Propagação in vitro de crajiru (Fridericia chica (Bonpl.) Lohmann)

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Bortolato, Laura Minatel
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11150/tde-10012025-184100/
Resumo: O crajiru (Fridericia chica (Bonpl.) Lohmann) é uma espécie amazônica, que possui grande potencial de crescimento econômico, principalmente para fabricação de pigmentos e compostos medicinais. Seus compostos secundários de interesse são antocianinas produzidas em suas folhas. Atualmente, há poucos estudos sobre a propagação in vitro do crajiru. Desse modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar técnicas de cultura de tecidos vegetais, empregando duas vias, a organogênese direta e a embriogênese indireta, em F. chica. Para obtenção do meio de cultivo mais adequado para organogênese direta, foram comparados os meios de cultura MS e WPM; em seguida a melhor combinação e concentração de reguladores de crescimento, comparando diferentes doses da citocinina BAP (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1 ) combinadas com a auxina AIA (0,0 e 0,1 mg.L-1 ), e depois com a auxina ANA (0,0 e 0,1 mg.L-1), além de doses isoladas de BAP (0,0; 0,5; 1,0; 2,0 mg.L-1). Em seguida, utilizando sistema de imersão temporal, foram avaliadas diferentes concentrações de sais MS (MS e ½ MS), e frequências de imersão distintas (1; 2 e 3 vezes ao dia). Todas as plantas dos experimentos foram aclimatizadas. Para via embriogênese indireta, foram avaliados dois tipos de explante (folhas sem as pontas (SP) e pontas das folhas (P)), a concentração e combinação mais adequada de reguladores vegetais para formação de calos, testando para SP o meio MS com 2,0 mg.L-1 de BAP, combinado com diferentes doses de 2,4-D ou ANA (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1), e para P o meio MS com 2,0 mg.L-1 de BAP com doses distintas de 2,4-D (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1). Em seguida foram feitos três testes para indução de embriões, acrescentando ao meio ½ MS diferentes reguladores de crescimento e doses, combinando as citocininas: BAP, cinetina e 2-ip; e a auxina ANA; e foi feita a avaliação anatômica e morfológica dos calos. Além disso, ao final fizemos a extração de pigmentos de folhas obtidas in vitro, aclimatizadas e da matriz, a fim de verificar se há diferença entre elas no rendimento de pigmentos (%). Na organogênese direta foi mais adequado para multiplicação do crajiru o meio MS acrescido de 1,0 mg.L-1 de BAP, sem adição de auxinas; o cultivo em biorreatores é viável com o uso do meio MS e frequência de 3 vezes ao dia de imersão, e tivemos sucesso na aclimatização. Para embriogênese indireta não houve diferença entre os tipos de explantes, o meio MS com 2,0 mg.L-1 de 2,4-D e 2,0 mg.L-1 de BAP gerou calos de forma mais rápida e eficiente, não houve formação de embriões em nenhum tratamento, e o mais adequado é a transferência dos calos para o meio de indução de embriões com 30 dias. Não houve diferença de rendimento de pigmentos entre os tratamentos. Concluindo que a propagação in vitro é eficiente para o crajiru, mas novas pesquisas devem ser feitas para aprimorá-la, principalmente em relação aos biorreatores, e a indução de embriões.
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Para obtenção do meio de cultivo mais adequado para organogênese direta, foram comparados os meios de cultura MS e WPM; em seguida a melhor combinação e concentração de reguladores de crescimento, comparando diferentes doses da citocinina BAP (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1 ) combinadas com a auxina AIA (0,0 e 0,1 mg.L-1 ), e depois com a auxina ANA (0,0 e 0,1 mg.L-1), além de doses isoladas de BAP (0,0; 0,5; 1,0; 2,0 mg.L-1). Em seguida, utilizando sistema de imersão temporal, foram avaliadas diferentes concentrações de sais MS (MS e ½ MS), e frequências de imersão distintas (1; 2 e 3 vezes ao dia). Todas as plantas dos experimentos foram aclimatizadas. Para via embriogênese indireta, foram avaliados dois tipos de explante (folhas sem as pontas (SP) e pontas das folhas (P)), a concentração e combinação mais adequada de reguladores vegetais para formação de calos, testando para SP o meio MS com 2,0 mg.L-1 de BAP, combinado com diferentes doses de 2,4-D ou ANA (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1), e para P o meio MS com 2,0 mg.L-1 de BAP com doses distintas de 2,4-D (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1). Em seguida foram feitos três testes para indução de embriões, acrescentando ao meio ½ MS diferentes reguladores de crescimento e doses, combinando as citocininas: BAP, cinetina e 2-ip; e a auxina ANA; e foi feita a avaliação anatômica e morfológica dos calos. Além disso, ao final fizemos a extração de pigmentos de folhas obtidas in vitro, aclimatizadas e da matriz, a fim de verificar se há diferença entre elas no rendimento de pigmentos (%). Na organogênese direta foi mais adequado para multiplicação do crajiru o meio MS acrescido de 1,0 mg.L-1 de BAP, sem adição de auxinas; o cultivo em biorreatores é viável com o uso do meio MS e frequência de 3 vezes ao dia de imersão, e tivemos sucesso na aclimatização. Para embriogênese indireta não houve diferença entre os tipos de explantes, o meio MS com 2,0 mg.L-1 de 2,4-D e 2,0 mg.L-1 de BAP gerou calos de forma mais rápida e eficiente, não houve formação de embriões em nenhum tratamento, e o mais adequado é a transferência dos calos para o meio de indução de embriões com 30 dias. Não houve diferença de rendimento de pigmentos entre os tratamentos. Concluindo que a propagação in vitro é eficiente para o crajiru, mas novas pesquisas devem ser feitas para aprimorá-la, principalmente em relação aos biorreatores, e a indução de embriões.Crajiru (Fridericia chica (Bonpl.) Lohmann) is an Amazonian species with great potential for economic growth, mainly for the manufacture of pigments and medicinal compounds. Its secondary compounds of interest are anthocyanins produced in its leaves. Currently, there are few studies on in vitro propagation of crajiru. Thus, the objective of the present study was to evaluate plant tissue culture techniques, using two pathways, direct organogenesis and indirect embryogenesis, in F. chica. To obtain the most suitable culture medium for direct organogenesis, MS and WPM culture medium were compared; then the best combination and concentration of growth regulators, comparing different doses of the cytokinins BAP (0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 mg.L-1) combined with the auxin AIA (0.0 and 0.1 mg.L-1), and then with the auxin ANA (0.0 e 0.1 mg.L-1), in addition to isolated doses of BAP (0.0; 0.5; 1.0; 2.0 mg.L-1). Then, using a temporary immersion system, different concentrations of MS salts (MS and ½ MS), and distinct immersion frequencies (1; 2 and 3 times a day) were evaluated. All plants in the experiments were acclimatized. For indirect embryogenesis pathway, two types of explants (leaf without tips (SP) and leaf tips (P)) were evaluated, as well as the most appropriate concentration and combination of plant regulators for calluses formation, testing for SP the MS medium with 2,0 mg.L-1 of BAP, combined with different doses of 2,4-D or ANA (0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 mg.L-1), and for P the MS medium with 2.0 mg.L-1de BAP with separate doses of 2,4-D (0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 mg.L-1). Then, three tests for embryo induction were performed, adding different growth regulators and doses to the ½ MS medium, combining the cytokinins: BAP, kinetin and 2-ip; and an ANA auxin; and anatomical and morphological evaluation of the calluses was performed. In addition, at the end, we extracted the pigments of leaves obtained in vitro, acclimatized and from the matrix, in order to verify if there is a difference between them in pigment yields (%). In direct organogenesis, the MS medium added with 1.0 mg.L-1 of BAP, without addition of auxins, was more suitable for multiplication of crajiru; cultivation in bioreactors is viable with the use of MS medium and immersion frequency of 3 times a day; and the acclimatization was successful. For indirect embryogenesis, there was no difference between the types of explants; the MS medium with 2.0 mg.L-1 of 2,4-D and 2.0 mg.L-1 of BAP generated calluses more quickly and efficiently; there was no embryo formation in any treatment, and the most suitable is the transfer of calluses to the embryo induction medium at 30 days. There was no difference in pigment yield between the treatments. Concluding that in vitro propagation is efficient for crajiru, new research must be done to improve it, mainly in relation to bioreactors and embryo induction.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPRodrigues, Paulo Hercílio ViegasBortolato, Laura Minatel2024-11-12info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11150/tde-10012025-184100/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-01-13T13:26:02Zoai:teses.usp.br:tde-10012025-184100Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-01-13T13:26:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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