Utilização de progesterona, estradiol, androstenediona e hormônio folículo-estimulante no cultivo in vitro de folículo pré-antrais caprinos

• Ano de defesa: 2009
• Autor(a) principal: Lima-Verde, Isabel Bezerra
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Biotecnologia; Caprinos - Folículos pré-antrais; Cultivo in vitro; Estradiol; Progesterona
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=56719

O objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da progesterona, da androstenediona e do estradiol, na presença ou ausência de hormônio folículo-estimulante (FSH), sobre a sobrevivência, ativação e o crescimento de folículos pré-antrais caprinos. Fragmentos de tecido ovariano foram cultivados por 1 ou 7 dias em Meio Essencial Mínimo modificado (MEM+) sozinho ou contendo progesterona (1, 2.5, 5, 10 ou 20 ng/mL – experimento 1), estradiol (1, 5, 10, 20 ou 40 pg/mL - experimento 2) ou androstenediona (10, 50 ou 100 ng/mL -experimento 3) na presença ou ausência de FSH (50 ng/mL). O tecido ovariano nãocultivado (controle fresco) e o cultivado nos diferentes tratamentos foi processado para análise utilizando as técnicas de histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão (experimentos 1 e 2) ou microscopia de fluorescência (experimento 3). Após 7 dias de cultivo, os resultados do experimento 1 mostraram que a adição de FSH a todas as concentrações de progesterona manteve o percentual de folículos normais similar ao controle fresco. Nesse mesmo período um alto percentual de ativação folicular foi observado somente nos tratamentos com 2,5 ng/mL de progesterona + FSH ou 10 ng/mL de progesterona sozinha, em relação ao controle. Além disso, conforme o período de cultivo progrediu de 1 para 7 dias, houve um aumento significativo no percentual de folículos ativados nos tratamentos com 2,5 ng/mL de progesterona + FSH e no MEM+. Em todos os tratamentos após 7 dias houve um aumento significativo no diâmetro follicular em relação ao controle fresco, exceto nos tratamentos MEM+, 5 ng/mL de progesterona + FSH ou 10 ng/mL de progesterona. A análise ultra-estrutural confirmou a integridade folicular no tratamento com 2,5 ng/mL de progesterona + FSH após 7 dias de cultivo. Com relação ao experimento 2, após 7 dias de cultivo, os tratamentos com 1, 5 ou 20 pg/mL de estradiol + FSH resultaram em percentuais de folículos normais significativamente superiores ao tratamento com MEM+ e todos os tratamentos testados exibiram percentuais de ativação folicular significativamente superiores ao controle fresco e ao MEM+. Além disso, nesse período, a adição de FSH ao meio contendo estradiol (1, 5, 10 ou 20 pg/mL) aumentou significativamente o diâmetro folicular em relação ao MEM+. Vale ressaltar que a análise ultra-estrutural confirmou a integridade folicular apenas para o tratamento com 1 pg/mL de estradiol + FSH. No experimento 3, em relação ao controle fresco, houve uma redução significativa no percentual de folículos normais e um aumento no percentual de ativação em todos os tratamentos com androstenediona testados após 7 dias de cultivo. Ainda dentro desse período, não foi verificada diferenças entre o cultivo com MEM+ e os demais tratamentos com relação ao percentual de folículos ativados. Após 1 ou 7 dias todos os tratamentos tiveram diâmetros folicular e oocitário semelhantes ao controle fresco e ao MEM+. A análise através de microscopia de fluorescência demonstrou que somente os fragmentos cultivados com 50 ou 100 ng/mL de androstenediona + FSH mostraram percentuais de folículos viáveis similares ao tratamento com MEM+. Os resultados obtidos neste trabalho mostraram que a adição de progesterona, estradiol e androstenediona ao meio de cultivo de base (MEM+) para folículos pré-antrais caprinos pode melhorar as taxas de ativação, crescimento e sobrevivência in vitro, principalmente em associação ao FSH. Palavras-chave: folículo pré-antral caprino, cultivo in vitro, progesterona, estradiol, androstenediona, FSH.