Transformação genética do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae var. acridum (CG423) via Agrobacterium tumefaciens
| Ano de defesa: | 2024 |
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Resumo: | Resumo: Neste trabalho foi descrita a transformação genética da linhagem CG423 de Metarhizium anisopliae var acridum mediada pela bactéria Agrobacterium tumefaciens (AGL-1), sendo também estudada a interação destas células durante o co-cultivo Nos experimentos de transformação foram empregados dois vetores binários distintos, ambos contendo o gene de resistência ao benomil ( ß-tubulina) como marcador de seleção A eficiência de transformação foi de até 53 transformantes por 15 conídios alvos Alta estabilidade mitótica dos transformantes (89-97%) foi demonstrada após cinco transferências sucessivas em meio ão seletivo Transformantes altamente resistentes foram obtidos, os quais apresentaram capacidade de desenvolvimento em concentrações de até 1 µgml-1 de benomil Neste trabalho foram obtidos três possíveis mutantes insercionais com alteração na produção de proteases Esta metodologia poderá representar uma ferramenta útil visando estudos de mutagênese insercional em M anisopliae var acridum |
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Duarte, Rubens Tadeu Delgado984d0883-727d-4cdf-b896-0d9492aabc786ee7fd02-86d4-43a1-a4e2-7eae1b153781Furlaneto, Márcia Cristina [Orientador]Londrina2024-05-01T12:42:54Z2024-05-01T12:42:54Z2005.0021.02.2005https://repositorio.uel.br/handle/123456789/10435Resumo: Neste trabalho foi descrita a transformação genética da linhagem CG423 de Metarhizium anisopliae var acridum mediada pela bactéria Agrobacterium tumefaciens (AGL-1), sendo também estudada a interação destas células durante o co-cultivo Nos experimentos de transformação foram empregados dois vetores binários distintos, ambos contendo o gene de resistência ao benomil ( ß-tubulina) como marcador de seleção A eficiência de transformação foi de até 53 transformantes por 15 conídios alvos Alta estabilidade mitótica dos transformantes (89-97%) foi demonstrada após cinco transferências sucessivas em meio ão seletivo Transformantes altamente resistentes foram obtidos, os quais apresentaram capacidade de desenvolvimento em concentrações de até 1 µgml-1 de benomil Neste trabalho foram obtidos três possíveis mutantes insercionais com alteração na produção de proteases Esta metodologia poderá representar uma ferramenta útil visando estudos de mutagênese insercional em M anisopliae var acridumDissertação (Mestrado em Microbiologia) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em MicrobiologiaAbstract: We report that Agrobacterium tumefaciens strain AGL-1 attaches to and genetically transforms the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae var acridum strain CG423 The Agrobacterium-mediated transformation was applied using two distinct binary vectors carrying a benomyl resistance ( â-tubulin) gene as a selection marker The efficiency of transformation was up to 53 transformants per 15 target conidia High mitotic stability of the transformants (89-97%) was demonstrated after five successive transfers on non-selective media Highly resistant transformants were obtained which showed capacity of growing on increased concentrations of benomyl (up to 1 µg ml-1) We obtained three putative T-DNA-tagged mutants with altered protease production Thus, the described protocol could provide a useful tool to tag genes that may be important for pathogenesis and virulence of this fungusporPragas agrícolasControle biológicoMetarhizium anisopliaeMicrobiologia agrícolaBiological controlAgricultural microbiologyAgricultural pestsTransformação genética do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae var. acridum (CG423) via Agrobacterium tumefaciensinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisMestradoMicrobiologiaCentro de Ciências BiológicasPrograma de Pós-Graduação em Microbiologia-1-1reponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccess108056vtls000110062SIMvtls000110062http://bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls00011006260.00NÃOhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000110062140.pdf123456789/2502 - Mestrado - MicrobiologiaORIGINAL140.pdfapplication/pdf1245480https://repositorio.uel.br/bitstreams/95dd36cc-67f4-49dd-a470-3431a204a609/downloadfc12c11aec99c518c946b8e1ed0bc9d5MD51LICENCElicence.txttext/plain263https://repositorio.uel.br/bitstreams/935bd394-fb4d-4659-b8d3-88d625c6ca26/download753f376dfdbc064b559839be95ac5523MD52TEXT140.pdf.txt140.pdf.txtExtracted texttext/plain181690https://repositorio.uel.br/bitstreams/f00abae0-3039-454a-ab46-acaa88f1753f/download5827fa855ec0a6ca4f7578c493584d56MD53THUMBNAIL140.pdf.jpg140.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3745https://repositorio.uel.br/bitstreams/c173f48a-3ad6-4576-a169-e46b75e81234/download85b43524702440e6daf5500151ddbdceMD54123456789/104352024-07-12 01:19:40.858open.accessoai:repositorio.uel.br:123456789/10435https://repositorio.uel.brBiblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2024-07-12T04:19:40Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)false |
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Resumo: Neste trabalho foi descrita a transformação genética da linhagem CG423 de Metarhizium anisopliae var acridum mediada pela bactéria Agrobacterium tumefaciens (AGL-1), sendo também estudada a interação destas células durante o co-cultivo Nos experimentos de transformação foram empregados dois vetores binários distintos, ambos contendo o gene de resistência ao benomil ( ß-tubulina) como marcador de seleção A eficiência de transformação foi de até 53 transformantes por 15 conídios alvos Alta estabilidade mitótica dos transformantes (89-97%) foi demonstrada após cinco transferências sucessivas em meio ão seletivo Transformantes altamente resistentes foram obtidos, os quais apresentaram capacidade de desenvolvimento em concentrações de até 1 µgml-1 de benomil Neste trabalho foram obtidos três possíveis mutantes insercionais com alteração na produção de proteases Esta metodologia poderá representar uma ferramenta útil visando estudos de mutagênese insercional em M anisopliae var acridum |
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