Produ????o heter??loga dos pept??deos antimicrobianos Cm-p5 e Cn-AMP1 em sistema procarioto

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Cobacho, Nicole Berwanger
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Cat??lica de Bras??lia; Escola de Sa??de e Medicina; Brasil; UCB; Programa Strictu Sensu em Ci??ncias Gen??micas e Biotecnologia
• Palavras-chave em Português: Express??o heter??loga; Pept??deos antimicrobianos; Escherichia coli; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
• Link de acesso: https://bdtd.ucb.br:8443/jspui/handle/tede/2294

A resist??ncia dos microrganismos aos antibi??ticos que s??o comumente utilizados vem aumentando drasticamente nos ??ltimos anos, sugerindo que brevemente, entraremos em uma era p??s-antibi??ticos onde terapias utilizadas atualmente n??o ser??o mais eficientes no combate a infec????es. Desta forma, a procura e o estudo de novas drogas e modelos de a????o de compostos que impe??am ou reduzam o desenvolvimento de pat??genos ?? essencial. Neste contexto, os pept??deos antimicrobianos (PAMs) surgem como uma nova gera????o de compostos que demonstram um grande potencial terap??utico. Essas mol??culas apresentam-se em baixa concentra????o no organismo de origem, tornando o seu isolamento a partir de fontes naturais um processo dispendioso e, por muitas vezes, invi??vel. Para a obten????o de maior quantidade desses pept??deos, a express??o recombinante via sistema heter??logo pode ser considerada uma alternativa eficiente em rela????o ao tempo, custo e produtividade. Em 2009, Mandal e colaboradores isolaram tr??s pept??deos da agua de coco (Coco nucifera), denominados Cn-AMP1 -2 e -3. Dentre eles, o Cn-AMP1 apresentou melhor atividade contra bact??rias e fungos de import??ncia medica. Posteriormente, Lopez-Abarrategui e colaboradores em 2012 isolaram pept??deos com atividade antimicrobiana do molusco Centrichis muricatus denominados Cm-p1 e Cm-p2. A partir destes, uma serie de pept??deos variantes foram teoricamente propostos in silico e avaliados contra C. albicans sendo que o pept??deo nominado o Cm-p5 demonstrou, entre todos, melhor atividade antif??ngica. Neste trabalho, v??rias constru????es contendo os pept??deos Cm-p5 e Cn-AMP1 foram desenhadas em tandem e inseridas no vetor pETSUMO (Life Technologies). Os genes foram expressos em grandes quantidades em cepas derivadas de Escherichia coli BL21(DE3) e ap??s purifica????o em coluna de afinidade, os mesmos foram avaliados, ainda fusionados com a prote??na SUMO, contra microrganismos patog??nicos. No entanto, nenhum dos pept??deos expressos demonstrou atividade bactericida contra as cepas avaliadas.