Análise transcriptômica e imunopatológica dos inflamassomas no espectro clínico e imunopatológico da leishmaniose tegumentar americana causada por Leishmania (Leishmania) amazonensis e Leishmania (Viannia) braziliensis

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Alcântara, Larissa dos Santos
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: American cutaneous leishmaniasis; Immunopathology; Imunopatologia; Inflamassomas; Inflammasomes; Leishmania (Leishmania) amazonensis; Leishmania (Viannia) braziliensis; Leishmaniose tegumentar americana; Transcriptômica; Transcriptomics
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5160/tde-24032026-150914/

A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença negligenciada e importante problema de saúde pública, sobretudo em regiões tropicais e subtropicais. É causada por protozoários do gênero Leishmania, destacando-se L. (L.) amazonensis (La) e L. (V.) braziliensis (Lb) como espécies de grande relevância médica no Brasil. A doença apresenta amplo espectro clínico-imunopatológico, variando da forma cutânea localizada (LCL) até manifestações graves: leishmaniose cutânea anérgica difusa (LCAD) e leishmaniose cutâneo mucosa (LCM). Estudos recentes têm evidenciado o papel dos inflamassomas em doenças infecciosas, uma vez que promovem a ativação de caspases inflamatórias e a secreção de IL-1 e IL-18, mediadas pela gasdermina D (GSDMD). Contudo, sua participação no contexto da LTA ainda é pouco compreendida. Assim, este trabalho teve como objetivo investigar a participação dos inflamassomas NLRP3, AIM2, NLRP12 e NLRC4 e componentes associados (caspase-1, caspase-5, GSDMD, IL-1 e IL-18) em lesões cutâneas e mucosas de pacientes com diferentes formas clínicas de LTA. Foram incluídas 20 biópsias de pele de pacientes (LCAD n=5; LCL-La n=4; LCL-Lb n=6; LCM n=5) e seis de controles saudáveis. O transcriptoma foi obtido por RNA-seq e a análise de genes do inflamassoma foi seguida da validação tecidual por imunoistoquímica, utilizando sistema de análise de imagens AxioVision 4.8 Zeiss. Os resultados demonstraram um aumento da expressão dos genes NLRP3, AIM2, NLRP12, NLRC4, CASP1, CASP5, GSDMD e IL1B e suas respectivas proteínas em pacientes com LTA quando comparados ao controle, com padrões distintos de ativação entre as formas clínicas. Na forma hiperreativa LCM a análise transcriptomica revelou maior expressão de AIM2 e IL1B quando comparado a LCAD e LCL (p< 0,05 e 0,001). No estudo imunoistoquímico, a densidade de células NLRP3+ foi superior em LCM em relação a LCAD e LCL (p < 0,05). Já a proteína IL 1 mostrou maior densidade em LCM em comparação a LCL (p < 0,001). Esse conjunto de dados enfatiza a LCM polo hiperreativo, com intensa ativação inflamatória associada principalmente a NLRP3, AIM2 e IL-1. Por outro lado, na forma hiporreativa LCAD, houve aumento de NLRP12 (LCAD vs. LCL-Lb p < 0,05) e de NLRC4 (LCAD vs. LCM p > 0,05), acompanhados por menor expressão de GSDMD em comparação a LCM e LCL-Lb (p < 0,05). A densidade de GSDMD foi menor em LCAD em relação a LCL-Lb (p < 0,05) e aos demais grupos. Os achados evidenciam a participação diferencial dos inflamassomas na resposta imune de pacientes com LTA e sugerem que a ativação exacerbada de AIM2 e NLRP3 em LCM pode contribuir tanto para o controle do parasitismo quanto para o agravamento da doença. Por outro lado, a ativação de NLRP12 e NLRC4 junto com menor expressão de GSDMD em LCAD parece associada à falha no controle do parasitismo. Assim, nossos achados ampliam a compreensão dos mecanismos imunopatogênicos da LTA e indicam que diferentes inflamassomas podem atuar como potenciais biomarcadores de gravidade e alvos terapêuticos, oferecendo novas perspectivas para um possível desenvolvimento de fármacos.