Análise molecular de cepas de campo de parvovírus canino tipo 2 e eficiência de neutralização viral de anticorpos gerados por vacinas comerciais e experimentais

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2023
Autor(a) principal: Gheno, Brenda Picoli
Orientador(a): Streck, André Felipe
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: eng
por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Parvovirus canino
Vacinas
Virologia veterinária
Vacinação de animais
Palavras-chave em Inglês:
Parvovirus canin
Vaccines
Veterinary virology
Vaccination of animals
Link de acesso: https://repositorio.ucs.br/11338/12864
Resumo: O parvovírus canino tipo 2 (CPV-2) é um vírus que apresenta características evolutivas através do resultados de substituições nucleotídeos que, por consequência acarreta na alterações de aminoácidos em seu genoma, principalmente na proteína VP2, gerando principalmente sinais clínicos gastroentéricos em cães jovens e não vacinados. Na imunização dos caninos contra o CPV-2 dita-se que a falha vacinal dos filhotes pode estar relacionada à supressão de resposta imune induzida por anticorpos maternos. Existem diferentes marcas de vacinas disponíveis no Brasil levantando-se o questionamento da eficácia das vacinas nacionais frente às importadas. Visto isso, a análise da qualidade das vacinas é de suma importância a fim de avaliar a sua eficácia. Este trabalho foi desenvolvido a fim de elucidar a partir de testes in vivo a capacidade de neutralização viral dos anticorpos gerados pelas vacinas comercializadas na região sul do Brasil, incluindo tanto marcas nacionais quanto importadas. Além disso, obtiveram-se cepas de campo em parceria com clínicas da Serra Gaúcha e região metropolitana de Porto Alegre para determinar as variantes predominantes e o status vacinal dos animais portadores da parvovirose canina. Ademais, também foram utilizadas ferramentas de bioinformática a fim de determinar as principais variantes circulantes no Brasil, nos últimos 10 anos, através do acesso à plataforma GenBank. Desta forma, foi realizado o alinhamento das sequências no programa MEGA11, realizou-se uma árvore filogenética no programa FigTree v1.4.4. e foram determinadas as regiões predominantes com substituições de aminoácidos presentes, tanto nas cepas circulantes quanto nas vacinas comerciais já sequenciadas em estudo anterior, finalizando com a avaliação da proteína estrutural VP2 no programa ChimeraX visualizando os pontos eletrostáticos e hidrofóbicos dos sítios apresentados. Em seguida caracterizou-se a predominância da circulação da variante CPV-2a, seguida de CPV-2c e CPV-2b, respectivamente, destacando alterações nos sítios 44, 101, 267, 297, 300, 305, 324, 375, 426 e 440, com alterações de carga e hidrofobicidade na proteína VP2. Na árvore filogenética realizada observaram-se as vacinas agrupadas no clado em conjunto à cepa ancestral, as variantes CPV-2b e CPV-2c, agrupadas em um mesmo clado, e a CPV-2a em um único clado. Por fim, levantou-se o questionamento da eficácia das vacinas comercializadas, disponíveis na região sul do Brasil, por serem observadas diferentes titulações de anticorpos neutralizantes nos resultados obtidos in vivo. [resumo fornecido pelo autor]
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Este trabalho foi desenvolvido a fim de elucidar a partir de testes in vivo a capacidade de neutralização viral dos anticorpos gerados pelas vacinas comercializadas na região sul do Brasil, incluindo tanto marcas nacionais quanto importadas. Além disso, obtiveram-se cepas de campo em parceria com clínicas da Serra Gaúcha e região metropolitana de Porto Alegre para determinar as variantes predominantes e o status vacinal dos animais portadores da parvovirose canina. Ademais, também foram utilizadas ferramentas de bioinformática a fim de determinar as principais variantes circulantes no Brasil, nos últimos 10 anos, através do acesso à plataforma GenBank. Desta forma, foi realizado o alinhamento das sequências no programa MEGA11, realizou-se uma árvore filogenética no programa FigTree v1.4.4. e foram determinadas as regiões predominantes com substituições de aminoácidos presentes, tanto nas cepas circulantes quanto nas vacinas comerciais já sequenciadas em estudo anterior, finalizando com a avaliação da proteína estrutural VP2 no programa ChimeraX visualizando os pontos eletrostáticos e hidrofóbicos dos sítios apresentados. Em seguida caracterizou-se a predominância da circulação da variante CPV-2a, seguida de CPV-2c e CPV-2b, respectivamente, destacando alterações nos sítios 44, 101, 267, 297, 300, 305, 324, 375, 426 e 440, com alterações de carga e hidrofobicidade na proteína VP2. Na árvore filogenética realizada observaram-se as vacinas agrupadas no clado em conjunto à cepa ancestral, as variantes CPV-2b e CPV-2c, agrupadas em um mesmo clado, e a CPV-2a em um único clado. Por fim, levantou-se o questionamento da eficácia das vacinas comercializadas, disponíveis na região sul do Brasil, por serem observadas diferentes titulações de anticorpos neutralizantes nos resultados obtidos in vivo. [resumo fornecido pelo autor]Canine Parvovirus Type 2 (CPV-2) is a virus that undergoes evolutionary changes due to nucleotide substitutions, which consequently lead to amino acid alterations in its genome, primarily in the VP2 protein, resulting in gastroenteric clinical signs, mainly in young and unvaccinated dogs. Regarding the immunization of dogs against CPV-2, it is suggested that vaccine failure in puppies may be related to the suppression of the immune response induced by maternal antibodies. Different brands of vaccines are available in Brazil, raising questions about the efficacy of domestic vaccines compared to imported ones. Therefore, the analysis of vaccine quality is of utmost importance to assess their effectiveness. This study was conducted to elucidate, through in vivo tests, the ability of antibodies generated by vaccines marketed in the southern region of Brazil, including both domestic and imported brands, to neutralize the virus. Additionally, field strains were obtained in collaboration with clinics in the Serra Gaúcha and metropolitan region of Porto Alegre to determine the predominant variants and the vaccination status of dogs with canine parvovirus. Furthermore, bioinformatics tools were also used to determine the main circulating variants in Brazil over the past 10 years, accessed through the GenBank platform. Thus, sequence alignment was performed in the MEGA11 program, a phylogenetic tree was constructed in the FigTree v1.4.4 program, and the predominant regions with amino acid substitutions were determined, both in circulating strains and in commercially sequenced vaccines from a previous study. The analysis concluded with an evaluation of the structural protein VP2 in the ChimeraX program, visualizing the electrostatic and hydrophobic points of the presented sites.The study identified the predominance of the CPV-2a variant, followed by CPV-2c and CPV-2b, respectively, highlighting changes in sites 44, 101, 267, 297, 300, 305, 324, 375, 426, and 440, with alterations in charge and hydrophobicity in the VP2 protein. In the phylogenetic tree, the vaccines were observed to cluster in the clade together with the ancestral strain, CPV-2b and CPV-2c variants were grouped in the same clade, and CPV-2a in a separate clade. Finally, questions were raised about the efficacy of the vaccines available in the southern region of Brazil, as different titers of neutralizing antibodies were observed in the in vivo results. [resumo fornecido pelo autor]Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES, BrasilengporParvovirus caninoVacinasVirologia veterináriaVacinação de animaisParvovirus caninVaccinesVeterinary virologyVaccination of animalsAnálise molecular de cepas de campo de parvovírus canino tipo 2 e eficiência de neutralização viral de anticorpos gerados por vacinas comerciais e experimentaisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisreponame:Repositório Institucional da UCSinstname:Universidade de Caxias do Sul (UCS)instacron:UCSinfo:eu-repo/semantics/openAccessUniversidade de Caxias do Sulhttp://lattes.cnpq.br/5054574004539690GHENO, B.P.Mestrado Profissional em Saúde AnimalCampus Universitário de Caxias do SulORIGINALDissertação Brenda Picoli Gheno.pdfDissertação Brenda Picoli Gheno.pdfapplication/pdf16301543https://repositorio.ucs.br/xmlui/bitstream/11338/12864/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Brenda%20Picoli%20Gheno.pdf7f3bd3d50db5ef9674b30f58b1229c55MD51TEXTDissertação Brenda Picoli Gheno.pdf.txtDissertação Brenda Picoli Gheno.pdf.txtExtracted texttext/plain145824https://repositorio.ucs.br/xmlui/bitstream/11338/12864/2/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Brenda%20Picoli%20Gheno.pdf.txtda57c82ae63ecd37bf9a9eabb32a8c15MD52THUMBNAILDissertação Brenda Picoli Gheno.pdf.jpgDissertação Brenda Picoli Gheno.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1264https://repositorio.ucs.br/xmlui/bitstream/11338/12864/3/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Brenda%20Picoli%20Gheno.pdf.jpg60885bc1d6989dd807db2749cf8e6ae4MD5311338/128642023-12-09 06:00:31.974oai:repositorio.ucs.br:11338/12864Repositório de Publicaçõeshttp://repositorio.ucs.br/oai/requestopendoar:2023-12-09T06:00:31Repositório Institucional da UCS - Universidade de Caxias do Sul (UCS)false
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