Análise dos rearranjos gênicos de cadeias pesada e leves da imunoglobulina pela técnica de reação em cadeia da polimerase no auxílio diagnóstico de processos linfoproliferativos cutâneos de células B

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Guimarães, Adriana Borba
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: B-cell lymphoma; Cadeias leves de imunoglobulina; Cadeias pesadas de imunoglobulinas; Gene rearrangement; Immunoglobulin Heavy Chains; Immunoglobulin Light Chains; Linfoma de células B; Polymerase Chain Reaction; Pseudolinfoma; Pseudolymphoma; Reação em cadeia de polimerase; Rearranjo gênico
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5133/tde-14042023-153906/

Processos linfoproliferativos cutâneos de células B (PLPCB) incluem pseudolinfomas, proliferações linfoides atípicas e linfomas. Os linfomas cutâneos primários de células B (LCPCB) representam aproximadamente 20-25% de todos os linfomas cutâneos primários. Pseudolinfoma (PLC) é uma lesão de pele benigna, que se assemelha, em sua forma clínica e/ou histológica aos linfomas cutâneos. O diagnóstico diferencial entre o PLC e LCPCB pode ser muito difícil. A pesquisa dos rearranjos gênicos das cadeias pesada (IgH) e leves kappa (IgK) e lambda (IgL) da imunoglobulina (Ig) através da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR), tem sido utilizada como método auxiliar no diagnóstico dos LCPCB. Objetivos principais: avaliar a aplicabilidade da técnica de PCR (baseada no protocolo EuroClonality/BIOMED-2) para pesquisa de clonalidade através da análise dos rearranjos gênicos das cadeias pesada e leves de Ig em material proveniente de biópsias cutâneas de pacientes acompanhados no Ambulatório de Linfomas Cutâneos do HCFMUSP que tiveram diagnóstico de PLPCB (PLC, LCPCB ou indefinição diagnóstica entre ambos). Objetivos secundários: avaliar o auxílio diagnóstico do estudo de rearranjo gênico de Ig por PCR nos casos de PLPCB com indefinição diagnóstica. Identificar a contribuição do protocolo de investigação diagnóstica (PID) e algoritmo propostos para a conclusão diagnóstica final e definição de conduta de casos de PLPCB com dificuldade diagnóstica. Métodos: Os pacientes foram submetidos ao PID através de avaliação dos critérios clínicos-evolutivos (CE), histopatológicos associado a imuno-histoquímicos (HP+IHQ) e pesquisa de clonalidade pela análise do rearranjo gênico da Ig por PCR. Os resultados dos critérios foram associados à escala de pontuações. Resultados: Na pesquisa de clonalidade do rearranjo gênico da cadeia pesada, observou-se monoclonalidade em 57,1% (20/35) dos casos avaliados. Na avaliação da clonalidade do rearranjo gênico das cadeias leves, observou-se monoclonalidade em 51,4% (18/35) dos casos avaliados. Nos resultados finais dos critérios avaliados no PID referente aos casos estudados, observou-se casos compatíveis com linfomas cutâneos em 32,4% (11/34) pelo critério CE, 62,9% (22/35) de casos compatíveis com linfomas cutâneos pela avaliação HP+IHQ e resultados monoclonais por estudo de rearranjo gênico de Ig em 77,1% (27/35) dos casos. Observou-se significância estatística na associação entre o grau de suspeição clínica-evolutiva e o resultado histopatológico-imunohistoquímico (p=0.021) pelo teste do qui-quadrado e teste exato de Fisher. Ao se considerar possibilidade da clonalidade por PCR no estudo do rearranjo gênico como método padrão-ouro na diferenciação entre processo linfoproliferativo maligno e benigno, foram calculados valor ideal de corte da pontuação final dos escores do PID igual a 4, com sensibilidade de 100% e especificidade de 33,33 % (pelo índice de Youden). A melhor especificidade foi determinada a partir da pontuação 9 (sensibilidade de 38,5% e especificidade de 100%). A acurácia da pontuação final foi de 80,13% (através da curva ROC). Conclusões: o presente estudo possibilitou o auxílio diagnóstico de casos de PLPCB através do estudo de rearranjo gênico de Ig por PCR na associação com critérios clínico-evolutivos, histopatológicos e imunohistoquímicos. O PID permitiu a realização de um algoritmo de conclusão diagnóstica final e conduta de casos de PLPCB com dificuldade diagnóstica. Os resultados do PID possibilitou a avaliação de diferenciação entre processo linfoproliferativo maligno e benigno através de valor ideal de corte da pontuação final dos escores com adequada especificidade e acurácia