Papel das NETs como moduladoras da osteoclastogênese na artrite reumatoide

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Schneider, Ayda Henriques
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Artrite reumatoide; Bone loss; NETs; Osteoblastos; Osteoblasts; Osteoclastos; Osteoclasts; Perda óssea; Rheumatoid arthritis
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17133/tde-26052025-093947/

A artrite reumatoide (AR) é uma doença autoimune que atinge de 0,5 a 1% da população adulta mundial. Apesar de existirem tratamentos disponíveis, um percentual considerável dos pacientes não responde adequadamente, o que permite a evolução da doença, culminando com sua progressão e consequente perda óssea. Em doenças como na AR, ocorre uma perda do equilíbrio entre a síntese e degradação óssea, com um aumento da atividade dos osteoclastos, células que fazem a reabsorção da matriz óssea. Os neutrófilos possuem papel central na AR, entretanto, seu envolvimento na osteoclastogênese não se encontra totalmente elucidado. Visto que as Neutrophil Extracellular Traps (NETs) vêm se mostrando cada vez mais importantes na fisiopatologia da AR, o objetivo do presente trabalho foi investigar se as NETs causam perda óssea na AR através da potencialização da osteoclastogênese. Para isso, os níveis de NETs, RANKL e OPG no líquido sinovial de pacientes foram quantificados. In vivo, duas ferramentas foram utilizadas para o controle das NETs: através do tratamento com DNase, e da produção de animais Pad4flox/flox LysMCRE. Os níveis de NETs, neutrófilos e monócitos foram avaliados no lavado articular de camundongos submetidos à artrite induzida por antígeno (AIA). A perda óssea foi avaliada por micro-CT e a presença de osteoclastos na região periarticular foi avaliada por histologia. O tamanho e a função dos osteoclastos na presença de NETs foram investigados in vitro, e a expressão de marcadores de osteoclastogênese foi avaliada por qPCR e Western Blotting. Para entender a participação dos receptores TLR4 e TLR9 na osteoclastogênese, células derivadas de camundongos Tlr4-/- e Tlr9-/- foram cultivadas com NETs. Osteoblastos foram incubados com NETs e foram avaliadas a expressão gênica e liberação de RANKL e OPG. Pacientes com AR possuem níveis elevados de NETs comparados aos controles, e esses níveis possuem correlação positiva com os de RANKL/OPG. Além disso, pacientes com erosão óssea possuem maior concentração de NETs no líquido sinovial comparados aos pacientes sem lesão. A degradação ou inibição das NETs em camundongos AIA não é acompanhada de redução na migração de neutrófilos e monócitos para as articulações, entretanto, causam proteção da perda óssea. In vitro, as NETs estimulam o aumento e a função dos osteoclastos, evidenciadas pelo aumento na expressão gênica e proteica de marcadores e osteoclastogênese. Na ausência de TLR4 e TLR9, as NETs não foram capazes de causar efeito de aumento dos osteoclastos. Nos osteoblastos, as NETs levaram a um aumento da expressão gênica e liberação de RANKL, e redução da expressão gênica e liberação de OPG, o antagonista fisiológico de RANKL, o que pode favorecer a osteoclastogênese. Como conclusão temos que a inibição das NETs protege contra o dano ósseo em modelo animal, e que o estímulo direto nos osteoclastos causa um aumento da osteoclastogênese, bem como indiretamente, através do estímulo sob os osteoblastos. Sendo assim, o controle das NETs poderia ser uma alternativa para a redução da perda óssea em pacientes.