Estudo dos efeitos da inativação fotodinâmica na persistência bacteriana a antibióticos

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Corrêa, Bruna Carolina
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Antibiotic; Antibiótico; Bacterial persistence; Escherichia coli; Persistência bacteriana; Tolerance; Tolerância
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-14052025-083340/

A persistência bacteriana é caracterizada por subpopulações que sobrevivem temporariamente a tratamentos com antibióticos sem apresentar mutações de resistência. Diferente da resistência, que envolve alterações genéticas fixas, a persistência é um fenômeno fenotípico que favorece a tolerância aos antibióticos e pode contribuir indiretamente para o surgimento da resistência. Essas subpopulações persistentes desempenham um papel crítico em infecções crônicas e no fracasso terapêutico. O objetivo principal deste estudo foi investigar se a Inativação Fotodinâmica (IFD) apresenta efeitos na persistência bacteriana de Escherichia coli. Para isso, foram realizados checklists analíticos da persistência bacteriana baseados principalmente em ensaios de Time-Kill (TK) e na avaliação das progênies, com foco na obtenção de curvas bifásicas características. Essas curvas permitiram determinar o Minimum Duration for Killing (MDK), nos níveis de 99% (MDK99) ou 99,99% (MDK99,9), fornecendo informações cruciais sobre o comportamento das subpopulações persistentes durante o tratamento com antibióticos. Foi padronizada a IFD para a E. coli linhagem ATCC 25922, determinando-se a melhor concentração subinibitória do fotossensibilizador azul de metileno e a melhor dose de luz subinibitória. Após a padronização, utilizou-se a dose de luz de 10 J/cm2 e o azul de metileno a 10 μM para realizar a IFD nas células persistentes e células-filhas sobreviventes do primeiro tratamento. Os resultados demonstraram que o padrão da curva de morte característico da persistência depende do antibiótico utilizado. Com a Amoxicilina, E. coli apresentou maior tolerância, com um MDK maior em comparação com a Gentamicina. Além disso, a IFD alterou a curva de morte típica da persistência, e a aplicação da IFD nas células-filhas resultou em mudanças no padrão da curva de morte, reduzindo o MDK em algumas condições. Esses resultados indicam que a IFD tem potencial para reverter a persistência bacteriana, entretanto há necessidade de otimizar o protocolo investigando outros antibióticos e fotossensibilizadores.