Métodos de desinfestação no isolamento e indução in vitro de clones de erva-mate

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: PRADO, Débora Cristina Pereira
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
DESINFESTAÇÃO INORGÂNICA
SOLUÇÕES ORGÂNICAS
OXIDAÇÃO
CULTIVO IN VITRO
ERVA-MATE
chemical disinfestation
organic solutions
oxidation
in vitro cultivation
MATE
Link de acesso: https://biblioteca.sophia.com.br/terminalri/9566/acervo/detalhe/155574
Resumo: (Mestrado em Ciências Florestais) - Programa de Pós-Graduação em Ciências Florestais, Universidade Estadual do Centro-Oeste
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spelling Métodos de desinfestação no isolamento e indução in vitro de clones de erva-mateDESINFESTAÇÃO INORGÂNICASOLUÇÕES ORGÂNICASOXIDAÇÃOCULTIVO IN VITROERVA-MATEchemical disinfestationorganic solutionsoxidationin vitro cultivationMATE(Mestrado em Ciências Florestais) - Programa de Pós-Graduação em Ciências Florestais, Universidade Estadual do Centro-OesteIlex paraguariensis (erva-mate), é uma espécie de grande importância ambiental, social e econômica, na região sul do país. Métodos de propagação vegetativa, como o cultivo in vitro, desde que se desenvolvam protocolos viáveis, podem ser utilizados para a produção de mudas a partir de clones selecionados, na formação de ervais com maior produtividade e uniformidade. Entretanto, a contaminação bacteriana e fúngica e a oxidação fenólica têm sido os maiores entraves para a propagação in vitro da erva-mate. Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de soluções inorgânica e orgânicas em diferentes tempos de imersão (10; 20; 30 e 40 minutos), na etapa de isolamento e indução in vitro de gemas axilares em segmentos nodais e gemas axilares isoladas. A solução inorgânica utilizada nos experimentos constituiu-se de hipoclorito de sódio (NaOCl) (7,5; 10 e 20 mL. L - 1 ), e as soluções orgânicas foram compostas por Equisetum hyemale L. (10 g. L -1 ), própolis (5 e 10 mL. L -1 ), óleos essenciais de Melaleuca alternifolia Cheel (melaleuca) (5 e 10 mL.L-1 ), Menta arvensis L. (hortelã-japonesa) (1,25; 2,5; 5 e 10 mL. L -1 ), Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M. Perry (cravo) (1,25 e 10 mL. L -1 ) e Cymbopogon citratus (DC) Stapf (capimlimão) (1,25; 2,5 e 5 mL. L -1 ), em diferentes combinações ou puros, de acordo com cada experimento. Ao meio de cultivo MS, contendo 100% e 25% da concentração de sais, acrescido de 3% de sacarose, 0,01% de mioinositol e BAP, adicionaram-se ou não os produtos utilizados para composição da solução orgânica. Avaliou-se ainda o tipo de propágulo utilizado na confecção dos explantes (segmento nodal e gemas axilares isoladas). No caso dos segmentos nodais, avaliou-se a origem dos propágulos (de brotações menores e maiores que 15 cm de comprimento), bem como a posição do explante na brotação (basal, mediana ou apical). Foi avaliado também o efeito de antioxidantes (ácido ascórbico, cisteína e carvão ativado); concentrações do regulador de crescimento BAP (1 e 2 mg. L -1 ) e extrato pirolenhoso; e condições de cultivo (câmara escura, sala de crescimento com fotoperíodo de 16 horas e DBO). O delineamento adotado foi o inteiramente casualizado, com cinco repetições constituídas de quatro tubos de ensaio, contendo um explante por tubo. As características avaliadas foram a porcentagem de contaminação bacteriana, de contaminação fúngica, de oxidação, de sobrevivência e de indução de brotações. A análise estatística foi realizada por meio do teste de Kruskal-Wallis (KW) e as médias foram comparadas pelo Teste de Duncan, ao nível de 5% de probabilidade de erro. Os óleos essenciais de M. arvensis e S. aromaticum utilizados em solução desinfestantes foram eficientes na redução da contaminação fúngica e bacteriana. Quando utilizados no meio de cultivo, foram eficientes na obtenção de culturas livres de contaminação fúngica e bacteriana, contudo não houve brotação de gemas axilares. O tratamento de desinfestação que resultou em maior número de explantes com brotações foi a imersão dos explantes por 30 minutos em 7,5 mL. L -1 de NaOCl. Os propágulos da região basal, independente do tamanho das brotações utilizadas (maior ou menor que 15 cm), resultaram em maior sobrevivência e brotações induzidas. Explantes de segmento nodal resultaram em maior brotação, enquanto as gemas axilares isoladas resultaram em menor contaminação. Não houve diferença significativa entre as doses de BAP aplicadas e não houve redução da oxidação pelos antioxidantes empregados, porém o ácido ascórbico auxiliou no controle de contaminação bacteriana. A melhor condição de cutivo dos explantes foi em sala de crescimento sem pré-isolamento em câmara escura. A oxidação foi o fator mais limitante ao sucesso do isolamento e indução in vitro, para os clones estudados.Ilex paraguariensis (mate) is a species of significant environmental, social and economic importance in the southern region of Brazil. Methods of vegetative propagation, such as in vitro cultivation, provided that viable protocols are developed, can be used for the production of plantlets from selected clones, to form mate plantations with better uniformity. However, bacterial and fungal contamination and phenolic oxidation has been the major obstacle for an in vitro propagation of mate. The objective of this work was to evaluate the effect of chemical and organic solutions in different immersion times (10, 20, 30 and 40 minutes) in the isolation and in vitro induction of axillary buds in nodal segments and isolated axillary buds. A chemical solution used in the experiments consisted of sodium hypochlorite (NaOCl) (7.5, 10 and 20 mL.L-1), and as organic solutions were Equisetum hyemale L. (10 gL-1), propolis 5 and 10 mL.L-1), essential oils of Melaleuca alternifolia Cheel (melaleuca) (5 and 10 mL.L-1), Menta arvensis L. (Mint) (1.25; 2.5; 10 mL.L-1), Syzygium aromaticum (L.) Merr. And LM Perry (clove) (1.25 and 10 mL.L-1) and Cymbopogon citratus (DC) Stapf (lemon grass) (1.25, 2.5 and 5 mL.L-1) in different combinations or pure, according to each experiment. To the MS culture medium, 100% and 25% concentration of salts of the medium, plus 3% sucrose, 0.01% myoinositol and BAP, added or not the products for use composition of the organic solution. It was also evaluated the type of propagule used in the elaboration of the explants (nodal segment and caulinar apex). To the nodal segments, was evaluated the origin of the propagules, as well as to the position of explant at budding (basal, median or apical). It was also evaluated the effect of antioxidants (ascorbic acid, cysteine and actived charcoal); concentrations of the 6-benzylaminopurine growth regulator (BAP, 1 and 2 mg.L1) and wood vinegar; and culture conditions (darkroom, growth room with photoperiod of 16 hours and BOD). The design was completely randomized, with five replicates consisting of four test tubes containing one explant per tube. Was evaluated the percentage of bacterial contamination, fungal contamination, oxidation, survival and sprout induction. Statistical analysis was executed through the Kruskal-Wallis test (KW) and the means were compared by the Duncan test at the 5% error probability level. The essential oils of M. arvensis and S. aromaticum use in disinfectants solution was efficient in the reduction of fungal and bacterial contamination. When added in culture medium was effective in obtaining cultures free from fungal and bacterial contamination, however there was no budding of axillary buds. The disinfestation treatment that resulted in a greater number of budding explants was immersion of the explants for 30 minutes in NaOCl 7,5 mL.L-1 . The propagules of the basal region, regardless of shoot size (bigger or smaller than 15 cm), resulted in higher survival and induced sprouts. Nodal segment explants resulted in greater budding, while isolated axillary buds resulted in lower contamination. There was no significant difference between applied doses of BAP and there was no reduction of the oxidation by antioxidants used, but the ascorbic acid promoted a control of bacterial contamination. The best culture condition of the explants was in a growth room without pre-isolation in a darkroom. Oxidation was the most limiting factor for the success of in vitro isolation and induction for the clones studied.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESAcesso AbertoSubmitted by Fabiano Jucá (fjuca@unicentro.br) on 2021-02-23T14:54:09Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Débora Cristina Pereira Prado.pdf: 2009048 bytes, checksum: 2d4609f78869c778bfdd8d4755e74454 (MD5) Made available in DSpace on 2021-02-23T14:54:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Débora Cristina Pereira Prado.pdf: 2009048 bytes, checksum: 2d4609f78869c778bfdd8d4755e74454 (MD5) Previous issue date: 2018-03-05Unicentro - Departamento de Engenharia FlorestalPERES, Fabiana Schmidt BandeiraTambarussi, Evandro VagnerPRADO, Débora Cristina Pereira2018info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf72 f.https://biblioteca.sophia.com.br/terminalri/9566/acervo/detalhe/155574https://biblioteca.sophia.com.br/terminalri/9566/acervo/detalhe/155574Cover: https://biblioteca.sophia.com.br/terminalri/9566/capa/capa?codigo=155574porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações do UNICENTROinstname:Universidade Estadual do Centro-Oeste (UNICENTRO)instacron:UNICENTROinfo:eu-repo/semantics/openAccess2025-09-25T16:46:08Zoai::155574Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://tede.unicentro.br:8080/jspui/PUBhttp://tede.unicentro.br/tde_oai/oai3.phprepositorio@unicentro.br||fabianoqueiroz@yahoo.com.bropendoar:2025-09-25T16:46:08Biblioteca Digital de Teses e Dissertações do UNICENTRO - Universidade Estadual do Centro-Oeste (UNICENTRO)false
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