Análise da expressão das formas TAp73 e ΔNp73 do gene p73 em pacientes com leucemia mielóide aguda

• Ano de defesa: 2007
• Autor(a) principal: Araújo, Antonio Roberto Lucena de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: ΔNp73; AML; Apoptose; Apoptosis; LMA; TAp73
• Link de acesso: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-09042026-094659/

O p73, homólogo ao p53, participa no processo de apoptose e regulação do ciclo celular, embora seu papel como gene supressor de tumor seja questionável. Este gene possui dois promotores distintos que permitem a formação de duas proteínas com efeitos antagônicos: a TAp73, que atua como um agente pró-apoptótico, e a forma truncada &Delta;Np73, capaz de bloquear a atividade transcripcional da p53 e TAp73, conferindo às células vantagem proliferativa. No presente trabalho foi quantificado a expressão gênica das formas TAp73 e &Delta;Np73 em 147 amostras de LMA de novo e em 22 amostras de precursores hematopoéticos CD34+ de medula óssea de indivíduos sadios por PCR em Tempo Real. Valores significativamente maiores de expressão da forma TAp73 foram detectados nas amostras de LMA em comparação aos progenitores hematopoéticos normais (Média (x&#772;), Desvio Padrão (DP) = 3,691 ± 0,698 versus x&#772; = 0,025 DP = 0,006, respectivamente, p = 0,0327). Da mesma forma, a expressão da forma &Delta;N do gene p73 foi significativamente maior nas células de LMA (x&#772; = 25,100, DP = 4,411 versus x&#772; = 0,458, DP = 0,165, respectivamente, p = 0,0233). Em seguida, foram comparados os níveis de expressão gênica da forma TAp73 entre o grupo de pacientes com LMA Portador de Rearranjo Gênico (PRG, n = 79), composto por amostras positivas para os rearranjos gênicos PML-RAR&alpha; (n = 32), AML1-ETO (n = 17) ou CBF&beta;-MYH11 (n = 30), e o grupo Sem Rearranjo Gênico (SRG, n = 68), formado por amostras em que a pesquisa desses rearranjos foi negativa. O grupo PRG apresentou níveis significativamente mais altos de expressão gênica da forma pró-apoptótica TAp73 (PRG: x&#772; = 5,174, DP = 1,179 versus SRG: x&#772; = 1,731, DP = 0,303, p = 0,014). Entretanto, quando analisada a expressão gênica da forma &Delta;Np73 entre os grupos PRG e SRG, observaram-se maiores níveis de expressão gênica da forma antiapoptótica &Delta;Np73 no grupo SRG (PRG: x&#772; = 10,62, DP = 1,552 versus SRG: x&#772; = 44,23, DP = 9,487, p = 0,0001). Não foram detectadas diferenças significativas entre as formas TAp73 e &Delta;Np73 nos três subtipos de LMA incluídos no grupo PRG. Subdividimos arbitrariamente os pacientes com LMA de novo em quatro subgrupos distintos, baseado na razão x&#772;Np73 / TAp73, a saber: 1. Grupo com razão &Delta;Np73 / TAp73 > 100; 2. Grupo com 100 &plusmn; razão &Delta;Np73 / TAp73 &plusmn; 10; 3. Grupo com > 10 razão &Delta;Np73 / TAp73 &plusmn; 1 e 4. Grupo com razão &Delta;Np73 / TAp73 < 1. Não foram observadas diferenças significativas entre estes grupos quanto a idade dos pacientes, dosagem de hemoglobina, contagens de leucócitos e plaquetas ao diagnóstico. Entretanto, a freqüência de casos PML-RAR&alpha;, AML1-ETO, CBF&beta;-MYH11 positivos foi significativamente maior no grupo com razão &Delta;Np73 / TAp73 < 1. Além disto, a expressão do gene p53 não variou de acordo com o valor da razão &Delta;Np73 / TAp73. Foi realizado um ensaio de citotoxicidade in vitro induzida por ARA-C para avaliarmos a relação entre a sensibilidade à quimioterapia e o padrão de expressão das formas do gene p73. Células leucêmicas que apresentaram uma maior razão &Delta;Np73 / TAp73 foram significativamente mais resistentes a apoptose induzida pela droga. Corroborando com os achados da expressão gênica, as amostras que apresentaram uma maior razão de expressão protéica &Delta;Np73 / TAp73 também foram mais resistentes a apoptose induzida por ARA-C. Nossos achados sugerem que há uma associação entre a presença dos rearranjos gênicos PML-RAR&alpha;, AML1-ETO, CBF&beta;-MYH11 e uma maior expressão da forma TAp73 em relação a &Delta;Np73. Além disso, o padrão de expressão relativa da forma &Delta;Np73 pode estar associado à resposta diferencial aos estímulos pró-apoptóticos e à terapêutica.