Estudo do desenvolvimento precoce da fibrose pulmonar em modelo experimental de esclerose sistêmica induzido com colágeno V

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Contini, Vitória Elias
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Colágeno; Colágeno V; Collagen; Collagen V; Esclerose sistêmica; Experimental model of SSc; Fibrillogenesis; Fibrilogênese; Fibrose pulmonar; Lung; Modelo experimental de ES; Pulmão; Pulmonary fibrosis; Systemic sclerosis
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5140/tde-09042025-140752/

As manifestações pulmonares desempenham um papel significativo nos índices de morbidade e mortalidade de pacientes com Esclerose Sistêmica (ES). A doença pulmonar intersticial (DPI) é a manifestação pulmonar mais comumente associada à doença, com maior risco de se desenvolver no início do curso da ES. Neste sentido, modelos experimentais que mimetizem estágios iniciais da patogênese da doença pulmonar, associada à ES, são essenciais para avaliar novas estratégias terapêuticas que possam reduzir a progressão da fibrose pulmonar. Estabelecemosu um modelo experimental em camundongos C57BL/6 imunizados com colágeno tipo V (Col V), que desenvolveram um padrão histológico de pneumonia intersticial inespecífica nos pulmões, associado ao espessamento das pequenas e médias artérias intrapulmonares. No presente estudo avaliamos a evolução da fibrose pulmonar nas fases iniciais da ES, induzida em camundongos C57BL/6 após a imunização com Col V. Camundongos fêmeas C57BL/6 foram imunizados com duas doses subcutâneas e dois reforços intramusculares de Col V, emulsificado em adjuvante de Freund, e divididas em grupos: IMU-COLV 15, IMU-COLV 30 e IMU-COLV 45dias. Os marcadores de células CD3+, CD4+, CD8+ e CD20+, Fator VIII, VEGF, caspase-3 e -AML e o colágeno dos tipos I, III e V foram imunomarcados e avaliados por análise de imagem. O conteúdo total de colágeno foi dosado bioquimicamente pela 4-hidroxiprolina e os genes Col11, Col31, Col51, Col52, -AML, TGF-1 quantificados por RT-qPCR. A análise temporal do tecido pulmonar, mostrou um importante aumento de linfócitos CD3+, CD4 +, CD8+ e CD20+, assim como, aumento da expressão de Fator VIII, VEGF e -AML no grupo IMU-COLV15 dias. Salientamos, no grupo IMU-COLV15 dias, o aumento da expressão de colágeno V, corroborando com o aumento da síntese dos seus genes Col51, Col52, o que não ocorreu com os genes Col11, Col31. Adicionalmente, nos animais do grupo IMU-COLV 30 dias, observamos diminuição do infiltrado inflamatório, que foi substituído pelo aumento da expressão de colágeno do tipo III. Em contraste, no grupo IMU-COLV45 dias, estabelece-se um padrão morfológico, similar a pneumonia intersticial inespecífica, com espessamento das pequenas e médias artérias intrapulmonares. A este padrão agregamos o aumento da expressão de Caspase-3, -AML e intensa expressão do colágeno I e III, assim como da expressão de seus genes Col11 e Col31. Ainda, os genes para vimentina (Vin), -AML e TGF-1 apresentaram-se mais expressos neste grupo de animais. Estes dados corroboram com o aumento de colágeno total pela dosagem da 4-hidroxiprolina no grupo IMU-COLV45 dias. Nossos resultados indicam que o comprometimento pulmonar neste modelo tem início com uma fase inflamatória, aos 15 dias após a primeira imunização, e que este processo evolui após 30 e 45 dias. Ainda, que o remodelamento e a fibrose do tecido pulmonar são estabelecidos aos 30 e 45 dias e esse processo está associado à ativação do TGF1 e ao depósito de colágeno total, bem como à expressão do colágeno dos tipos I e V no tecido pulmonar. Notavelmente, após 15 dias da primeira imunização, observamos um aumento da síntese de colágeno do tipo V e dos genes Col51 e Col52