Cultura de pele humana organotípica como método alternativo para a avaliação da eficácia de protetores solares
| Ano de defesa: | 2024 |
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| Tipo de documento: | Tese |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60137/tde-04122024-145135/ |
Resumo: | A exposição à radiação ultravioleta (RUV) é o principal fator de risco para o desenvolvimento de câncer de pele. A utilização de fotoprotetores torna-se a primeira linha de escolha, bem como a comprovação da eficácia do fotoprotetor em proteger a pele dos malefícios crônicos da RUV. Em abril de 2016, o anexo VI da Regulamentação de Produtos Cosméticos da União Europeia foi alterado para estabelecer que as nanopartículas de óxido de zinco (ZnOn) são seguras para serem utilizadas como filtros em produtos fotoprotetores. O objetivo deste projeto foi desenvolver e avaliar a estabilidade de fotoprotetores contendo ZnOn, revestidas e não revestidas, que são comercializadas no mercado cosmético, em uma concentração permitida de 20%; padronizar um modelo de pele humana organotípica (hOSEC) capaz de manter a sua estrutura histológica e seus parâmetros oxidativos durante 15 dias; avaliar a eficácia da formulação fotoprotetora desenvolvida em proteger a pele do estresse oxidativo induzido pela RUVB. A formulação contendo as ZnOn revestidas apresentou melhores resultados de estabilidade e de perfil da capacidade de absorção da RUVA/B. O sistema conservante utilizando benzil álcool benzílico/xilitol/ácido caprílico e fenoxietanol eliminou a carga microbiana, que incialmente foi adicionada às formulações, em 14 dias e não houve crescimento microbiano até 28°dia. O processo de padronização mostrou que hOSEC de área (~2,5 cm²) cultivado na placa de petri manteve a viabilidade do fragmento, apresentou uma redução nos níveis de TBARS (~ 67%, 0,14 nM MDA/mg de pele) e manteve os níveis de GPx e SOD, durante 30 dias de cultivo. A dose de 200 mJ/cm2 de UVB induziu o estresse oxidativo no modelo de pele, sem causar colapso no sistema antioxidante; o meio de cultura enriquecido de fatores de crescimento melhorou a estrutura histológica e o processo de colagenização. Os resultados do estudo de eficácia mostraram que o hOSEC irradiado diariamente, aumenta a peroxidação lipídica concomitante com a depleção do GSH, GPx e SOD, enquanto a aplicação da formulação adicionada de ZnOn (F1) restaurou os seus níveis comparados aos grupos apenas cultivado. Os dados histológicos sugerem que a aplicação diária da F1 prejudica estruturalmente a pele e aumenta a degradação do colágeno tipo I (~65%) enquanto o grupo irradiado reduz em 35% o colágeno tipo I. A aplicação da F1, em dias alternados, mostrou-se a mais indicada, favorecendo a manutenção da homeostase bioquímica da pele. |
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Cultura de pele humana organotípica como método alternativo para a avaliação da eficácia de protetores solaresOrganotypic human skin culture as an alternative method for evaluating the efficacy of sunscreensColágenoCollagenExplante de pele humanaFotoproteçãohOSEChOSECHuman skin explantNanopartículas de óxido de zincoPhotoprotectionZinc oxide nanoparticlesA exposição à radiação ultravioleta (RUV) é o principal fator de risco para o desenvolvimento de câncer de pele. A utilização de fotoprotetores torna-se a primeira linha de escolha, bem como a comprovação da eficácia do fotoprotetor em proteger a pele dos malefícios crônicos da RUV. Em abril de 2016, o anexo VI da Regulamentação de Produtos Cosméticos da União Europeia foi alterado para estabelecer que as nanopartículas de óxido de zinco (ZnOn) são seguras para serem utilizadas como filtros em produtos fotoprotetores. O objetivo deste projeto foi desenvolver e avaliar a estabilidade de fotoprotetores contendo ZnOn, revestidas e não revestidas, que são comercializadas no mercado cosmético, em uma concentração permitida de 20%; padronizar um modelo de pele humana organotípica (hOSEC) capaz de manter a sua estrutura histológica e seus parâmetros oxidativos durante 15 dias; avaliar a eficácia da formulação fotoprotetora desenvolvida em proteger a pele do estresse oxidativo induzido pela RUVB. A formulação contendo as ZnOn revestidas apresentou melhores resultados de estabilidade e de perfil da capacidade de absorção da RUVA/B. O sistema conservante utilizando benzil álcool benzílico/xilitol/ácido caprílico e fenoxietanol eliminou a carga microbiana, que incialmente foi adicionada às formulações, em 14 dias e não houve crescimento microbiano até 28°dia. 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A aplicação da F1, em dias alternados, mostrou-se a mais indicada, favorecendo a manutenção da homeostase bioquímica da pele.Exposure to ultraviolet radiation (UVR) is the main risk factor for the development of skin cancer. The use of photoprotectors becomes the first line of choice, as well as proving the effectiveness of the photoprotector in protecting the skin from the ecological harm of UVR. In April 2016, Annex VI of the European Union Cosmetic Products Regulation was amended to establish that zinc oxide nanoparticles (ZnOn) are safe to be used as filters in photoprotective products. The objective of this project was to develop and evaluate the stability of photoprotectors containing ZnOn, coated and uncoated, which are sold in the cosmetic market, at a permitted concentration of 20%; standardize an organotypic human skin model (hOSEC) capable of maintaining its histological structure and oxidative parameters for 15 days; evaluate the effectiveness of the photoprotective formulation developed to protect the skin from oxidative stress induced by UVR. The formulation containing coated ZnOn showed stability results and a better profile of RUVA/B absorption capacity. The conservative system using benzyl alcohol/xylitol/caprylic acid and phenoxyethanol eliminated the microbial load, which was initially added to the formulations, in 14 days and there was no microbial growth until the 28th day. The standardization process showed that area hOSEC (~2.5 cm²) cultured in the petri dish maintained the fragment prediction, showed a reduction in TBARS levels (~67%, 0.14 nM MDA/mg of skin) and maintained GPx and SOD levels during 30 days of cultivation. A dose of 200 mJ/cm2 of UVB induced oxidative stress in the skin model, without causing a collapse in the antioxidant system; the culture medium enriched with growth factors improved the histological structure and the collagenization process. The results of the efficacy study demonstrated that hOSEC irradiated daily increased lipid peroxidation concomitant with the depletion of GSH, GPx and SOD, while the application of the formulation added with ZnOn (F1) restored their levels compared to groups only cultured. Histological data suggest that daily application of F1 structurally harms the skin and increases the release of type I collagen (~65%), while the irradiated group reduces type I collagen by 35%. Application of F1, every other day, shown is the most recommended, favoring the maintenance of the skin\'s biochemical homeostasis.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPAlves, Geórgia de Assis DiasFonseca, Maria Jose VieiraCuelho, Camila Helena Ferreira2024-06-20info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60137/tde-04122024-145135/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPReter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-03-07T12:45:02Zoai:teses.usp.br:tde-04122024-145135Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-03-07T12:45:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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