Superprodução de ramnolipídeo em Saccharomyces cerevisiae: Construção de vetores de expressão
| Ano de defesa: | 2015 |
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| Orientador(a): | |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Católica de Brasília
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa Strictu Sensu em Ciências Genômicas e Biotecnologia
|
| Departamento: |
Escola de Saúde e Medicina
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| País: |
Brasil
|
| Palavras-chave em Português: | |
| Área do conhecimento CNPq: | |
| Link de acesso: | https://bdtd.ucb.br:8443/jspui/handle/tede/1997 |
Resumo: | Biosurfactants are metabolites that contain both hydrophobic and hydrophilic domains and are produced by various microorganisms. Due to its characteristics such molecules localize preferable in the interface of polar and non-polar solvents. Biosurfactants are widely used in pharmaceutic, cosmetic, food and agriculture industries. Moreover, they are considered advantageous when compared to chemical ones because they are biodegradable and non-toxic. Currently one of the best known biosurfactant is the rhamnolipids. However, their utilization in large scale are still not possible due to its high production costs. Rhamnolipids are produced mainly by Pseudomonas aeruginosa and are composed by one or two molecules of L-rhamnose attached to a fatty acid molecule. This study aimed the construction of yeast expression vectors that will be used to construct a recombinant strain of Saccharomyces cerevisiae efficient in the production of L-rhamnose and mono-rhamnolipid using sucrose as substrate. For the construction of these vectors, six different genes, responsible for encoding both L-rhamnose and mono-ramnolipideos biosynthetic pathways enzymes described in P. aeruginosa (rmlA, rmlB, rmlC, rmlD, rhlA and rhlB), and one gene, responsible for the synthesis of a substrate break enzyme, described in Pelomonas sacchraphyla (sucrose phosphorylase) were utilized. The genetic engineering proposed in this study is innovative, and has never been done before. The production of rhamnolipid in large-scale at low costs will be highly beneficial for the development of national technologies for production of high value-added chemical. |
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Parachin, Nádia Skorupahttp://lattes.cnpq.br/1214716137780644http://lattes.cnpq.br/3454004547074775Campos, Rayane Luzia Viegas Campos2016-12-19T18:06:48Z2015-03-31CAMPOS, Rayane Luzia Viegas Campos. Superprodução de ramnolipídeo em Saccharomyces cerevisiae: Construção de vetores de expressão. 2015. 65f. Dissertação( Programa Strictu Sensu em Ciências Genômicas e Biotecnologia) - Universidade Católica de Brasília, Brasília, 2015.https://bdtd.ucb.br:8443/jspui/handle/tede/1997Biosurfactants are metabolites that contain both hydrophobic and hydrophilic domains and are produced by various microorganisms. Due to its characteristics such molecules localize preferable in the interface of polar and non-polar solvents. Biosurfactants are widely used in pharmaceutic, cosmetic, food and agriculture industries. Moreover, they are considered advantageous when compared to chemical ones because they are biodegradable and non-toxic. Currently one of the best known biosurfactant is the rhamnolipids. However, their utilization in large scale are still not possible due to its high production costs. Rhamnolipids are produced mainly by Pseudomonas aeruginosa and are composed by one or two molecules of L-rhamnose attached to a fatty acid molecule. This study aimed the construction of yeast expression vectors that will be used to construct a recombinant strain of Saccharomyces cerevisiae efficient in the production of L-rhamnose and mono-rhamnolipid using sucrose as substrate. For the construction of these vectors, six different genes, responsible for encoding both L-rhamnose and mono-ramnolipideos biosynthetic pathways enzymes described in P. aeruginosa (rmlA, rmlB, rmlC, rmlD, rhlA and rhlB), and one gene, responsible for the synthesis of a substrate break enzyme, described in Pelomonas sacchraphyla (sucrose phosphorylase) were utilized. The genetic engineering proposed in this study is innovative, and has never been done before. The production of rhamnolipid in large-scale at low costs will be highly beneficial for the development of national technologies for production of high value-added chemical.Biossurfactantes são metabólitos produzidos por diversos microrganismos. Estes contêm um domínio hidrofílico e outro hidrofóbico, estando preferencialmente na interface de compostos polares e apolares. Devido às suas propriedades, os biosurfactantes são capazes de reduzir a tensão de superfícies tendo uma ampla aplicação na indústria farmacêutica, cosmética, alimentícia e agrícola. O uso de biossurfactante em comparação com os de origem química são considerados vantajosos, uma vez que são biodegradáveis e não tóxicos. Atualmente um dos biossurfactantes mais conhecido e disponível comercialmente são os ramnolipídeos. No entanto, a utilização destas moléculas em larga escala é prejudicada devido aos seus elevados custos de produção. Ramnolipídeos são produzidos principalmente por Pseudomonas aeruginosa e são constituídos por uma ou duas moléculas de L-ramnose ligada a uma molécula de ácido graxo. Assim, este estudo teve como objetivo a construção de vetores de expressão em levedura para posterior construção de cepas recombinantes de Saccharomyces cerevisiae visando a eficiente produção de L-ramnose e monoramnolipídeo a partir de sacarose. Para a construção desses vetores, foram utilizados seis genes, que codificam as enzimas responsáveis pelas vias de biossíntese de Lramnose e mono-ramnolipideos descritos em P. aeruginosa (rmlA, rmlB, rmlC, rmlD, rhlA e rhlB), e um gene, responsável pela síntese da enzima de quebra do substrato, descrito em Pelomonas sacchraphyla (sacarose fosforilase). A engenharia genética proposta neste estudo é inovadora, e pela primeira vez realizada. Com a produção do ramnolipídeo em larga escala à um baixo custo de produção, beneficiará o desenvolvimento de tecnologias nacionais para produção de químicos de alto valor agregado.Submitted by Kelson Anthony de Menezes (kelson@ucb.br) on 2016-12-19T18:06:48Z No. of bitstreams: 1 RayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf: 2888012 bytes, checksum: 8f9962ac7690fc08e072b81ccd8516db (MD5)Made available in DSpace on 2016-12-19T18:06:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf: 2888012 bytes, checksum: 8f9962ac7690fc08e072b81ccd8516db (MD5) Previous issue date: 2015-03-31application/pdfhttps://bdtd.ucb.br:8443/jspui/retrieve/4078/RayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf.jpgporUniversidade Católica de BrasíliaPrograma Strictu Sensu em Ciências Genômicas e BiotecnologiaUCBBrasilEscola de Saúde e MedicinaBiossurfactanteRamnolipídeoProduçãoLarga escalaSaccharomyces cerevisiaeGenéticaGenomaCIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICASuperprodução de ramnolipídeo em Saccharomyces cerevisiae: Construção de vetores de expressãoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis-2827197273900952156500500600-6392058866414562720-5518144268585252051info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UCBinstname:Universidade Católica de Brasília (UCB)instacron:UCBLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82089https://bdtd.ucb.br:8443/jspui/bitstream/tede/1997/1/license.txt7b5ba3d2445355f386edab96125d42b7MD51ORIGINALRayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdfRayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdfapplication/pdf2888012https://bdtd.ucb.br:8443/jspui/bitstream/tede/1997/2/RayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf8f9962ac7690fc08e072b81ccd8516dbMD52THUMBNAILRayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf.jpgRayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf.jpgimage/jpeg5672https://bdtd.ucb.br:8443/jspui/bitstream/tede/1997/3/RayaneLuziaViegasCamposDissertacao2015.pdf.jpg4e21003ecb6a4859e04aef76e31635c1MD53tede/19972016-12-20 03:02:36.375oai:bdtd.ucb.br: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Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://bdtd.ucb.br:8443/jspui/PRIhttps://bdtd.ucb.br:8443/oai/requestsdi@ucb.bropendoar:47812016-12-20T03:02:36Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UCB - Universidade Católica de Brasília (UCB)false |
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