Estudo do desenvolvimento pós-natal das correntes de potássio mediadas pelos canais Kv3 nos neurônios fusiformes do núcleo coclear dorsal de camundongos

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Oliveira, Mario Henrique Lopes Duarte de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Canais de potássio voltagem dependentes; Dorsal cochlear nucleus; Electrophysiology; Eletrofisiologia; Neurofisiologia; Neurophysiology; Núcleo coclear dorsal; Voltage gated potassium channels; Whole-cell patch-clamp
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17134/tde-09012026-172041/

O núcleo coclear dorsal (DCN) é a estrutura que integra sinais excitatórios oriundos de estímulos auditivos, somatossensoriais e vestibulares, sendo capaz de localizar a origem sonora, principalmente no plano vertical. O DCN possuí uma estrutura, semelhante ao cerebelo, composta por 3 camadas, a camada molecular, a fusiforme e a profunda. É na camada fusiforme que se localizam os neurônios fusiformes (NF) os quais apresentam as únicas projeções de saída do DCN, seguindo para o colículo inferior. Os neurônios fusiformes apresentam um aumento monotônico de disparos de potenciais de ação (PA) em resposta a um aumento progressivo de injeção de corrente. Além disso, esses neurônios passam por modificações na forma de seus potenciais de ação a partir do início da audição. Foi levantada então a hipótese de que canais de potássio da família Kv3, principalmente Kv3.1, sejam responsáveis por alterações nessas características, visto que são canais de cinética rápida relacionados a altas taxas de disparos de PA e que no cálice de Held tem sua expressão aumentada após o início da audição levando ao aumento da velocidade dos PA. Para testar essa hipótese, camundongos Swiss em período pré-audição (P7-P13) e em período pós audição (P18-P25) foram utilizados. Foi realizada a técnica de Whole-cell Patch-clamp registrando protocolos de current-clamp (V-I) e voltage-clamp (I-V) para análise dos PA e correntes de potássio, respectivamente, e alterações causadas pelo bloqueio de canais Kv3, pela aplicação de tetraetilamonio (TEA) 5mM, nesses parâmetros. Além disso experimentos de imunofluorescência utilizando anticorpos anti-Kv3.1b e anti Kv3.1b fosforilado, também foram realizados. A análise das correntes de potássio inibidas por TEA não demonstraram variações significativas entre os dois grupos. Da mesma forma, o bloqueio dos Kv3 impactou de maneira similar as características dos PA de animais dos dois grupos. No entanto, o bloqueio teve um efeito mais evidente sobre a frequência de disparo de PA, resultando no surgimento de disparos em salvas, com aparente maior proporção em animais pós-audição, os experimentos de imunofluorescência demonstraram um aumento na expressão de Kv3.1b nos animais pós-audição. Considerando esse resultado, juntamente com os efeitos observados sobre a frequência de disparo e as propriedades biofísicas dos canais Kv3.1b, esse canal se mostra um forte candidato a desempenhar papel fundamental na adaptação dos NF para suportar disparos em alta frequência a partir do início da audição.