Obtenção de proteína de origem animal in vitro
| Ano de defesa: | 2022 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-17112022-152936/ |
Resumo: | Do ponto de vista fisiológico, as proteínas exercem fundamental importância no crescimento e manutenção da integridade das estruturas corporais e de suas funções, desempenhando essencial função plástica. A proteína animal é indispensável para a formação de órgãos e tecidos bem como seu funcionamento. Dessa forma, objetivou-se a produção de proteína “in vitro” utilizando músculo bíceps femoral bovinos os quais foram utilizados para cultivo celular, descelularização e posterior recelularização, comparando entre amostras de adulto e feto. A metodologia utilizada foi através de técnicas macroscópicas, microscópicas de luz e eletrônica de varredura e molecular. Os resultados demonstraram que os protocolos foram padronizados tanto para controle quanto descelularização e recelularização. Comparando os grupos de amostras de adultos e fetos, foi possível observar que o melhor protocolo para a obtenção da carne in vitro, é utilizando o arcabouço do músculo adulto com as células de origem fetal. O arcabouço obtido foi capaz de sinalizar e apresentar uma estrutura viável para receber as células fetais, promovendo uma biocompatibilidade, propiciando o crescimento e expensão celular por todo arcabouço. A análise molecular confirmou a amplificação em qPCR detectando os genes de miogenina (MYOG), miosina de cadeia pesada (MyHC) e o gene endógeno (GAPDH), confirmando assim a presença de proteína e a viabilidade da produção in vitro. |
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Obtenção de proteína de origem animal in vitroObtaining animal protein in vitroArcabouçoCell growthCrescimento celularDecellularizationDescelularizaçãoFrameworkPetri-ProteinPetri-ProteínaRecellularizationRecelularizaçãoDo ponto de vista fisiológico, as proteínas exercem fundamental importância no crescimento e manutenção da integridade das estruturas corporais e de suas funções, desempenhando essencial função plástica. A proteína animal é indispensável para a formação de órgãos e tecidos bem como seu funcionamento. Dessa forma, objetivou-se a produção de proteína “in vitro” utilizando músculo bíceps femoral bovinos os quais foram utilizados para cultivo celular, descelularização e posterior recelularização, comparando entre amostras de adulto e feto. A metodologia utilizada foi através de técnicas macroscópicas, microscópicas de luz e eletrônica de varredura e molecular. Os resultados demonstraram que os protocolos foram padronizados tanto para controle quanto descelularização e recelularização. Comparando os grupos de amostras de adultos e fetos, foi possível observar que o melhor protocolo para a obtenção da carne in vitro, é utilizando o arcabouço do músculo adulto com as células de origem fetal. O arcabouço obtido foi capaz de sinalizar e apresentar uma estrutura viável para receber as células fetais, promovendo uma biocompatibilidade, propiciando o crescimento e expensão celular por todo arcabouço. A análise molecular confirmou a amplificação em qPCR detectando os genes de miogenina (MYOG), miosina de cadeia pesada (MyHC) e o gene endógeno (GAPDH), confirmando assim a presença de proteína e a viabilidade da produção in vitro.From a physiological point of view, proteins play a fundamental role in the growth and maintenance of the integrity of body structures and their functions, performing an essential plastic function. Animal protein is essential for the formation of organs and tissues as well as their functioning. Thus, the objective was to produce protein “in vitro” using bovine biceps femoris muscle, which were used for cell culture, decellularization and subsequent recellularization, comparing between adult and fetal samples. The methodology used was through macroscopic, light microscopic and scanning and molecular electronic techniques. The results showed that the protocols were standardized for both control and decellularization and recellularization. Comparing the groups of samples of adults and fetuses, it was possible to observe that the best protocol for obtaining meat in vitro is using the adult muscle framework with cells of fetal origin. The scaffold obtained was able to signal and present a viable structure to receive fetal cells, promoting biocompatibility, promoting cell growth and expansion throughout the scaffold. Molecular analysis confirmed the amplification in qPCR detecting the myogenin (MYOG), myosin heavy chain (MyHC) and the endogenous gene (GAPDH), thus confirming the presence of protein and the viability of production in vitro.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPRici, Rose Elí GrassiMelo, Luana Felix de2022-02-24info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-17112022-152936/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2023-01-03T13:50:37Zoai:teses.usp.br:tde-17112022-152936Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212023-01-03T13:50:37Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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