Determinação da farmacocinética em ratos e estudos in vitro de permeabilidade intestinal de uma formulação inovadora contendo anfotericina B

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Tadini, Maraine Catarina
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Amphotericin B; Anfotericina B; Caco-2 cells; Células Caco-2; Farmacocinética; Formulação nanoestruturada; Nano-structured formulation; Pharmacokinetics
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-13052025-151301/

A anfotericina B (Anf B) é amplamente utilizada no tratamento de infecções fúngicas e leishmaniose; entretanto, sua administração é restrita ao ambiente hospitalar devido a efeitos colaterais graves, como a nefrotoxicidade. Este trabalho investiga uma formulação nanoestruturada inovadora de Anf B para administração oral, denominada AnB-NP-GR. Os objetivos principais consistiram na avaliação da permeabilidade intestinal in vitro da Anf B na formulação desenvolvida, utilizando o modelo de células Caco-2; e determinação dos parâmetros farmacocinéticos da Anf B na formulação AnB-NP-GR, administrada em dose única de 4,0 e 8,0 mg kg-1 em ratos. A quantificação da Anf B foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas. A análise foi realizada em uma coluna C18 (150 x 4,6 mm; 2,7 µm) e fase móvel composta por metanol e solução aquosa de ácido fórmico a 0,1% (70:30, v/v), a uma vazão de 0,3 mL min-¹ e temperatura de 40 °C. Anteriormente aos estudos de permeabilidade e farmacocinético, os métodos bioanalíticos foram validados conforme o guia de validação de métodos bioanalíticos da Anvisa. No estudo de permeabilidade da absorção intestinal in vitro, o coeficiente de permeabilidade aparente (Papp) da Anf B livre no transporte apical-basolateral (A-B) foi de 0,456 x 10-6 cm s-¹, cerca de cinco vezes maior que no transporte basolateral-apical (B-A), com taxa de efluxo de 0,18, indicando baixa absorção e transporte passivo. Já na formulação nanoestruturada, o Papp foi de 0,631 x 10-6 cm s-¹, enquanto na formulação com quercetina foi de 0,693 x 10-6 cm s-¹, demonstrando que o nanocarreador aumentou a permeabilidade da Anf B e que a quercetina atuou como promotor de absorção. Os parâmetros farmacocinéticos observados para as doses de 4,0 e 8,0 mg kg-1 de Anf B na formulação AnB-NP-GR indicaram algumas variações importantes. O tempo para atingir a concentração plasmática máxima foi de 4 a 12 horas para a dose de 4,0 mg kg-1 e de 4 horas para a dose de 8,0 mg kg-1. As concentrações plasmáticas máximas foram de 52,9 ng mL-1 e 58,2 ng mL-1 para as doses de 4,0 e 8,0 mg kg-1, respectivamente. A meia-vida apresentou uma diferença marcante entre as doses: foi de 20,8 horas para 4,0 mg kg-1 e de 68,2 horas para 8,0 mg kg-1, sugerindo uma possível alteração na eliminação entre as doses. A área sob a curva (ASC0-72) para as mesmas doses foi de 1452 e 2024 ng mL-¹ h, respectivamente, enquanto a ASC0-∞ foi de 1613 ng mL-¹ h para a dose de 4,0 mg kg-1 e 4653 ng mL-¹ h para a dose de 8,0 mg kg-1, reforçando uma diferença na exposição sistêmica do fármaco entre as duas doses testadas. Por fim, os parâmetros farmacocinéticos indicaram que a formulação desenvolvida é absorvida por via oral. Esses resultados trazem contribuições importantes para a compreensão da absorção da Anf B na formulação nanoestruturada e fornecem subsídios valiosos para o planejamento de estudos futuros sobre segurança e eficácia.