Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana em escherichia coli resistente a antibióticos
| Ano de defesa: | 2022 |
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Resumo: | Tese (Doutorado em Periodontia) - Centro de Pesquisas Odontológicas São Leopoldo Mandic |
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Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana em escherichia coli resistente a antibióticosArtigoTerapia fotodinâmicaAntibióticosTratamentoTese (Doutorado em Periodontia) - Centro de Pesquisas Odontológicas São Leopoldo MandicEste estudo utilizou a Eletro-Criotomografia (crio-ET) e imagens de fluorescência para avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) nas estruturas de parede celular e membrana plasmática de uma bactéria Gram-negativa e os efeitos da terapia combinada de aPDT e antibióticos sobre bactérias resistentes. A suspensão padrão e clínica de Escherichia coli foram submetidas ao tratamento fotodinâmico com solução de azul de metileno (100 ?M) e um LED de 100 mW emitindo a 660 nm com 3 j e 18 j de energia. Como grupo controle, uma suspensão de E. coli foi submetida à penicilina V por 60 min a 30°C, para comparar o dano na estrutura da parede celular. Após o tratamento, as imagens de crio-ET foram coletadas e os biofilmes de E. coli foram cultivados para análise de fluorescência antes e após os tratamentos. As cepas clínicas também foram inoculadas em placas de Petri submetidas ao teste de halo de inibição e MIC frente aos antibióticos Ampicilina, Amoxicilina + Ácido Clavulânico, Clindamicina e Eritromicina. Para o experimento in vivo, larvas da lagarta Galleria mellonella foram infectadas com E. coli e tratadas com antibióticos, aPDT ou as terapias combinadas. As imagens de crio-ET confirmaram os danos ao envelope bacteriano, apresentando danos nas paredes celulares, membrana externa e membrana plasmática, formação de estruturas das vesículas dentro e fora da bactéria e as imagens de fluorescência ratificaram o efeito dose-dependente da aPDT. Quanto aos testes microbiológicos, o halo de inibição mostrou aumento da sensibilidade ao antibiótico quando da associação das terapias, entretanto o mesmo efeito não foi observado no MIC. Antibiótico ou aPDT sozinhos não melhoraram a sobrevida das lagartas, mas a terapia combinada aumentou significativamente a curva de sobrevida. A partir dos resultados obtidos por crio-ET e as imagens de fluorescência podemos concluir que aPDT parece promover microdanos ao envelope celular, induzindo a produção de vesículas e permeabilizando as membranas celulares, possivelmente influenciando na ação do antibiótico. A associação da aPDT e antibióticos aumentou a sobrevida dos animais, mesmo quando infectados com cepas resistentes de E.coli. Palavras-chave: Terapia fotodinâmica; Antibióticos; Tratamento; Criotomografia eletrônica; Azul de metileno; PDT.[s.n.]Garcez Segundo, Aguinaldo SilvaCentro de Pesquisas Odontológicas São Leopoldo MandicScheidt, Fábio Roberto2022info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis41f : il.https://biblioteca.slmandic.edu.br/TerminalWebRI/acervo/detalhe/188030porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Faculdade São Leopoldo Mandicinstname:Faculdade São Leopoldo Mandicinstacron:SLMANDICinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-07-25T12:20:05Zoai:prima.com.br:188030Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPRIhttps://biblioteca.slmandic.edu.br/biblioteca/oai/oai.aspsamanta.capeletto@slmandic.edu.bropendoar:2024-07-25T12:20:05Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Faculdade São Leopoldo Mandic - Faculdade São Leopoldo Mandicfalse |
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