma única família de anuro como hospedeiro predominante: An01 de hilídeos, An03 e An07 de bufonídeos e An02 de leptodactilídeos. No entanto, todos os clados incluem tripanossomas de mais de uma família de anuros, sugerindo eventos de troca de hospedeiros, provavelmente, mediados por vetores. Flebotomíneos foram confirmados como vetores de tripanossomas do clado An03, e outros insetos vetores foram sugeridos para outros clados. Tripanossomas de anuros capturados na Colômbia e Venezuela reforçam os clados estabelecidos e indicam ausência de forte estrutura geográfica, provavelmente, devido à recente remodelação das bacias hidrográficas sul-americanas. Nossas análises corroboraram clados previamente determinados, revelaram novos clados e grupos dentro dos clados, e identificaram, pelo menos, 24 novas espécies de tripanossoma fortemente apoiadas por análises filogenéticas. O desenvolvimento em cultura, características morfológicas de culturas e formas sanguíneas, e características ultraestruturais complementam a descrição molecular das novas espécies.
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Com o posicionamento filogenético do clado Aquático na base da árvore filogenética do gênero Trypanosoma, esse grupo passou a ser muito importante para estudos evolutivos do gênero. Apesar de inúmeros relatos, em diferentes continentes, de tripanossomas de anuros com notável plasticidade morfológica, apenas recentemente a diversidade e as relações filogenéticas dos tripanossomos desse clado começaram a ser sistematicamente investigadas. Consequentemente, a história evolutiva desse grupo de tripanossoma está longe de ser compreendida. Neste estudo, foram investigadas a diversidade genética e as relações filogenéticas dos tripanossomas de anuros neotropicais. Com esses propósitos, foram obtidas sequências de genes SSU rRNA e gGAPDH de tripanossomas obtidos de culturas e amostras de sangue/tecido. Caracterizamos molecularmente 248 tripanossomas de muitas espécies de Leptodactylidae, Bufonidae e Hilidae, capturados nos biomas brasileiros Amazônia, Mata Atlântica, Pantanal, Caatinga e Cerrado. Além disso, 22 tripanossomas de anuros capturados na Colômbia e Venezuela foram adicionados ao estudo. Inferências filogenéticas apoiaram a monofilia dos tripanossomas de anuros e sugeriram que linhagenes (Anura I e II) formadas por tripanossomos de bufonídeos e ranídeos da Europa, África e América do Norte (clado An04) foram as primeiras a divergir, enquanto todos os tripanossomas de anuros neotropicais foram agrupados em uma linhagem monofilética mais recente. Nossas análises abrangentes apoiam uma história evolutiva complexa de tripanossomas de anuros neotropicais, com duas principais linhagens filogenéticas: Anura III (An03 e An05) e Anura IV (An01, An2, An6 e An07). Descrevemos clados com uma única família de anuro como hospedeiro predominante: An01 de hilídeos, An03 e An07 de bufonídeos e An02 de leptodactilídeos. No entanto, todos os clados incluem tripanossomas de mais de uma família de anuros, sugerindo eventos de troca de hospedeiros, provavelmente, mediados por vetores. Flebotomíneos foram confirmados como vetores de tripanossomas do clado An03, e outros insetos vetores foram sugeridos para outros clados. Tripanossomas de anuros capturados na Colômbia e Venezuela reforçam os clados estabelecidos e indicam ausência de forte estrutura geográfica, provavelmente, devido à recente remodelação das bacias hidrográficas sul-americanas. Nossas análises corroboraram clados previamente determinados, revelaram novos clados e grupos dentro dos clados, e identificaram, pelo menos, 24 novas espécies de tripanossoma fortemente apoiadas por análises filogenéticas. O desenvolvimento em cultura, características morfológicas de culturas e formas sanguíneas, e características ultraestruturais complementam a descrição molecular das novas espécies.The genus Trypanosoma comprises a highly diversified assembly of obligate parasites widespread through all vertebrate classes, distributed in two major phylogenetic lineages: The Terrestrial clade, composed of trypanosomes from mammals, birds and some reptiles; and the Aquatic clade, harboring trypanosomes of aquatic and semi-aquatic hosts, transmitted by aquatic leeches and insects, including all trypanosomes from fishes and anurans, and a few trypanosomes from lizards, chelonians, and platypus. With the phylogenetic positioning of the Aquatic clade at the base of the Trypanosoma phylogenetic tree, the genetic diversity, phylogenetic relationships, and molecular and cellular biology of Aquatic clade trypanosomes began to be systematically investigated by evolutionary studies. Despite very common hosts of trypanosomes and amazing morphological plasticity through the world, molecular studies of trypanosomes infecting anurans are extremely limited. Consequently, the evolutionary history of this group of trypanosomes is far from understood, and many controversies remains to be solved. In the present study, we assessed the genetic diversity and phylogenetic relationships of trypanosomes from neotropical anurans. With these purposes, sequences of SSU rRNA and gGAPDH genes were determined from trypanosomes obtained from cultures and blood/tissue samples. We characterized 248 trypanosomes from anurans of many species of Leptodactylidae, Bufonidae and Hilidae captured in the Brazilian biomes of Amazonia, Atlantic Forest, Pantanal, Caatinga and Cerrado. Additionally, 22 trypanosomes of anurans captured in Colombia and Venezuela were added to the study. Phylogenetic inferences supported the monophyly of anuran trypanosomes and suggested that the lineage (Anura I) formed by trypanosomes from bufonid and ranids from Europe, Africa, and North America (clade An04) were the first to diverge, whereas the monophyletic assemblage nesting all trypanosomes from neotropical anurans diverged more recently, as also suggested by their quite reduced genetic distances. Our comprehensive analyses support a complex evolutionary history, with inferred relationships within the clade of Neotropical trypanosomes supporting two main phylogenetic lineages: Anura III (clades An03 and An05) and Anura IV (clades An01, An2, An6 and An07). We also described a single family as the predominant host of distinct clades: An01 of hylids, 03 and An07 of bufonids, and An02 of leptodactilids. However, all clades included trypanosomes from more than one anuran family suggesting host-switches mediated by vectors. Sand flies were reinforced as vectors of An03 trypanosomes, whereas vectors suggested for other clades remain to be confirmed. Trypanosomes from Colombia and Venezuela supported the established clades as assemblages lacking strong geographical structures assemblages, most likely, due to the recent reshaping of south American hydrographic basins. Our analyses corroborated clades previously defined, disclosed new clades and groups within the clades and identified, at least, 24 new species of trypanosomes that are strongly supported by phylogenetic analyses. Development in culture, morphology of culture and blood forms, and ultrastructural features complement the molecular description of the new species.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPTeixeira, Marta Maria GeraldesSato, Lyslaine Hatsue2022-03-11info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-25112025-184409/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-11-26T14:23:02Zoai:teses.usp.br:tde-25112025-184409Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-11-26T14:23:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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