Caracterização molecular de Giardia duodenalis em amostras de fezes de humanos, cães e gatos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2021
Autor(a) principal: Silva, Ana Clécia dos Santos
Orientador(a): Garcia, João Luis
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/17064
Resumo: O protozoário Giardia duodenalis é responsável por causar doença intestinal em diversos hospedeiros em todo o mundo, inclusive seres humanos, e sabe-se que dentro dessa espécie existem diferentes assemblages. O objetivo do presente estudo foi caracterizar molecularmente G. duodenalis de amostras de fezes de humanos, cães e gatos. Foram selecionadas 59 amostras positivas para G. duodenalis nos exames direto ou centrifugo-flutuação em sulfato de zinco, das quais, sete eram de humanos, 34 de cães, e 18 de gatos. Após a extração de DNA, foi realizada uma nested-PCR (n-PCR) baseada no gene 18S onde as amostras que foram amplificadas foram submetidas à n-PCR para os genes β-Giardina, TPI e semi-nested-PCR para o gene GDH . Na PCR para o gene 18S, 49,2% (29/59) das amostras tiveram seu DNA amplificado, das quais, 42,9% (3/7) eram de humanos, 55,9% (19/34) de cães, e 38,9% (7/18) de gatos, e um total de 34,5% (10/29) foram amplificadas pelo gene β- Giardina sendo realizada uma RFLP para este gene. Com o gene GDH obtivemos 27,6% (8/29), e TPI 10,3% (3/29) de amostras amplificadas. As árvores filogenéticas resultaram em clusters separados para os assemblages C, D e F, os quais os foram encontrados: assemblage F em uma amostra de origem humana, duas amostras de cães e em uma amostra de gato, C em duas amostras de cães e D em três amostras de cães. A maior parte dos assemblages encontrados em nosso estudo são considerados específicos das espécies das quais foram isolados, exceto pela presença do assemblage F em uma amostra de origem humana e duas amostras de cães. A realização de estudos mais amplos é necessária para verificar a frequência com que ocorrem essas infecções, fornecendo informações que contribuam para a elaboração medidas de controle e profilaxia da giardíase.
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Após a extração de DNA, foi realizada uma nested-PCR (n-PCR) baseada no gene 18S onde as amostras que foram amplificadas foram submetidas à n-PCR para os genes β-Giardina, TPI e semi-nested-PCR para o gene GDH . Na PCR para o gene 18S, 49,2% (29/59) das amostras tiveram seu DNA amplificado, das quais, 42,9% (3/7) eram de humanos, 55,9% (19/34) de cães, e 38,9% (7/18) de gatos, e um total de 34,5% (10/29) foram amplificadas pelo gene β- Giardina sendo realizada uma RFLP para este gene. Com o gene GDH obtivemos 27,6% (8/29), e TPI 10,3% (3/29) de amostras amplificadas. As árvores filogenéticas resultaram em clusters separados para os assemblages C, D e F, os quais os foram encontrados: assemblage F em uma amostra de origem humana, duas amostras de cães e em uma amostra de gato, C em duas amostras de cães e D em três amostras de cães. A maior parte dos assemblages encontrados em nosso estudo são considerados específicos das espécies das quais foram isolados, exceto pela presença do assemblage F em uma amostra de origem humana e duas amostras de cães. A realização de estudos mais amplos é necessária para verificar a frequência com que ocorrem essas infecções, fornecendo informações que contribuam para a elaboração medidas de controle e profilaxia da giardíase.The protozoan Giardia duodenalis is responsible for causing intestinal disease in several hosts worldwide, including man, and it is known that within this species there are different genetic types. The present study proposal was to molecularly characterize G. duodenalis from feces samples from humans, dogs, and cats. Molecular analyzes were performed on 59 positive samples for G. duodenalis in direct and centrifugal - fluctuation on zinc sulfate tests, from clinical laboratories. After extraction, they were submitted to n-PCR of the 18S gene where the amplified ones were submitted to n- PCR for the β-Giardin, GDH and TPI genes. In the PCR for the 18S gene 49.2% (29/59) were positives, of these, 34.5% were amplified by the β-Giardin gene and an RFLP was performed for this gene. The GDH gene we obtained 27.6%, and TPI 10.3%. The phylogenetic trees resulted in separate clusters for assemblages C, D and F, which were found: assemblage F in a sample of human origin, two samples of dogs and in a sample of cat, C in two samples of dogs and D in three dog samples. Most of the assemblages found in our study are considered specific to the species from which they were isolated, except for the presence of assemblage F in a sample of human origin and two samples of dogs. Larger studies are necessary to verify the frequency with which these infections occur, providing information that contributes to the elaboration of control and prophylaxis measures for giardiasis.porCiências Agrárias - AgronomiaGiardiasisMolecular diagnosisZoonosisGiardiasis - Molecular diagnosisGiardiasis - Dogs and catsGiardia duodenalis - Intestinal diseaseGiardíaseDiagnóstico molecularZoonoseGiardíase - Diagnóstico molecularGiardíase - Cães e gatosGiardia duodenalis - Doença intestinalCaracterização molecular de Giardia duodenalis em amostras de fezes de humanos, cães e gatosMolecular caracterization of Giardia duodenalis in samples of humans, dogs and catsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisCCA - Departamento de AgronomiaPrograma de Pós-Graduação em Ciência AnimalUniversidade Estadual de Londrina - UEL-1-1reponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccessMestrado AcadêmicoCentro de Ciências AgráriasORIGINALCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS.pdfCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS.pdfTexto completo id 190795application/pdf838364https://repositorio.uel.br/bitstreams/09a86a3d-f28f-40d6-bd0b-fc1b53fb1dc8/downloada1d3c801ec3b09a8c38ba557c6ebab88MD51CA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS_TERMO.pdfCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS_TERMO.pdfTermo de autorizaçãoapplication/pdf400187https://repositorio.uel.br/bitstreams/c0625c61-777b-4a26-8cfe-cb7dffc5de05/download04d5db8a802a253976d2baa2e50067ccMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8555https://repositorio.uel.br/bitstreams/49910ec9-15bc-4b9a-9711-a1ca033821c7/downloadb0875caec81dd1122312ab77c11250f1MD53TEXTCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS.pdf.txtCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS.pdf.txtExtracted texttext/plain117738https://repositorio.uel.br/bitstreams/ea05eadd-861c-4a5f-80e4-0ee299485000/downloade22e53a28988016a848077150c813318MD54CA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS_TERMO.pdf.txtCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS_TERMO.pdf.txtExtracted texttext/plain2https://repositorio.uel.br/bitstreams/00ad9274-bbcc-474f-bfe6-f80c6de7d1b8/downloade1c06d85ae7b8b032bef47e42e4c08f9MD56THUMBNAILCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS.pdf.jpgCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3417https://repositorio.uel.br/bitstreams/0257410b-1f8a-422a-83d2-12a5aff23dff/download53632a994baf82c74282ffbc57ea069aMD55CA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS_TERMO.pdf.jpgCA_ANI_Me_2021_Silva_Ana_CS_TERMO.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4760https://repositorio.uel.br/bitstreams/d7bc37c0-7a06-42bf-9c28-b391bf19cf62/download0375c383e364a883b310d84563f2ae5eMD57123456789/170642024-07-24 03:03:29.163open.accessoai:repositorio.uel.br:123456789/17064https://repositorio.uel.brBiblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2024-07-24T06:03:29Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)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