Sistemas de liberação a base de fibroína da seda e agentes pró-fotossensibilizantes visando a terapia fotodinâmica tópica de feridas

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Brait, Iris Sperchi Camilo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Cicatrização; Curativo; Estímulo luminoso; Healing; Liberação sustentada; Luminous stimulus; Nitric oxide; Óxido nítrico; Sustained release; Wound dressing
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60137/tde-24032022-144702/

O tratamento de feridas crônicas requer o uso de curativos que sejam capazes de proteger mecanicamente a ferida, de contribuir para o processo de cicatrização e de evitar ou dirimir qualquer contaminação microbiana. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma forma de tratamento que envolve a aplicação de agentes fotossensibilizantes e luz e tem sido investigada para o tratamento de feridas devido a sua capacidade em modular a resposta imune e a seu efeito antimicrobiano. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um curativo na forma de filme capaz de modular a liberação de substâncias sensíveis a TFD visando a cicatrização de feridas. Para tanto, foram desenvolvidos filmes a base de fibroína da seda funcionalizados com um doador de óxido nítrico (NO), a S-nitrosoglutationa (GSNO), contendo ácido 5-aminolevulinico (5-ALA) incorporado. O 5-ALA e um pro-fotossensibilizador que induz a produção de protoporfirina IX in vivo e vem sendo explorado na TFD tópica de feridas. A GSNO e capaz de liberar o NO na presença de estímulo luminoso, podendo o NO auxiliar na proliferação celular quando presente em baixas concentrações. E por fim, a fibroina da seda e um biopolimero natural usada como plataforma para o crescimento de células. Uma dispersão de fibroína foi preparada a partir de casulos de Bombyx mori e funcionalizada com GSNO (Fibroína-GSNO). O conjugado Fibroína-GSNO foi caracterizado por técnicas espectroscópicas e com ele foram preparados filmes contendo 5-ALA. Os filmes foram caracterizados por técnicas espectroscópicas, análise térmica, propriedades mecânicas e de intumecimento, cinéticas de liberação do 5-ALA e do NO na presença de irradiação em comprimentos de onda específicos, cito e fototoxicidade e expressão do mediador de cicatrização dérmica TGF-β. Modificações na intensidade e no deslocamento de bandas do espectro no infravermelho da Fibroína-GSNO em relação ao espectro da fibroína, além do aparecimento de uma nova banda em 2.09 ppm no espectro de ressonância magnética nuclear da Fibroína-GSNO, características de uma ligação éster, indicaram a funcionalização da fibroína com a GSNO. Os filmes desenvolvidos a base de Fibroína-GSNO apresentaram-se homogêneos e transparentes, com superfície densa e ausência de poros, adequada resistência mecânica, baixa capacidade de intumescimento e permeáveis ao vapor de água, com transmissão de vapor em torno de 2400 g/m2. A irradiação dos filmes a 377 nm e 447 nm resultou em liberação controlada do NO, sendo que a irradiação a 377 nm liberou aproximadamente 20 vezes mais NO do que a irradiação no visível. A liberação de 5-ALA dos filmes foi independente do estímulo luminoso e sustentada por 72 h, com velocidade de liberação de aproximadamente 25 µg/cm2/h1/2. Estudos in vitro em cultura de fibroblastos indicaram que os filmes não foram citotóxicos e nem fototóxicos quando irradiados a 470 nm e dose de luz de 3 J/cm2. Os filmes contendo 5-ALA foram capazes de aumentar em aproximadamente três vezes a expressão de TGF-β em relação ao controle sem 5-ALA, tanto na presença como na ausência de luz. Desta forma, os filmes de Fibroína-GSNO contendo 5-ALA desenvolvidos são promissores curativos para feridas.