Avaliação do efeito de uma refeição sanguínea adicional na infectividade de Plasmodium vivax em Anopheles darlingi colonizado
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Link de acesso: | https://arca.fiocruz.br/handle/icict/71241 |
Resumo: | A hematofagia é parte essencial do ciclo de vida de vetores anautógenos. Essa dependência de sangue resulta em frequentes episódios de alimentação sanguínea, permitindo a infecção desses insetos e, consequentemente, a transmissão de espécies do gênero Plasmodium. Estudos têm indicado que duplas alimentações afetam as taxas de crescimento do parasito e, portanto, aumentam o potencial de transmissão de vetores que tenham esse tipo de comportamento. Além disso, como uma maneira de bloquear a transmissão, é necessário investigar estágios do ciclo deste parasito que possam ser alvos, e a quantificação de gametócitos femininos para compará-la com aspectos da transmissão do patógeno se tornou um ótimo candidato. Não há estudos desse tipo para Plasmodium vivax e Anopheles darlingi, sendo uma lacuna para o conhecimento sobre este importante vetor na América. Dessa forma, este estudo avaliou os aspectos quantitativos de uma refeição sanguínea adicional na infectividade de Plasmodium vivax em Anopheles darlingi colonizado. Para tanto, fêmeas desta espécie foram infectadas com sangue positivo para P. vivax por meio do ensaio de alimentação direto por membrana de fêmeas, obtendo-se dois grupos: um com esta única alimentação e um segundo, com uma alimentação adicional que foi realizada após três dias com sangue não infectado. Ambos os grupos foram comparados por meio das seguintes análises: contagem de oocisto (intensidade e taxa de infecção) e contagem de esporozoíto, e se observou o tamanho dos oocistos utilizando um software para medição em imagens produzidas por microscopia eletrônica. Realizou-se também a quantificação de gametócitos femininos por meio da amplificação do gene pvs25, presente na proteína de mesmo nome e por leitura de esfregaço sanguíneo, pós coleta do sangue do paciente. Os resultados foram analisados por meio do Teste T Student, teste de Wilcoxon e as correlações por meio do teste de correlação de Spearman (r) ou Pearson (r). Os resultados revelam que a dupla alimentação afetou aspectos importantes da infecção de P. vivax em An. darlingi: houve aumento na quantidade de oocistos em 1.38%, e de esporozoítos em 3.32%. Também houve aumento no tamanho dos oocistos, em 1.65%. Além disso, por meio dos testes de correlações, foi possível observar que a gametocitemia (por meio da contagem de lâminas) possui influência sobre a intensidade da infecção de ambos os grupos e que a parasitemia possui influência sobre a quantidade de gametócitos (por meio do número de cópias obtidas através da RT-PCR), no entanto, os resultados devem ser considerados com cautela. A quantidade de esporozoítos não apresentou influência sobre nenhuma outra característica da infecção. Esses resultados ressaltam que a dupla alimentação pode impactar na intensidade da infecção por P. vivax em diferentes aspectos e, ainda, deve ser levada em conta em estudos laboratoriais devido ao impacto que esse comportamento pode ter na infecção de P. vivax, fornecendo informações atualizadas e valiosas sobre os aspectos da transmissão do protozoário na natureza. |
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Ferreira, Ana Carolina MonteiroFabbri, CamilaSilva, Alexandre de Almeida eGomes, Fabio MendonçaLopes, Stefanie Costa Pinto2025-08-04T12:42:59Z2025FERREIRA, Ana Carolina Monteiro. Avaliação do efeito de uma refeição sanguínea adicional na infectividade de Plasmodium vivax em Anopheles darlingi colonizado. 2025. 135 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) - Instituto Leônidas & Maria Deane, Fundação Oswaldo Cruz, Manaus, 2025.https://arca.fiocruz.br/handle/icict/71241A hematofagia é parte essencial do ciclo de vida de vetores anautógenos. Essa dependência de sangue resulta em frequentes episódios de alimentação sanguínea, permitindo a infecção desses insetos e, consequentemente, a transmissão de espécies do gênero Plasmodium. Estudos têm indicado que duplas alimentações afetam as taxas de crescimento do parasito e, portanto, aumentam o potencial de transmissão de vetores que tenham esse tipo de comportamento. Além disso, como uma maneira de bloquear a transmissão, é necessário investigar estágios do ciclo deste parasito que possam ser alvos, e a quantificação de gametócitos femininos para compará-la com aspectos da transmissão do patógeno se tornou um ótimo candidato. Não há estudos desse tipo para Plasmodium vivax e Anopheles darlingi, sendo uma lacuna para o conhecimento sobre este importante vetor na América. Dessa forma, este estudo avaliou os aspectos quantitativos de uma refeição sanguínea adicional na infectividade de Plasmodium vivax em Anopheles darlingi colonizado. Para tanto, fêmeas desta espécie foram infectadas com sangue positivo para P. vivax por meio do ensaio de alimentação direto por membrana de fêmeas, obtendo-se dois grupos: um com esta única alimentação e um segundo, com uma alimentação adicional que foi realizada após três dias com sangue não infectado. 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Além disso, por meio dos testes de correlações, foi possível observar que a gametocitemia (por meio da contagem de lâminas) possui influência sobre a intensidade da infecção de ambos os grupos e que a parasitemia possui influência sobre a quantidade de gametócitos (por meio do número de cópias obtidas através da RT-PCR), no entanto, os resultados devem ser considerados com cautela. A quantidade de esporozoítos não apresentou influência sobre nenhuma outra característica da infecção. Esses resultados ressaltam que a dupla alimentação pode impactar na intensidade da infecção por P. vivax em diferentes aspectos e, ainda, deve ser levada em conta em estudos laboratoriais devido ao impacto que esse comportamento pode ter na infecção de P. vivax, fornecendo informações atualizadas e valiosas sobre os aspectos da transmissão do protozoário na natureza.Hematophagy is an essential part of the life cycle of anautogenous vectors. This dependence on blood results in frequent blood-feeding episodes, allowing the infection of these insects and, consequently, the transmission of Plasmodium species. Studies have indicated that double feedings affect parasite growth rates and, therefore, increase the transmission potential of vectors with this type of behavior. Furthermore, to block transmission, it is necessary to investigate stages of this parasite’s cycle that could be targeted, and the quantification of female gametocytes to compare it with aspects of pathogen transmission has become a strong candidate. There are no such studies for Plasmodium vivax and Anopheles darlingi, representing a gap in knowledge about this important vector in the Americas. Thus, this study evaluated the quantitative aspects of an additional blood meal on the infectivity of Plasmodium vivax in colonized Anopheles darlingi. For this, females of this species were infected with P. vivax-positive blood through the direct membrane feeding assay of females, obtaining two groups: one with this single feeding and a second with an additional feeding performed after three days with uninfected blood. Both groups were compared through the following analyses: oocyst count (intensity and infection rate) and sporozoite count, and oocyst size was observed using software for measurement in images produced by electron microscopy. Quantification of female gametocytes was also performed through amplification of the pvs25 gene, present in the protein of the same name, and by reading blood smears after collecting the patient's blood. Results were analyzed using the student’s T-test, Wilcoxon test, and correlations through Spearman's or Pearson’s correlation test (r). The results reveal that double feeding affected important aspects of P. vivax infection in An. darlingi: there was a 1.38% increase in the number of oocysts and a 3.32% increase in sporozoites. There was also an increase in oocyst size, by 1.65%. Furthermore, through correlation tests, it was possible to observe that gametocytemia (through smear count) influences infection intensity in both groups and that parasitemia influences the number of gametocytes (through the number of copies obtained via RT-PCR), however, the results should be interpreted with caution. The number of sporozoites showed no influence on any other infection characteristic. These results highlight that double feeding can impact P. vivax infection intensity in different aspects and should be considered in laboratory studies due to the impact this behavior may have on P. vivax infection, providing updated and valuable information on the transmission aspects of the protozoan in nature.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Leônidas & Maria Deane. Manuas, AM, Brasil.porhematofagiagametócitosAnopheles darlingitransmissãoInfecçãohematophagygametocytesAnopheles darlingitransmissioninfectionPlasmodium vivaxoocistosInteração parasita-vetorAvaliação do efeito de uma refeição sanguínea adicional na infectividade de Plasmodium vivax em Anopheles darlingi colonizadoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2025-05-27Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Leônidas & Maria DeaneMestrado AcadêmicoManausPrograma de PósGraduação em Biologia da Interação Patógeno-Hospedeiroinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZORIGINALDissertação - Ana Carolina Monteiro Ferreira.pdfDissertação - Ana Carolina Monteiro Ferreira.pdfapplication/pdf4909254https://arca.fiocruz.br/bitstreams/097fa89c-1eee-4ede-a658-4a3c369d0f33/download02dc332e97bb4501b1a818adb73189d2MD51trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82991https://arca.fiocruz.br/bitstreams/dfce1f64-db35-4c7c-b1c3-c060acbea752/download5a560609d32a3863062d77ff32785d58MD52falseAnonymousREADTEXTDissertação - Ana Carolina Monteiro Ferreira.pdf.txtDissertação - Ana Carolina Monteiro Ferreira.pdf.txtExtracted texttext/plain103465https://arca.fiocruz.br/bitstreams/bd531d67-57fe-4895-ae75-4c2fdb1430ef/downloadaaa01adcfedb0a205b4819975a3f16c3MD510falseAnonymousREADTHUMBNAILDissertação - 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