Desvendando o metabolismo e sintrofismo microbiano em reatores anaeróbios de leito fluidificado aplicados a biodegradação de surfactantes: da engenharia às meta-ômicas
| Ano de defesa: | 2024 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/18/18138/tde-28112024-151653/ |
Resumo: | Este estudo investigou o metabolismo e o sintrofismo microbiano em Reatores Anaeróbios de Leito Fluidificado (RALF) aplicados à biodegradação de surfactantes sintéticos. As análises de biologia molecular utilizadas foram 16S, metagenômica e metatranscriptômica. O RALF foi utilizado em todos os capítulos desta investigação e alimentado com esgoto sintético (CAPÍTULO 1, 2, 3 e 4), esgoto sanitário (CAPÍTULO 5) e co-digestão de esgoto sanitário com efluente de lavanderia (CAPÍTULO 6). Verificou-se que configuração do RALF com headspace aberto possibilitou o contato do efluente com o oxigênio atmosférico, estabelecendo uma comunidade microbiana facultativa no leito de areia, capaz de biodegradar simultaneamente as cadeias alquílicas e etoxiladas do Nonilfenol Etoxilado (NFEO), bem como seus subprodutos (4-Nonilfenol e 4-Octilfenol). Contudo, a introdução de oxigênio levada pela recirculação gerou a estratificação da microbiota, segmentando os organismos de acordo com sua afinidade pelo oxigênio. No leito com aspecto granular formado sobre o leito de areia, a análise metatranscriptômica revelou o predomínio de metanogênese autotrófica, com a produção de metano principalmente via fotossíntese escura (Ciclo de Calvin-Benson-Bassham) e rota hidrogenotrófica. Também se verificou que a presença de surfactantes modulou a expressão gênica dos Transportadores ABC do envelope celular, favorecendo o consumo de substratos específicos (Oligossacarídeos, Monossacarídeos, Amino Ácidos e Lipídios), de acordo com cada surfactante usado. Neste estudo também foi revelada a ocorrência de Transferência Direta de Elétrons entre Espécies (DIET) mediada por bactérias magnetotáticas. Bactérias do gênero Desulfovibrio magneticus produziram nanopartículas intracelulares de magnetita, mediando a transferência de elétrons de Geobacter sp. para arqueias metanogênicas. Foi desenvolvido um novo dispositivo suporte (HD1), que se mostrou apropriado para a imobilização celular e o estabelecimento de consórcios metanogênicos. Com a utilização de HD1 para co-digestão de esgoto sanitário com efluente de lavanderia, verificou-se adequada remoção de NFEO (76,7 - 74,78%, para afluente de 18,88 ± 1,95 mg L-1), aliada ao aproveitamento energético do biogás, com a proporção de metano de até 93 - 94%. Provavelmente devido a contribuição de DIET mediado por bactérias magnetotáticas, revelado pela análise metagenômica. |
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Desvendando o metabolismo e sintrofismo microbiano em reatores anaeróbios de leito fluidificado aplicados a biodegradação de surfactantes: da engenharia às meta-ômicasUnveiling the metabolism and microbial syntrophism in Anaerobic Fluidized Bed Reactors applied to surfactants biodegradation: from engineering to meta-omicsABC transportersgeobactergeobactermagnetitamagnetitemagnetotacticmagnetotáticasmetanogênesemethanogenesistransportadores ABCEste estudo investigou o metabolismo e o sintrofismo microbiano em Reatores Anaeróbios de Leito Fluidificado (RALF) aplicados à biodegradação de surfactantes sintéticos. As análises de biologia molecular utilizadas foram 16S, metagenômica e metatranscriptômica. O RALF foi utilizado em todos os capítulos desta investigação e alimentado com esgoto sintético (CAPÍTULO 1, 2, 3 e 4), esgoto sanitário (CAPÍTULO 5) e co-digestão de esgoto sanitário com efluente de lavanderia (CAPÍTULO 6). Verificou-se que configuração do RALF com headspace aberto possibilitou o contato do efluente com o oxigênio atmosférico, estabelecendo uma comunidade microbiana facultativa no leito de areia, capaz de biodegradar simultaneamente as cadeias alquílicas e etoxiladas do Nonilfenol Etoxilado (NFEO), bem como seus subprodutos (4-Nonilfenol e 4-Octilfenol). Contudo, a introdução de oxigênio levada pela recirculação gerou a estratificação da microbiota, segmentando os organismos de acordo com sua afinidade pelo oxigênio. No leito com aspecto granular formado sobre o leito de areia, a análise metatranscriptômica revelou o predomínio de metanogênese autotrófica, com a produção de metano principalmente via fotossíntese escura (Ciclo de Calvin-Benson-Bassham) e rota hidrogenotrófica. Também se verificou que a presença de surfactantes modulou a expressão gênica dos Transportadores ABC do envelope celular, favorecendo o consumo de substratos específicos (Oligossacarídeos, Monossacarídeos, Amino Ácidos e Lipídios), de acordo com cada surfactante usado. Neste estudo também foi revelada a ocorrência de Transferência Direta de Elétrons entre Espécies (DIET) mediada por bactérias magnetotáticas. Bactérias do gênero Desulfovibrio magneticus produziram nanopartículas intracelulares de magnetita, mediando a transferência de elétrons de Geobacter sp. para arqueias metanogênicas. Foi desenvolvido um novo dispositivo suporte (HD1), que se mostrou apropriado para a imobilização celular e o estabelecimento de consórcios metanogênicos. Com a utilização de HD1 para co-digestão de esgoto sanitário com efluente de lavanderia, verificou-se adequada remoção de NFEO (76,7 - 74,78%, para afluente de 18,88 ± 1,95 mg L-1), aliada ao aproveitamento energético do biogás, com a proporção de metano de até 93 - 94%. Provavelmente devido a contribuição de DIET mediado por bactérias magnetotáticas, revelado pela análise metagenômica.This study investigated the metabolism and microbial syntrophy in Anaerobic Fluidized Bed Reactors (RALF) applied to the biodegradation of synthetic surfactants. The molecular biology analyses used were 16S, metagenomics, and metatranscriptomics. RALF was employed in all chapters of this investigation and was fed with synthetic sewage (CHAPTERS 1, 2, 3, and 4), domestic sewage (CHAPTER 5), and co-digestion of domestic sewage with laundry effluent (CHAPTER 6). The RALF designed with an open headspace allowed the contact of effluent with atmospheric oxygen, establishing a facultative microbial community in the sand bed capable of simultaneously biodegrading the alkyl and ethoxylated chains of Nonylphenol Ethoxylate (NFEO) as well as its by-products (4-Nonylphenol and 4-Octylphenol). However, the oxygen introduction broµght by recirculation led to microbial stratification, segmenting the organisms according to their oxygen affinity. In the granular-like bed formed over the sand bed, metatranscriptomic analysis revealed the predominance of autotrophic methanogenesis. Methane production occurred via dark photosynthesis (Calvin-Benson-Bassham Cycle) coupled to the hydrogenotrophic pathway. We also found that the presence of surfactants modulated the gene expression of ABC transporters in the cell envelope, enhancing the consumption of specific substrates (oligosaccharides, monosaccharides, amino acids, and lipids) according to each surfactant used. This study also revealed the occurrence of Direct Interspecies Electron Transfer (DIET) mediated by magnetotactic bacteria. Bacteria of the genus Desulfovibrio magneticus produced intracellular magnetite nanoparticles, mediating electron transfer from Geobacter sp. to methanogenic archaea. We developed a new support device (HD1), which proved effective in cell immobilization and establishing methanogenic consortia. Using HD1 for the co-digestion of domestic sewage with laundry effluent, we observed adequate removal of NFEO (76.7 - 74.78%, for influent of 18.88 ± 1.95 mg L-1), coupled with the energetic utilization of biogas, with methane proportions up to 93 - 94%. This is likely due to the contribution of DIET mediated by magnetotactic bacteria, as revealed by metagenomic analysis.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSilva, Maria Bernadete Amancio VarescheDornelles, Henrique de Souza2024-08-09info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/18/18138/tde-28112024-151653/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-07-18T19:09:02Zoai:teses.usp.br:tde-28112024-151653Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-07-18T19:09:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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Este estudo investigou o metabolismo e o sintrofismo microbiano em Reatores Anaeróbios de Leito Fluidificado (RALF) aplicados à biodegradação de surfactantes sintéticos. As análises de biologia molecular utilizadas foram 16S, metagenômica e metatranscriptômica. O RALF foi utilizado em todos os capítulos desta investigação e alimentado com esgoto sintético (CAPÍTULO 1, 2, 3 e 4), esgoto sanitário (CAPÍTULO 5) e co-digestão de esgoto sanitário com efluente de lavanderia (CAPÍTULO 6). Verificou-se que configuração do RALF com headspace aberto possibilitou o contato do efluente com o oxigênio atmosférico, estabelecendo uma comunidade microbiana facultativa no leito de areia, capaz de biodegradar simultaneamente as cadeias alquílicas e etoxiladas do Nonilfenol Etoxilado (NFEO), bem como seus subprodutos (4-Nonilfenol e 4-Octilfenol). Contudo, a introdução de oxigênio levada pela recirculação gerou a estratificação da microbiota, segmentando os organismos de acordo com sua afinidade pelo oxigênio. No leito com aspecto granular formado sobre o leito de areia, a análise metatranscriptômica revelou o predomínio de metanogênese autotrófica, com a produção de metano principalmente via fotossíntese escura (Ciclo de Calvin-Benson-Bassham) e rota hidrogenotrófica. Também se verificou que a presença de surfactantes modulou a expressão gênica dos Transportadores ABC do envelope celular, favorecendo o consumo de substratos específicos (Oligossacarídeos, Monossacarídeos, Amino Ácidos e Lipídios), de acordo com cada surfactante usado. Neste estudo também foi revelada a ocorrência de Transferência Direta de Elétrons entre Espécies (DIET) mediada por bactérias magnetotáticas. Bactérias do gênero Desulfovibrio magneticus produziram nanopartículas intracelulares de magnetita, mediando a transferência de elétrons de Geobacter sp. para arqueias metanogênicas. Foi desenvolvido um novo dispositivo suporte (HD1), que se mostrou apropriado para a imobilização celular e o estabelecimento de consórcios metanogênicos. Com a utilização de HD1 para co-digestão de esgoto sanitário com efluente de lavanderia, verificou-se adequada remoção de NFEO (76,7 - 74,78%, para afluente de 18,88 ± 1,95 mg L-1), aliada ao aproveitamento energético do biogás, com a proporção de metano de até 93 - 94%. Provavelmente devido a contribuição de DIET mediado por bactérias magnetotáticas, revelado pela análise metagenômica. |
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