Diversidade bacteriana e identificação molecular de espécies de Culicidae (Diptera: Culicomorpha) de importância em saúde pública.

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Silva, Herculano da
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: 16S rRNA; 16S Rrna; Asaia; Bacterial Interaction Network; Culicidae; Microbiota; Rede de Interação Bacterial; Ribeira Valley; Vale do Ribeira; Wolbachia
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6141/tde-07022025-141606/

Introdução - Como os mosquitos (Diptera: Culicidae) são vetores que transmitem numerosos patógenos aos humanos e a outros vertebrados, a resistência aos inseticidas em diferentes populações desses mosquitos sublinha a necessidade premente de abordagens alternativas para controlar doenças transmitidas por vetores. Entre diversas estratégias tecnológicas, destaca-se o emprego de simbiontes bacterianos, como as cepas Wolbachia pipientis wMel e wAlbB para inibir a capacidade do Aedes aegypti de transmitir os vírus da dengue e da Zika em regiões endêmicas em todo o mundo. Pouco se sabe sobre as redes de interação bacteriana nos mosquitos. Objetivo - Investigar a composição e a diversidade da microbiota e a identificação molecular de fêmeas de diferentes espécies de Culicidae. Objetivos específicos - Obter a composição e a diversidade bacteriana em Haemagogus leucocelaenusde diferentes regiões geográficas e verificar se a localidade pode influenciar na constituição bacteriana nesses mosquitos; Detectar diferenças na composição, interação e diversidade bacteriana de distintas espécies de mosquitos capturados em uma mesma região geográfica; Descrever a composição bacteriana de mosquitos Culex quinquefasciatus e verificar a presença e diversidade genética de Wolbachia nesses espécimes e Identificar espécies de mosquitos coletados no Vale do Ribeira a partir da análise de sequências da região barcode do gene citocromo c oxidase subunidade I e da região D2 do gene 28S rDNA. Métodos - A coleta de mosquitos foi realizada em áreas rurais e periurbanas da região do Vale do Ribeira (sudeste do estado de São Paulo) e no município de Coari, estado do Amazonas, Brasil. Foram realizados: Sequenciamento da região V4 do gene 16S rRNA para explorar a diversidade bacteriana associada aos mosquitos. Processamento de sequenciamento de sequências e atribuição taxonômica. Análise de diversidade. Análise da composição da microbiota. PCoA e Heatmanp e Rede de interação bacteriana. Resultados - Houve diferenças significativas na diversidade α das bactérias associadas aos mosquitos amostrados. Índice de Shannon calculado para Hg. leucocelaenus; Ke. cruzii (p = 0,002); Hg. leucocelaenus; Sa. conditus (p = 0,002) e Hg. leucocelaenus; Wy. confusa (p = 0,026). Em relação à diversidade β, foram encontradas diferenças significativas na composição bacteriana verificadas com a análise PERMANOVA entre Ae. scapularis e Hg. leucocelaenus, Ke. cruzii, Sa. conditus e Wy. confusa; (2) Ae. serratus e Hg. capricornii, Hg. leucocelaenus, Ke. cruzii, Sa. conditus e Wy. confusa; (3) Hg. capricornii e Ke. cruzii, Sa. conditus e Wy. confusa; (4) Hg. leucocelaenus e Ke. cruzii, Sa. conditus, Wy. confusa e Ps. ferox; (5) Ke. cruzii e Sa. conditus e Ps. ferox; (6) Ps. ferox e Sa. conditus e Wy. confusa; e (7) Sa.conditus e Wy. confusa. No que se refere à composição da microbiota, foi possível verificar que Wolbachia pipientisfoi mais abundante em Hg. leucocelaenus, enquanto os gêneros Afipia e Asaia foram mais abundantes em Ke. cruzii e Ae. serratus. As bactérias do filo proteobacteria apresentaram o maior número de sequências em todas as espécies. Também é possível verificar que os gêneros Serratia e Leptolyngbya e a ordem Rhizobiales foram mais abundantes nos mosquitos coletados em Cananéia. As bactérias da família Rickettsiaceae apresentaram o maior número de sequências na maioria das fêmeas de mosquitos dos três locais de coletas. Houve correlações bacterianas positivas encontradas em todas as espécies analisadas, enquanto correlações negativas foram observadas em Hg. leucocelaenus, Ae. scapularis, Ae. serratus, Ps. ferox e Hg. capricornii. Conclusão - A rede de interação bacteriana foi verificada para cada espécie de mosquito, mostrando que Shingobium, Pseudonocardiaceae não classificada, Afipia, Delftia e Shingomonas tiveram mais interações bacterianas nos espécimes de Aedes. As interações bacterianas com Asaia e Wolbachia foram negativas nos mosquitos Aedes. A presença de Wolbachia foi registrada nesta espécie e indica que a competência vetora das populações da espécie pode variar ao longo da sua área de distribuição geográfica. É de suma importância a continuidade de estudo que examine a forma como determinadas redes de bactérias interagem e afetam a estabilidade das diferentes comunidades e os seus efeitos no padrão de alimentação sanguínea dos mosquitos.