A deleção específica da dipeptidil peptidase 4 no túbulo proximal renal atenua o aumento de pressão arterial induzido por angiotensina II em camundongos machos e fêmeas

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Martins, Flavia Leticia
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Angiotensin II; Angiotensina II; Dipeptidil Peptidase 4; Dipeptidyl Peptidase 4; Kidney Tubules Proximal; Natriurese; Natriuresis; Sodium-Hydrogen Exchanger 3; Trocador 3 de Sódio-Hidrogênio; Túbulos Renais Proximais
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5166/tde-13102025-121732/

Os inibidores da enzima dipeptidil peptidase 4 (DPP4) são agentes antidiabéticos que exercem efeitos renoprotetores, para além do benefício glicêmico, em humanos e em modelos experimentais de doenças cardiovasculares e renais. Usando abordagens de bioquímica de proteínas demonstrou-se que a DPP4 se associa fisicamente à isoforma 3 do trocador de Na+/H+ (NHE3) em túbulo proximal renal e a relevância funcional. A inibição da DPP4 reduz a reabsorção de Na+ dependente de NHE3. Estudos subsequentes mostraram que inibidores da DPP4 reduzem a pressão arterial em modelos de hipertensão arterial e doença renal crônica (DRC) não associados ao diabetes. Entretanto, ainda não se sabe se esses efeitos estão total ou parcialmente relacionados ao papel da DPP4 no túbulo proximal. Nesse estudo, testamos a hipótese de que a deleção específica da Dpp4 no túbulo proximal renal influencia o manejo renal de sódio e os níveis de pressão arterial e que tais efeitos estão associados com a regulação do NHE3. Para isso, geramos camundongos com deleção específica de Dpp4 no túbulo proximal renal (Dpp4PT) e avaliamos os níveis de pressão arterial, a resposta natriurética a um desafio volêmico e os níveis de fosforilação de NHE3, tanto em condições basais quanto em resposta à infusão aguda de uma dose pressórica de angiotensina II (Ang II) (60 g/kg durante 1 h). Todos os experimentos foram realizados em machos e fêmeas para investigar o efeito do dimorfismo sexual, e os resultados foram comparados com camundongos com nocaute sistêmico de Dpp4, visando determinar a contribuição do túbulo proximal nas respostas observadas. Observamos que a deleção específica de Dpp4 no TP e sistêmica não alterou os valores de pressão arterial basal e que assim como já previamente reportado na literatura, camundongos fêmeas apresentam menores valores de pressão arterial quando comparado aos machos. Camundongos com deleção específica de Dpp4 no TP e sistêmica apresentam maior resposta diurética e natriurética frente ao desafio de sobrecarga salina. Conforme previamente reportado, a fosforilação de NHE3 na serina 552 (pS552-NHE3), indicativo de inibição do NHE3, em condição basal, foi maior em fêmeas Ctrl e wild-type do que em machos (158 ± 12 vs. 100 ± 5 % Ctrl macho, P < 0,01; e 271 ± 17 vs. 100 ± 3 % wild-type macho, P < 0,0001). Notavelmente, os níveis de pS552-NHE3 foram maiores em ambos os sexos de camundongos com deleção específica de Dpp4 no TP (machos: 247 ± 6 vs. 100 ± 5 % Ctrl macho, P < 0,0001; e fêmeas: 196 ± 6 vs. 100 ± 3 % Ctrl fêmea, P < 0,0001) e sistêmica (machos: 498 ± 25 vs. 100 ± 3 % wild-type macho, P < 0,0001; e fêmeas: 344 ± 18 vs. 100 ± 3 % wild-type fêmea, P < 0,0001). A estimulação aguda por Ang II aumentou a atividade da DPP4 renal em camundongos Ctrl e wild-type, tanto machos (167 ± 7 vs. 100 ± 6 % Ctrl, P <0,0001; e 153 ± 3 vs. 100 ± 2 % wild-type, P < 0,0001) quanto fêmeas (160 ± 6 vs. 100 ± 4 % Ctrl, P < 0,0001; e 131 ± 5 vs. 100 ± 2 % wildtype, P < 0,001). A atividade da DPP4 remanescente presente nos camundongos machos e fêmeas com deleção específica de Dpp4 no TP não foi estimulada pela administração de Ang II. Após o estímulo de Ang II, foi observado que camundongos machos e fêmeas com deleção de Dpp4 específica no TP (macho Dpp4PT: 17 ± 1 vs. 29 ± 1 mmHg, P < 0,0001 e fêmea Dpp4PT: 20 ± 1 vs. 28 ± 2 mmHg, P < 0,01) e sistêmica (macho Dpp4-/-: 24 ± 1 vs. 34 ± 2 mmHg, P < 0,0001 e fêmea Dpp4-/-: 25 ± 2 vs. 32 ± 3 mmHg, P < 0,05) apresentaram atenuação no aumento da pressão arterial induzido por Ang II. Após o estímulo pela Ang II, os níveis de pS552-NHE3 foram maiores em ambos os sexos de camundongos com deleção específica de Dpp4 no TP (machos: 331 ± 11 vs. 242 ± 14 % Ctrl macho, P < 0,0001; e fêmeas: 291 ± 11 vs. 193 ± 18 % Ctrl fêmea, P < 0,0001) e sistêmica (machos: 716 ± 32 vs. 469 ± 23 % wild-type macho, P<0,0001, e fêmea: 471 ± 23 vs. 316 ± 22 % wild-type fêmea, P < 0,0001). Em suma, neste estudo fornecemos evidências de a que a DPP4 desempenha papel importante sobre a regulação dos níveis de fosforilação da serina 552 do NHE3, manejo renal de sódio e mecanismo de natriurese pressórica. A similaridade nos fenótipos de camundongos Dpp4PT e Dpp4-/- sugere que todos esses efeitos são predominantemente dependentes da DPP4 presente no túbulo proximal renal.