Preparo de amostra e LC-MS/MS para análise metabolômica de fluidos biológicos de pacientes de pediatria após infecção pela COVID-19
| Ano de defesa: | 2024 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75135/tde-19022025-090959/ |
Resumo: | A metabolômica tem se destacado como uma ferramenta complementar para a compreensão aprofundada dos efeitos de diversas doenças. Neste estudo, buscou-se avaliar o metaboloma de pacientes pediátricos, focando em características moleculares presentes na matriz de leucócitos, com o objetivo de contribuir para diagnósticos mais precisos. A pesquisa adotou uma abordagem metabolômica não direcionada para o preparo de amostras e análise do perfil metabólico, utilizando LC-HRMS. Foram consideradas as matrizes de plasma e leucócitos de pacientes pediátricos após infecção por COVID-19, com identificação putativa de características moleculares. O metanol foi o solvente que apresentou melhor desempenho na extração, resultando no maior número de características moleculares em ambas as matrizes. Na segunda fase do estudo, os metabólitos arginina, hipoxantina, adenosina e O-fosfoetanolamina foram anotados putativamente na matriz de leucócitos, corroborando achados prévios da literatura. Além disso, as características moleculares LysoPC(16:0), histamina, ácido L-glutâmico, glicerofosfocolina, 3\'-AMP, fosfocolina, pirofosfato, ortofosfato, adenosina 5\'-difosforibose, glutationa e ácido azelaico também se apresentaram como relevantes metabólitos identificados na matriz leucócitos neste trabalho. Esses resultados indicam que a matriz de leucócitos pode ser uma importante ferramenta para a investigação clínica de candidatos a biomarcadores, oferecendo novas perspectivas para a compreensão dos mecanismos de ação de doenças que afetam o sistema imunológico. |
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Preparo de amostra e LC-MS/MS para análise metabolômica de fluidos biológicos de pacientes de pediatria após infecção pela COVID-19Sample preparation and LC-MS/MS for metabolomic analysis of biological fluids from pediatric patients post COVID-19 infectionanálise não direcionadabiological fluidsfluidos biológicosLC-HRMSLC-HRMSmetabolômicametabolomicspreparo de amostrassample preparationuntargeted analysisA metabolômica tem se destacado como uma ferramenta complementar para a compreensão aprofundada dos efeitos de diversas doenças. Neste estudo, buscou-se avaliar o metaboloma de pacientes pediátricos, focando em características moleculares presentes na matriz de leucócitos, com o objetivo de contribuir para diagnósticos mais precisos. A pesquisa adotou uma abordagem metabolômica não direcionada para o preparo de amostras e análise do perfil metabólico, utilizando LC-HRMS. Foram consideradas as matrizes de plasma e leucócitos de pacientes pediátricos após infecção por COVID-19, com identificação putativa de características moleculares. O metanol foi o solvente que apresentou melhor desempenho na extração, resultando no maior número de características moleculares em ambas as matrizes. Na segunda fase do estudo, os metabólitos arginina, hipoxantina, adenosina e O-fosfoetanolamina foram anotados putativamente na matriz de leucócitos, corroborando achados prévios da literatura. Além disso, as características moleculares LysoPC(16:0), histamina, ácido L-glutâmico, glicerofosfocolina, 3\'-AMP, fosfocolina, pirofosfato, ortofosfato, adenosina 5\'-difosforibose, glutationa e ácido azelaico também se apresentaram como relevantes metabólitos identificados na matriz leucócitos neste trabalho. Esses resultados indicam que a matriz de leucócitos pode ser uma importante ferramenta para a investigação clínica de candidatos a biomarcadores, oferecendo novas perspectivas para a compreensão dos mecanismos de ação de doenças que afetam o sistema imunológico.Metabolomics has emerged as a complementary tool for a deeper understanding of the effects of various diseases. In this study, we aimed to evaluate the metabolome of pediatric patients, focusing on molecular features found in the leukocyte matrix, with the objective of contributing to more precise diagnoses. The research employed an untargeted metabolomics approach for sample preparation and metabolic profiling, using LC-HRMS. Plasma and leukocyte matrices from pediatric patients after COVID-19 infection were analyzed, with the putative identification of molecular characteristics. Methanol was the solvent that demonstrated the best performance in extraction, yielding the highest number of molecular features in both matrices. In the second phase of the study, the metabolites arginine, hypoxanthine, adenosine, and O-phosphoethanolamine were putatively annotated in the leukocyte matrix, corroborating previous findings in the literature. Moreover, the molecular features LysoPC(16:0), histamine, L-glutamic acid, glycerophosphocholine, 3\'-AMP, phosphocholine, pyrophosphate, orthophosphate, adenosine 5\'-diphosphoribose, glutathione, and azelaic acid were also identified as relevant metabolites in the leukocyte matrix in this study. These findings suggest that the leukocyte matrix can serve as an important tool for clinical investigation of biomarker candidates, offering new perspectives for understanding the mechanisms of diseases that affect the immune system.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSantos Neto, Álvaro José dosBarci, Paulo Emílio Pereira2024-12-20info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75135/tde-19022025-090959/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-02-19T13:39:02Zoai:teses.usp.br:tde-19022025-090959Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-02-19T13:39:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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A metabolômica tem se destacado como uma ferramenta complementar para a compreensão aprofundada dos efeitos de diversas doenças. Neste estudo, buscou-se avaliar o metaboloma de pacientes pediátricos, focando em características moleculares presentes na matriz de leucócitos, com o objetivo de contribuir para diagnósticos mais precisos. A pesquisa adotou uma abordagem metabolômica não direcionada para o preparo de amostras e análise do perfil metabólico, utilizando LC-HRMS. Foram consideradas as matrizes de plasma e leucócitos de pacientes pediátricos após infecção por COVID-19, com identificação putativa de características moleculares. O metanol foi o solvente que apresentou melhor desempenho na extração, resultando no maior número de características moleculares em ambas as matrizes. Na segunda fase do estudo, os metabólitos arginina, hipoxantina, adenosina e O-fosfoetanolamina foram anotados putativamente na matriz de leucócitos, corroborando achados prévios da literatura. Além disso, as características moleculares LysoPC(16:0), histamina, ácido L-glutâmico, glicerofosfocolina, 3\'-AMP, fosfocolina, pirofosfato, ortofosfato, adenosina 5\'-difosforibose, glutationa e ácido azelaico também se apresentaram como relevantes metabólitos identificados na matriz leucócitos neste trabalho. Esses resultados indicam que a matriz de leucócitos pode ser uma importante ferramenta para a investigação clínica de candidatos a biomarcadores, oferecendo novas perspectivas para a compreensão dos mecanismos de ação de doenças que afetam o sistema imunológico. |
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