Decifrando o papel do operon xyl de Burkholderia sacchari na regulação do catabolismo de xilose

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2022
Autor(a) principal: Torres, Matheus Marques
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052024-085002/
Resumo: Atualmente, há um esforço evidente no desenvolvimento de produtos de alto valor agregado a partir de microrganismos que consigam utilizar eficientemente matrizes energéticas renováveis. Um bom exemplo de insumo para este fim é o bagaço de cana de açúcar. Uma vez utilizado para produção de açúcar e outros produtos, sua palha constitui um resíduo ainda não utilizado em sua totalidade, devido a suas características intrínsecas. Além disso, possui uma elevada produção, atingindo mais de 25 milhões de toneladas de bagaço disponíveis anualmente no Brasil. Por constituir-se de material lignocelulósico, para servir de fonte de carbono, necessita passar por estágios de pré-processamento como a hidrólise, a fim de liberar no meio a celulose e hemicelulose do complexo formado pela lignina. Devido a esse fato, e ao custo atrelado a essa etapa, é razoável visualizar a necessidade de microrganismos que possam consumir as hexoses e pentoses presentes nesses resíduos a fim de baratear o custo de utilização. Um dos componentes mais abundantes na lignocelulose, e o segundo açúcar mais abundante na natureza, é a xilose. A utilização dessa pentose, no entanto, ainda possui barreiras para ser efetivada, sendo uma delas a metabolização eficiente por meio de microrganismos capazes, já que uma elevada parte de bactérias e leveduras, não consomem eficientemente a xilose frente a outros açúcares já fundamentados na literatura como a sacarose ou glicose. Uma exceção importante é a bactéria Burkholderia sacchari, capaz de obter altos valores de crescimento em xilose e utilizá-la na produção de polihidroxialcanoatos, bioplásticos benquistos devido a suas propriedades físicas e biocompatíveis e, portanto, seu potencial de substituir a matriz mundial de plásticos oriundos de petróleo. Para expandir o conhecimento no catabolismo desse açúcar em B. sacchari e consolidar futuras hipóteses na otimização destas vias, uma vez que o máximo teórico de utilização de xilose ainda não foi atingido, o presente trabalhou avaliou os genes presentes no operon xyl. Participando da via da isomerase, esse operon em B. sacchari foi descrito previamente na literatura possuindo os genes XylR, XylA, XylB e XylFGH, e foi analisado por meio de testes in sílico. O sequenciamento do genoma desta bactéria também foi conduzido a fim de obter dados genômicos precisos e verificar a existência de possíveis outras vias do catabolismo de xilose. Além disso, foi avaliado o uso de técnicas moleculares para a produção de mutantes Xyl- , incapazes de crescer em xilose, para avaliação fenotípica e confirmação da rota descrita.
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Por constituir-se de material lignocelulósico, para servir de fonte de carbono, necessita passar por estágios de pré-processamento como a hidrólise, a fim de liberar no meio a celulose e hemicelulose do complexo formado pela lignina. Devido a esse fato, e ao custo atrelado a essa etapa, é razoável visualizar a necessidade de microrganismos que possam consumir as hexoses e pentoses presentes nesses resíduos a fim de baratear o custo de utilização. Um dos componentes mais abundantes na lignocelulose, e o segundo açúcar mais abundante na natureza, é a xilose. A utilização dessa pentose, no entanto, ainda possui barreiras para ser efetivada, sendo uma delas a metabolização eficiente por meio de microrganismos capazes, já que uma elevada parte de bactérias e leveduras, não consomem eficientemente a xilose frente a outros açúcares já fundamentados na literatura como a sacarose ou glicose. Uma exceção importante é a bactéria Burkholderia sacchari, capaz de obter altos valores de crescimento em xilose e utilizá-la na produção de polihidroxialcanoatos, bioplásticos benquistos devido a suas propriedades físicas e biocompatíveis e, portanto, seu potencial de substituir a matriz mundial de plásticos oriundos de petróleo. Para expandir o conhecimento no catabolismo desse açúcar em B. sacchari e consolidar futuras hipóteses na otimização destas vias, uma vez que o máximo teórico de utilização de xilose ainda não foi atingido, o presente trabalhou avaliou os genes presentes no operon xyl. Participando da via da isomerase, esse operon em B. sacchari foi descrito previamente na literatura possuindo os genes XylR, XylA, XylB e XylFGH, e foi analisado por meio de testes in sílico. O sequenciamento do genoma desta bactéria também foi conduzido a fim de obter dados genômicos precisos e verificar a existência de possíveis outras vias do catabolismo de xilose. Além disso, foi avaliado o uso de técnicas moleculares para a produção de mutantes Xyl- , incapazes de crescer em xilose, para avaliação fenotípica e confirmação da rota descrita.Currently, there is an evident effort to develop products with high added value from microorganisms that are able to efficiently use renewable energy matrices. A good example of an input for this purpose is sugarcane bagasse. Once used for the production of sugar and other products, its straw constitutes a residue that has not yet been used in its entirety, due to its intrinsic characteristics. In addition, it has a high production, reaching more than 25 million tons of bagasse available annually in Brazil. As it consists of lignocellulosic material, to serve as a carbon source, it needs to go through pre-processing stages such as hydrolysis, in order to release the cellulose and hemicellulose from the complex formed by lignin into the medium. Due to this fact, and the cost linked to this step, it is reasonable to visualize the need for microorganisms that can consume hexoses and pentoses present in these residues in order to lower the cost of use. One of the most abundant components in lignocellulose, and the second most abundant sugar in nature, is xylose. The use of this pentose, however, still has barriers to be implemented, one of them being the efficient metabolism by capable microorganisms, since a high proportion of bacteria and yeasts do not efficiently consume xylose compared to other sugars already based in the literature like sucrose or glucose. An important exception is the bacterium Burkholderia sacchari, capable of obtaining high growth values in xylose and using it in the production of polyhydroxyalkanoates, popular bioplastics due to its physical and biocompatible properties and, therefore, its potential to replace the world matrix of petrochemical plastics. To expand the knowledge on the catabolism of this sugar in B. sacchari and consolidate future hypotheses for optimizing these pathways, since the theoretical maximum for the use of xylose has not yet been reached, the present work evaluated the genes present in the xyl operon. As part of the isomerase pathway, this operon in B. sacchari was previously described in the literature as having the genes XylR, XylA, XylB and XylFGH, and was analyzed using in silico tests. The genome sequencing of this bacterium was also carried out in order to obtain precise genomic data and verify the existence of other possible pathways of xylose catabolism. Furthermore, the use of molecular techniques for the production of Xyl- mutants, unable to grow in xylose, was evaluated for phenotypic evaluation and confirmation of the described route.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSilva, Luiziana Ferreira daTorres, Matheus Marques2022-07-12info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16052024-085002/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPReter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-10-02T20:05:02Zoai:teses.usp.br:tde-16052024-085002Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-10-02T20:05:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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