Extração líquido-líquido aplicada à separação e purificação da amiloglicosidase.

• Ano de defesa: 1997
• Autor(a) principal: Minami, Nancy Miyuki
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Aqueous two-phase systems; Extração líquido-líquido; Liquid-liquid extraction; Proteínas (Separação); Proteins (Separation); Sistemas de duas fases aquosas
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-07012026-105949/

Estudou-se a aplicação da extração líquido-líquido na separação da amiloglicosidase produzida pelo cultivo de Aspergillus awamori, utilizando sistemas de duas fases aquosas compostos por polietileno glicol (PEG) e fosfato de potássio, e de micelas reversas formados por BDBAC, isooctano e hexanol. O comportamento da partição da amiloglicosidase em sistemas de duas fases aquosas foi verificado através do estudo da influência do peso molecular e grau de pureza do PEG, concentração de proteínas do caldo clarificado, pH do sistema e comprimento da linha de amarração. O coeficiente de partição (K) aumentou com a diminuição do peso molecular do PEG, o mesmo ocorrendo com o pH do sistema. No sistema formado por PEG 300 e pH 7, ovalor de K foi 125, enquanto que no sistema PEG 6000 e pH 9, esse valor foi de 1,1 x \'10 POT.-3\'. Em todos os sistemas formados por PEG de peso molecular superior a 600, foram obtidos valores de K da ordem de \'10 POT.-2\' a \'10 POT.-4\',independentemente do pH do sistema. Todas as variáveis influenciaram K nos sistemas de PEG 300, porém não causaram influência nos sistemas de PEG 4000 e 1500. O aumento da concentração de proteínas aumentou K até o valor máximo de 1682 com concentração 1523 mg/L, quando diminuiu. O aumento do comprimento da linha de amarração provocou um aumento em K, onde o máximo foi 4121. O grau de pureza do PEG não provocou mudanças em K. Para aumentar a pureza da amiloglicosidase, foram realizadas extrações em duas etapas. O sistema queapresentou a melhor condição foi com PEG 4000 na primeira etapa, 1500 na segunda e pH 7, chegando a uma taxa de recuperação da enzima de 95%. Nos sistemas de micelas reversas, estudou-se somente a etapa de reextração, variando-se temperatura, pH e condições do tampão de reextração. A taxa de recuperação da amiloglicosidase foi menor que 10% em todos os casos, devido à sua desnaturação através da formação de um complexo tensoativo-enzima.