O impacto das alterações lipídicas e sua relação com a criopreservação, capacitação e fertilidade espermática de touros Nelore

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2025
Autor(a) principal: Bozzi, Alexandre da Rocha
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-11062025-161908/
Resumo: A fertilidade de touros é um fator crítico para a eficiência reprodutiva e sustentabilidade da pecuária de corte. A capacitação espermática, processo fundamental para que ocorra a fecundação, pode ser prejudicada pelo processo da criopreservação do sêmen, o que pode ser a causa da variabilidade do potencial de fertilidade do sêmen criopreservado de touros. As modificações lipídicas dos espermatozoides, que ocorrem durante a capacitação e a criopreservação, podem apontar potenciais biomarcadores moleculares que possam auxiliar na seleção de reprodutores e na otimização dos protocolos de conservação seminal. Neste contexto, a lipidômica surge como uma ferramenta promissora para a identificação de padrões lipídicos que influenciam a qualidade espermática e a resistência ao processo de criopreservação. O objetivo deste estudo foi investigar a relação entre o perfil lipídico espermático e os processos de capacitação espermática e criopreservação, visando compreender as alterações estruturais e funcionais da membrana plasmática dos espermatozoides e afetam o potencial de fertilidade. Para isso, foram conduzidos três estudos experimentais: (1) análise do perfil lipidômico espermático antes e após a indução in vitro da capacitação espermática, (2) avaliação das mudanças lipídicas associadas à criopreservação do sêmen bovino e sua relação com a capacitação espermática e (3) avaliação do perfil lipídico de touros de alta fertilidade e alta responsividade à capacitação espermática e touros de baixa fertilidade e baixa responsividade à capacitação espermática. No primeiro estudo, amostras de sêmen de 12 touros Nelore (n = 36 ejaculados) foram avaliadas antes e após a capacitação espermática induzida in vitro. A capacitação espermática aumentou a peroxidação lipídica, o desarranjo dos lipídios da membrana plasmática, a distribuição espacial do colesterol na membrana, a translocação da fosfatidilserina e a reação acrossomal, sugerindo maior fluidez da membrana. A análise lipidômica revelou que a capacitação reduziu a abundância de 18 lipídios e aumentou 1,38 vezes (p = 0,010) a concentração de estearoilcarnitina (CAR 18:0), indicando maior mobilização lipídica para suporte energético. No segundo estudo, amostras de sêmen de 12 touros foram avaliadas antes e após a criopreservação quanto às características espermáticas morfofuncionais e perfil lipidômico. A análise revelou que espermatozoides criopreservados apresentaram redução da motilidade, do potencial mitocondrial e da integridade das membranas plasmática e acrossomal, bem como aumento da desordem e peroxidação lipídica, do efluxo de colesterol e da translocação de fosfatidilserina, indicando danos principais nas membranas espermáticas. No lipidoma foram encontrados 215 lipídios diferentemente abundantes, sendo que a criopreservação reduziu 155 lipídios e aumentou 60. Os principais resultados dos efeitos da criopreservação incluem aumento de fosfatidilcolina (PC); fosfatidiletanolaminas (PE) e fosfatidilinositol (PI), indicando possíveis alterações nos componentes de membrana induzidas pela criopreservação. O terceiro estudo investigou a influência da composição lipídica dos espermatozoides em touros Nelore classificados como de alta fertilidade e alta responsividade à capacitação espermática (AFAC) e baixa fertilidade e baixa responsividade à capacitação espermática (BFBC). A análise lipidômica revelou que os espermatozoides dos touros AFAC apresentavam diferenças significativas na abundância de diversos lipídios em comparação aos touros BFBC, incluindo aumento de fosfatidilcolinas (PCs), fosfatidilgliceróis (PGs), fosfatidiletanolaminas (PEs), lisofosfatidilcolinas (LysoPCs), fosfatidilserinas (PSs), além de derivados de carnitina e ácidos graxos. Esses achados sugerem que a composição lipídica dos espermatozoides pode estar associada ao potencial de fertilidade desses animais. Após a capacitação espermática, alguns compostos foram detectados em maior abundância exclusivamente nos touros AFAC, como DHAP(O-18:0), leucotrieno C4, Estriol-16- Glucuronide e ácido palmítico, indicando possíveis diferenças na mobilização lipídica durante esse processo. Dessa forma, os resultados deste estudo fornecem subsídios para a identificação de potenciais biomarcadores lipídicos relacionados aos eventos da capacitação, processo da criopreservação e da fertilidade de partidas de sêmen de bovinos, contribuindo para o aprimoramento da seleção de reprodutores e a otimização de biotécnicas reprodutivas.
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spelling O impacto das alterações lipídicas e sua relação com a criopreservação, capacitação e fertilidade espermática de touros NeloreThe impact of lipid alterations and their relationship with cryopreservation, capacitation, and sperm fertility of Nelore bullsBovine fertilityCapacitação espermáticaCriopreservaçãoCryopreservationEspermatozoidesFertilidade bovinaLipidômicaLipidomicsSperm capacitationSpermatozoaA fertilidade de touros é um fator crítico para a eficiência reprodutiva e sustentabilidade da pecuária de corte. A capacitação espermática, processo fundamental para que ocorra a fecundação, pode ser prejudicada pelo processo da criopreservação do sêmen, o que pode ser a causa da variabilidade do potencial de fertilidade do sêmen criopreservado de touros. As modificações lipídicas dos espermatozoides, que ocorrem durante a capacitação e a criopreservação, podem apontar potenciais biomarcadores moleculares que possam auxiliar na seleção de reprodutores e na otimização dos protocolos de conservação seminal. Neste contexto, a lipidômica surge como uma ferramenta promissora para a identificação de padrões lipídicos que influenciam a qualidade espermática e a resistência ao processo de criopreservação. O objetivo deste estudo foi investigar a relação entre o perfil lipídico espermático e os processos de capacitação espermática e criopreservação, visando compreender as alterações estruturais e funcionais da membrana plasmática dos espermatozoides e afetam o potencial de fertilidade. Para isso, foram conduzidos três estudos experimentais: (1) análise do perfil lipidômico espermático antes e após a indução in vitro da capacitação espermática, (2) avaliação das mudanças lipídicas associadas à criopreservação do sêmen bovino e sua relação com a capacitação espermática e (3) avaliação do perfil lipídico de touros de alta fertilidade e alta responsividade à capacitação espermática e touros de baixa fertilidade e baixa responsividade à capacitação espermática. No primeiro estudo, amostras de sêmen de 12 touros Nelore (n = 36 ejaculados) foram avaliadas antes e após a capacitação espermática induzida in vitro. A capacitação espermática aumentou a peroxidação lipídica, o desarranjo dos lipídios da membrana plasmática, a distribuição espacial do colesterol na membrana, a translocação da fosfatidilserina e a reação acrossomal, sugerindo maior fluidez da membrana. A análise lipidômica revelou que a capacitação reduziu a abundância de 18 lipídios e aumentou 1,38 vezes (p = 0,010) a concentração de estearoilcarnitina (CAR 18:0), indicando maior mobilização lipídica para suporte energético. No segundo estudo, amostras de sêmen de 12 touros foram avaliadas antes e após a criopreservação quanto às características espermáticas morfofuncionais e perfil lipidômico. A análise revelou que espermatozoides criopreservados apresentaram redução da motilidade, do potencial mitocondrial e da integridade das membranas plasmática e acrossomal, bem como aumento da desordem e peroxidação lipídica, do efluxo de colesterol e da translocação de fosfatidilserina, indicando danos principais nas membranas espermáticas. No lipidoma foram encontrados 215 lipídios diferentemente abundantes, sendo que a criopreservação reduziu 155 lipídios e aumentou 60. Os principais resultados dos efeitos da criopreservação incluem aumento de fosfatidilcolina (PC); fosfatidiletanolaminas (PE) e fosfatidilinositol (PI), indicando possíveis alterações nos componentes de membrana induzidas pela criopreservação. O terceiro estudo investigou a influência da composição lipídica dos espermatozoides em touros Nelore classificados como de alta fertilidade e alta responsividade à capacitação espermática (AFAC) e baixa fertilidade e baixa responsividade à capacitação espermática (BFBC). A análise lipidômica revelou que os espermatozoides dos touros AFAC apresentavam diferenças significativas na abundância de diversos lipídios em comparação aos touros BFBC, incluindo aumento de fosfatidilcolinas (PCs), fosfatidilgliceróis (PGs), fosfatidiletanolaminas (PEs), lisofosfatidilcolinas (LysoPCs), fosfatidilserinas (PSs), além de derivados de carnitina e ácidos graxos. Esses achados sugerem que a composição lipídica dos espermatozoides pode estar associada ao potencial de fertilidade desses animais. Após a capacitação espermática, alguns compostos foram detectados em maior abundância exclusivamente nos touros AFAC, como DHAP(O-18:0), leucotrieno C4, Estriol-16- Glucuronide e ácido palmítico, indicando possíveis diferenças na mobilização lipídica durante esse processo. Dessa forma, os resultados deste estudo fornecem subsídios para a identificação de potenciais biomarcadores lipídicos relacionados aos eventos da capacitação, processo da criopreservação e da fertilidade de partidas de sêmen de bovinos, contribuindo para o aprimoramento da seleção de reprodutores e a otimização de biotécnicas reprodutivas.Bull fertility is a critical factor for reproductive efficiency and the sustainability of beef cattle production. Sperm capacitation, a fundamental process for fertilization, can be impaired by semen cryopreservation, which may be the cause of the variability in the fertility potential of cryopreserved bull semen. The lipid modifications in spermatozoa that occur during capacitation and cryopreservation may indicate molecular biomarkers that can aid in the selection of breeding bulls and the optimization of semen preservation protocols. In this context, lipidomics emerges as a promising tool for identifying lipid patterns that influence sperm quality and resistance to the cryopreservation process. The objective of this thesis was to investigate the relationship between the sperm lipid profile and the processes of sperm capacitation and cryopreservation, aiming to understand the structural and functional alterations of the sperm plasma membrane that affect fertility potential. To achieve this, three experimental studies were conducted: (1) analysis of the sperm lipidomic profile before and after in vitro- induced sperm capacitation, (2) evaluation of lipid changes associated with bovine semen cryopreservation and its relationship with sperm capacitation, and (3) assessment of the lipid profile of bulls with high fertility and high responsiveness to sperm capacitation compared to bulls with low fertility and low responsiveness to sperm capacitation. In the first study, semen samples from 12 Nelore bulls (n = 36 ejaculates) were evaluated before and after in vitro- induced sperm capacitation. Sperm capacitation increased lipid peroxidation, plasma membrane lipid disorganization, cholesterol spatial distribution within the membrane, phosphatidylserine translocation, and the acrosome reaction, suggesting greater membrane fluidity. Lipidomic analysis revealed that capacitation reduced the abundance of 18 lipids and increased the concentration of stearoylcarnitine (CAR 18:0) by 1.38 times (p = 0.010), indicating enhanced lipid mobilization for energy support. In the second study, semen samples from 12 bulls were evaluated before and after cryopreservation for sperm morphofunctional characteristics and lipidomic profile. The analysis revealed that cryopreserved spermatozoa exhibited reduced motility, mitochondrial potential, and integrity of the plasma and acrosomal membranes, as well as increased lipid disorder and peroxidation, cholesterol efflux, and phosphatidylserine translocation, indicating major damage to sperm membranes. The lipidomic analysis identified 215 differentially abundant lipids, with cryopreservation reducing 155 lipids and increasing 60. The main effects of cryopreservation included an increase in phosphatidylcholine (PC), phosphatidylethanolamines (PE), and phosphatidylinositol (PI), suggesting possible alterations in membrane components induced by cryopreservation.The third study investigated the influence of sperm lipid composition in Nelore bulls classified as having high fertility and high responsiveness to sperm capacitation (HFHC) and low fertility and low responsiveness to sperm capacitation (LFLC). Lipidomic analysis revealed that spermatozoa from HFHC bulls exhibited significant differences in the abundance of various lipids compared to LFLC bulls, including increased levels of phosphatidylcholines (PCs), phosphatidylglycerols (PGs), phosphatidylethanolamines (PEs), lysophosphatidylcholines (LysoPCs), phosphatidylserines (PSs), as well as carnitine derivatives and fatty acids. These findings suggest that sperm lipid composition may be associated with the fertility potential of these animals. After sperm capacitation, some compounds were found in greater abundance exclusively in HFHC bulls, such as DHAP(O-18:0), leukotriene C4, Estriol-16-Glucuronide, and palmitic acid, indicating possible differences in lipid mobilization during this process.Thus, the results of this study provide insights into the identification of lipid biomarkers related to capacitation events, the cryopreservation process, and semen fertility in cattle, contributing to the improvement of breeding bull selection and the optimization of reproductive biotechnologies.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPCeleghini, Eneiva Carla CarvalhoBozzi, Alexandre da Rocha2025-03-21info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-11062025-161908/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-07-21T13:59:02Zoai:teses.usp.br:tde-11062025-161908Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-07-21T13:59:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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description A fertilidade de touros é um fator crítico para a eficiência reprodutiva e sustentabilidade da pecuária de corte. A capacitação espermática, processo fundamental para que ocorra a fecundação, pode ser prejudicada pelo processo da criopreservação do sêmen, o que pode ser a causa da variabilidade do potencial de fertilidade do sêmen criopreservado de touros. As modificações lipídicas dos espermatozoides, que ocorrem durante a capacitação e a criopreservação, podem apontar potenciais biomarcadores moleculares que possam auxiliar na seleção de reprodutores e na otimização dos protocolos de conservação seminal. Neste contexto, a lipidômica surge como uma ferramenta promissora para a identificação de padrões lipídicos que influenciam a qualidade espermática e a resistência ao processo de criopreservação. O objetivo deste estudo foi investigar a relação entre o perfil lipídico espermático e os processos de capacitação espermática e criopreservação, visando compreender as alterações estruturais e funcionais da membrana plasmática dos espermatozoides e afetam o potencial de fertilidade. Para isso, foram conduzidos três estudos experimentais: (1) análise do perfil lipidômico espermático antes e após a indução in vitro da capacitação espermática, (2) avaliação das mudanças lipídicas associadas à criopreservação do sêmen bovino e sua relação com a capacitação espermática e (3) avaliação do perfil lipídico de touros de alta fertilidade e alta responsividade à capacitação espermática e touros de baixa fertilidade e baixa responsividade à capacitação espermática. No primeiro estudo, amostras de sêmen de 12 touros Nelore (n = 36 ejaculados) foram avaliadas antes e após a capacitação espermática induzida in vitro. A capacitação espermática aumentou a peroxidação lipídica, o desarranjo dos lipídios da membrana plasmática, a distribuição espacial do colesterol na membrana, a translocação da fosfatidilserina e a reação acrossomal, sugerindo maior fluidez da membrana. A análise lipidômica revelou que a capacitação reduziu a abundância de 18 lipídios e aumentou 1,38 vezes (p = 0,010) a concentração de estearoilcarnitina (CAR 18:0), indicando maior mobilização lipídica para suporte energético. No segundo estudo, amostras de sêmen de 12 touros foram avaliadas antes e após a criopreservação quanto às características espermáticas morfofuncionais e perfil lipidômico. A análise revelou que espermatozoides criopreservados apresentaram redução da motilidade, do potencial mitocondrial e da integridade das membranas plasmática e acrossomal, bem como aumento da desordem e peroxidação lipídica, do efluxo de colesterol e da translocação de fosfatidilserina, indicando danos principais nas membranas espermáticas. No lipidoma foram encontrados 215 lipídios diferentemente abundantes, sendo que a criopreservação reduziu 155 lipídios e aumentou 60. Os principais resultados dos efeitos da criopreservação incluem aumento de fosfatidilcolina (PC); fosfatidiletanolaminas (PE) e fosfatidilinositol (PI), indicando possíveis alterações nos componentes de membrana induzidas pela criopreservação. O terceiro estudo investigou a influência da composição lipídica dos espermatozoides em touros Nelore classificados como de alta fertilidade e alta responsividade à capacitação espermática (AFAC) e baixa fertilidade e baixa responsividade à capacitação espermática (BFBC). A análise lipidômica revelou que os espermatozoides dos touros AFAC apresentavam diferenças significativas na abundância de diversos lipídios em comparação aos touros BFBC, incluindo aumento de fosfatidilcolinas (PCs), fosfatidilgliceróis (PGs), fosfatidiletanolaminas (PEs), lisofosfatidilcolinas (LysoPCs), fosfatidilserinas (PSs), além de derivados de carnitina e ácidos graxos. Esses achados sugerem que a composição lipídica dos espermatozoides pode estar associada ao potencial de fertilidade desses animais. Após a capacitação espermática, alguns compostos foram detectados em maior abundância exclusivamente nos touros AFAC, como DHAP(O-18:0), leucotrieno C4, Estriol-16- Glucuronide e ácido palmítico, indicando possíveis diferenças na mobilização lipídica durante esse processo. Dessa forma, os resultados deste estudo fornecem subsídios para a identificação de potenciais biomarcadores lipídicos relacionados aos eventos da capacitação, processo da criopreservação e da fertilidade de partidas de sêmen de bovinos, contribuindo para o aprimoramento da seleção de reprodutores e a otimização de biotécnicas reprodutivas.
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