Processo descontínuo alimentado no cultivo de Escherichia coli Bl21 (de3) plyss para produção da proteína recombinante troponina C.
| Ano de defesa: | 1995 |
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| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-05012026-090431/ |
Resumo: | Cultivou-se E. Coli BL21 (DE3) pLysS com plasmídeo pET codificado para produção da proteína recombinante troponinaC (TnC) em processos descontínuo e descontínuo alimentado conduzidos em reator de 4L de volume útil. Para a condição de concentração de glicose total igual a 40g/L o processo descontínuo alimentado mostrou-se ligeiramente superior ao descontínuo levando a valores superiores de concentraço celular, X, e fator de conversão substrato a células, y\'IND.X/S\' em 5 e 9% respectivamente. Os processos descontínuo e descontínuo alimentado também foram empregados na indução desta bacteria por IPTG para a producção de TnC. Os valores finais de concentração de TnC, p, e de produção específica, p/X, foram de 811mg/L e 105mg/mg para o processo descontínuo. Para o processo descontínuo alimentado com valor de velocidade específica de crescimento, \'MICRO\'\'IND.X\', controlado em 0,40h\'POT. MENOS 1\' os valores finais de p e p/X foram de 1408mg/l e 158mg/mg, e para o descontínuo alimentado com \'MICRO\'\'IND.X\' controlado em 0,35h\'POT. MENOS 1\' foram de 966mg/l e 78mg/mg. Supõe-se que os diferentes valores de velocidade específica de crescimento (0,40 e 0,35h\'POT. MENOS 1\') antes da indução tenham sido responsáveis pelas diferenças na produção da proteína. A análise da estabilidade do plasmídeo pET mostrou que após 17h de cultivo em reator, 97% das células ainda continham o vetor. |
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Processo descontínuo alimentado no cultivo de Escherichia coli Bl21 (de3) plyss para produção da proteína recombinante troponina C.Untitled in englishFed-batch processMicrorganismo recombinanteProcesso descontínuo alimentadoProdução de proteína recombinanteRecombinant microorganismRecombinant protein productionCultivou-se E. Coli BL21 (DE3) pLysS com plasmídeo pET codificado para produção da proteína recombinante troponinaC (TnC) em processos descontínuo e descontínuo alimentado conduzidos em reator de 4L de volume útil. Para a condição de concentração de glicose total igual a 40g/L o processo descontínuo alimentado mostrou-se ligeiramente superior ao descontínuo levando a valores superiores de concentraço celular, X, e fator de conversão substrato a células, y\'IND.X/S\' em 5 e 9% respectivamente. Os processos descontínuo e descontínuo alimentado também foram empregados na indução desta bacteria por IPTG para a producção de TnC. Os valores finais de concentração de TnC, p, e de produção específica, p/X, foram de 811mg/L e 105mg/mg para o processo descontínuo. Para o processo descontínuo alimentado com valor de velocidade específica de crescimento, \'MICRO\'\'IND.X\', controlado em 0,40h\'POT. MENOS 1\' os valores finais de p e p/X foram de 1408mg/l e 158mg/mg, e para o descontínuo alimentado com \'MICRO\'\'IND.X\' controlado em 0,35h\'POT. MENOS 1\' foram de 966mg/l e 78mg/mg. Supõe-se que os diferentes valores de velocidade específica de crescimento (0,40 e 0,35h\'POT. MENOS 1\') antes da indução tenham sido responsáveis pelas diferenças na produção da proteína. A análise da estabilidade do plasmídeo pET mostrou que após 17h de cultivo em reator, 97% das células ainda continham o vetor.In this work it was studied the growth of E. coli BL21 (DE3) pLysS with the pET vector for production of recombinant protein troponin C (TnC). The cultures were carried out in batch and fed batch mode in 4L reactor. For 40g/L of total glucose concentration the fed batch process were slightly more efficient than the batch mode, resulting higher level of cell concentration, X, , (5%) and yield coefficient for biomass, Y, (9%). The batch and fed batch mode were used for the bacteria induction for IPTG to TnC production. The final TnC concentration, p, and specific production, p/X, were 81 1 mg/L and 105mg/mg for batch mode. For fed batch mode with the specific growth rate value controlled in 0,40h-1 the final p and p/X values were 1408mg/L and 158mg/mg, and for fed batch mode with the specific growth rate value controlled in 0,35h-1 were 966mg/L and 78mg/mg. The results suggest that the specific growth rates values (0,40 and 0,35h-1) previous to induction were responsible for different levels of protein production. The analysis of pET plasmid stability showed that after 17 hours, 97% of cells in reactor had the vector. Growth with E coli BL21 (DE3) pLysS with and without pET vector were carried out and the results showed that the pET has no influence in the cell growth. The following correlations were proposed: optic density at 6C)C)nman d cell concentration (DOG,oa nd X), and ammonia mass imputed to pH control and cell concentration (NH,,OH and X). The correlation coefficient value were 0,9892 and 0,9815 respectively.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPKilikian, Beatriz VahanLiria, Cleber Wanderlei1995-06-02info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-05012026-090431/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2026-01-05T11:10:02Zoai:teses.usp.br:tde-05012026-090431Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212026-01-05T11:10:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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Cultivou-se E. Coli BL21 (DE3) pLysS com plasmídeo pET codificado para produção da proteína recombinante troponinaC (TnC) em processos descontínuo e descontínuo alimentado conduzidos em reator de 4L de volume útil. Para a condição de concentração de glicose total igual a 40g/L o processo descontínuo alimentado mostrou-se ligeiramente superior ao descontínuo levando a valores superiores de concentraço celular, X, e fator de conversão substrato a células, y\'IND.X/S\' em 5 e 9% respectivamente. Os processos descontínuo e descontínuo alimentado também foram empregados na indução desta bacteria por IPTG para a producção de TnC. Os valores finais de concentração de TnC, p, e de produção específica, p/X, foram de 811mg/L e 105mg/mg para o processo descontínuo. Para o processo descontínuo alimentado com valor de velocidade específica de crescimento, \'MICRO\'\'IND.X\', controlado em 0,40h\'POT. MENOS 1\' os valores finais de p e p/X foram de 1408mg/l e 158mg/mg, e para o descontínuo alimentado com \'MICRO\'\'IND.X\' controlado em 0,35h\'POT. MENOS 1\' foram de 966mg/l e 78mg/mg. Supõe-se que os diferentes valores de velocidade específica de crescimento (0,40 e 0,35h\'POT. MENOS 1\') antes da indução tenham sido responsáveis pelas diferenças na produção da proteína. A análise da estabilidade do plasmídeo pET mostrou que após 17h de cultivo em reator, 97% das células ainda continham o vetor. |
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