Produção de proteases por Aspergillus welwitschiae.
| Ano de defesa: | 2023 |
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Resumo: | As proteases apresentam grande interesse comercial, com aplicações na indústria farmacêutica, de cosméticos, têxtil, alimentícia, como aditivos para detergentes, entre outros. Os fungos do gênero Aspergillus tem grande potencial biotecnológico por serem bons produtores de enzimas em substratos de custo reduzido, como os resíduos agroindustriais. O resíduo de malte é muito abundante e possui quantidade considerável de proteínas, adequado como fonte nutricional para a produção de proteases por microrganismos. A produção de proteases pode ser obtida a partir de linhagens selecionadas de microrganismos associadas aos parâmetros abióticos padronizados. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar parâmetros abióticos para a produção de proteases por Aspergillus welwitschiae UELAs 15.262 a partir do resíduo de malte. Foi avaliado a produção de proteases sob os parâmetros de temperatura, com variação de 28 °C até 42 °C e pH variando de 4,2 até 9,8. As maiores quantidade de proteases produzidas foram 95,95 ± 1,08 U/mL (35 °C, pH 9,8), 94,72 ± 3,27 U/mL (35 °C, pH 7,0), 91,65 ± 4,10 U/mL (30 °C, pH 9,0), 91,05 ± 5,71 U/mL (35 ºC, pH 4,2) e 87,72 ± 1,57 U/mL (30°C, pH 5,0). Dentre as condições que mais produziram proteases, quatro foram selecionadas para avaliar o tempo de produção enzimática. A 35 °C, pH 4,2, a maior quantidade de proteases foi obtida no terceiro dia de fermentação, enquanto nas demais condições a maior quantidade de proteases foi obtida no quarto dia de fermentação. O Extrato Bruto Enzimático (EBE) obtido no terceiro dia de fermentação nas condições 35 °C, pH 4,2 e 9,8, foram submetidos a avaliação de atividade de proteases em meio contendo leite em pó como substrato, a 25 °C e 37 °C. Em ambas as temperaturas as proteases permaneceram ativas por até 24 horas, contudo, a melhor atividade de proteases foi obtida a 37 °C. Esses resultados indicaram que A. welwitschiae UELAs 15.262 produziu proteases em resíduo de malte e que a temperatura tem influência na produção dessas enzimas. A avaliação de parâmetros abióticos associados à linhagem UELAs 15.262 é de grande importância para maior produção de proteases usando resíduos de baixo custo. |
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Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar parâmetros abióticos para a produção de proteases por Aspergillus welwitschiae UELAs 15.262 a partir do resíduo de malte. Foi avaliado a produção de proteases sob os parâmetros de temperatura, com variação de 28 °C até 42 °C e pH variando de 4,2 até 9,8. As maiores quantidade de proteases produzidas foram 95,95 ± 1,08 U/mL (35 °C, pH 9,8), 94,72 ± 3,27 U/mL (35 °C, pH 7,0), 91,65 ± 4,10 U/mL (30 °C, pH 9,0), 91,05 ± 5,71 U/mL (35 ºC, pH 4,2) e 87,72 ± 1,57 U/mL (30°C, pH 5,0). Dentre as condições que mais produziram proteases, quatro foram selecionadas para avaliar o tempo de produção enzimática. A 35 °C, pH 4,2, a maior quantidade de proteases foi obtida no terceiro dia de fermentação, enquanto nas demais condições a maior quantidade de proteases foi obtida no quarto dia de fermentação. O Extrato Bruto Enzimático (EBE) obtido no terceiro dia de fermentação nas condições 35 °C, pH 4,2 e 9,8, foram submetidos a avaliação de atividade de proteases em meio contendo leite em pó como substrato, a 25 °C e 37 °C. Em ambas as temperaturas as proteases permaneceram ativas por até 24 horas, contudo, a melhor atividade de proteases foi obtida a 37 °C. Esses resultados indicaram que A. welwitschiae UELAs 15.262 produziu proteases em resíduo de malte e que a temperatura tem influência na produção dessas enzimas. A avaliação de parâmetros abióticos associados à linhagem UELAs 15.262 é de grande importância para maior produção de proteases usando resíduos de baixo custo.Proteases are a group of enzymes of great commercial interest, with applications in the pharmaceutical, cosmetics, textile, food, as additives for detergents, among others. Fungi of the genus Aspergillus have great biotechnological potential for being good producers of enzymes in low-cost substrates, such as agro-industrial residues. The malt residue is very abundant and has a considerable amount of protein, being suitable as a nutritional source to produce proteases by microorganisms. High production of proteases can be obtained from selected strains of microorganisms associated with suitable abiotic parameters. In this context, the objective of this work was to select abiotic parameters to produce proteases by Aspergillus welwitschiae UELAs 15.262 from brewer’s spent grain. Protease production was evaluated under the temperature parameters, ranging from 28 °C to 42 °C and pH ranging from 4.2 to 9.8. The highest amounts of proteases produced were 95.95 ± 1.08 U/mL (35 °C, pH 9.8), 94.72 ± 3.27 U/mL (35 °C, pH 7.0), 91 .65 ± 4.10 U/mL (30 °C, pH 9.0), 91.05 ± 5.71 U/mL (35 °C, pH 4.2) and 87.72 ± 1.57 U/mL (30°C, pH 5.0). Among the conditions that most produced proteases, four were selected to evaluate the enzyme production time. For the assay, the largest amount of proteases was harvested at 35 °C, pH 4.2 on the third day of fermentation, while in the other conditions the largest amount of proteases was harvested on the fourth day. The Enzyme Crude Extract (EBE) obtained on the third day of fermentation under the conditions 35 °C, pH 4.2 and 9.8, confirmed the evaluation of protease activity in medium containing powdered milk as substrates, at 25 °C and 37°C. At both temperatures the proteases remained active for up to 24 hours. However, the best protease activity was tolerated at 37 °C, demonstrating that higher temperatures positively influenced the activity of these enzymes. These results indicated that A. welwitschiae UELAs 15.262 produced proteases in malt residue and that temperature influences the production of these enzymes. The evaluation of abiotic parameters associated with the UELAs 15.262 strain is of great importance for greater production of proteases using low-cost residues.porCiências Biológicas - Biologia GeralCiências Biológicas - Biologia GeralProteaseBrewer's spent grainSolid state fermentationAspergillus welwitschiaeProteaseResíduo de malteFermentação em estado sólidoAspergillus welwitschiaeProdução de proteases por Aspergillus welwitschiae.Production of proteases by Aspergillus welwitschiae.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisCCB - Departamento de Biologia GeralPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUniversidade Estadual de Londrina - UEL-1-1reponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccessMestrado AcadêmicoCentro de Ciências BiológicasORIGINALCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B.pdfCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B.pdfTrabalho Completo id: 190553application/pdf827673https://repositorio.uel.br/bitstreams/702d5ba9-9696-44fa-8d90-f2025e52086f/downloadcfae03a6ac5323adbe5090c4e6822db5MD51CB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B_TERMO.pdfCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B_TERMO.pdfTermo de Compromissoapplication/pdf474077https://repositorio.uel.br/bitstreams/8cc15600-f68c-431c-9192-d19f9033187f/download0972873fbd25d7c6cd397494490dd9d2MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8555https://repositorio.uel.br/bitstreams/5ce9d6cf-c35a-465e-94bd-04850ed5164c/downloadb0875caec81dd1122312ab77c11250f1MD53TEXTCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B.pdf.txtCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B.pdf.txtExtracted texttext/plain92733https://repositorio.uel.br/bitstreams/24a069f8-7509-4436-a2ae-f4ed55a4e6e4/download22cddd5c19040ba481ae91755a0412abMD54CB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B_TERMO.pdf.txtCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B_TERMO.pdf.txtExtracted texttext/plain1787https://repositorio.uel.br/bitstreams/4bedc218-0806-4c62-a7b3-f8c09b43bb26/download1c001e7cde9fb1ac8c85d27508ea3047MD56THUMBNAILCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B.pdf.jpgCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3396https://repositorio.uel.br/bitstreams/5d002dc7-af98-4b43-bcc1-ab034cf93d50/download51d204a84c98f654877835d9b40e2677MD55CB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B_TERMO.pdf.jpgCB_BTE_Me_2023_Paes_Amanda_B_TERMO.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4585https://repositorio.uel.br/bitstreams/64089bd9-dd4c-4399-8851-de7e9aa4cc37/download56447c8ff966fdb67bdb419046cd4209MD57123456789/186132025-03-12 03:03:34.23embargo2025-06-30oai:repositorio.uel.br:123456789/18613https://repositorio.uel.brBiblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2025-03-12T06:03:34Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)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 |
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