Clonagem e caracterização de promotores de três isoformas de expansinas de Coffea arabica
| Ano de defesa: | 2024 |
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Resumo: | Resumo: A maturação de frutos do cafeeiro é um processo bioquímico e fisiológico que altera cor, sabor aroma e textura Esses processos envolvem a expressão de diferentes enzimas e proteínas tais como as expansinas, responsáveis por promoverem o relaxamento da parede celular A caracterização do padrão de expressão de expansinas do cafeeiro (CaExp1, 2 e 3) em diferentes tecidos do fruto despertou o interesse no estudo da região promotora desses genes Deste modo este trabalho teve por objetivo clonar as regiões promotoras dos genes, CaExp1, CaExp2 e CaExp3 de C arabica em duas cultivares IAPAR 59 e IAPAR 59 Graúdo; comparar e caracterizar in silico as regiões promotoras assim como validar a função do promotor (ProCaExp2) Os fragmentos dos promotores foram gerados utilizando o kit Genome Walker e ligados ao vetor PCR 21–TOPO As sequencias foram comparadas utilizando os bancos de dados: PLACE, RegSite, MatInspector e PlantCare A análise in silico dos promotores revelou a presença de motivos de resposta a luminosidade nos quatro promotores Também foi observada a presença de motivos para fitorreguladores como etileno e auxina no ProCaExp2 e ABA, Brassinosteróides e GA nos ProCaExp1 e ProCaExp3 O ProCaExp2 foi fusionado ao gene GUSA e inserido via A tumefaciens no tomateiro A análise histomíquica do gene GUSA foi realizada em diferentes tecidos das plantas transformadas e controles não transformados A análise da expressão do gene GUSA demonstrou que o ProCaExp2 direciona a expressão do gene para o endosperma antes do início da maturação e para o endosperma e polpa durante a maturação do fruto A disponibilidade de promotores específicos é uma importante ferramenta biotecnológica para direcionar a expressão de genes para os frutos sem interferir em outros processos metabólicos das plantas |
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and ABA, brassinosteroids and GA in ProCaExp1 and ProCaExp3 The histochemical analysis of the GUSA gene was accomplished in different stages of development in transformed and non transformed plants The expression of gene GUSA demonstrated that the ProCaExp2 drives the gene expression to the endosperm before the beginning of maturation and for the endosperm and pericarp during maturation of the fruit The availability of specific promoters is an important biotechnological tool to direct the expression of genes for fruit without interfering with other metabolic processes of plantsporCaféMelhoramento genéticoGenéticaExpressãoCaféBreedingExpressionRipeningMolecular cloningPlants - CoffeeGenesClonagem e caracterização de promotores de três isoformas de expansinas de Coffea arabicainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisMestradoGenética e Biologia MolecularCentro de Ciências BiológicasPrograma de Pós-Graduação em Genética e Biologia Molecular-1600reponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccess157820vtls000176356SIMvtls000176356http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls00017635664.00SIMhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls0001763563082.pdf123456789/2402 - Mestrado - Genética e Biologia MolecularORIGINAL3082.pdfapplication/pdf2003652https://repositorio.uel.br/bitstreams/ddf5ae63-e01d-4b5c-93e8-29df6aeaa2cb/download963189dec7a166e918d817896eec39fcMD51LICENCElicence.txttext/plain263https://repositorio.uel.br/bitstreams/1f7fdd0c-5e8b-43c4-bab3-fe190c528169/download753f376dfdbc064b559839be95ac5523MD52TEXT3082.pdf.txt3082.pdf.txtExtracted texttext/plain187626https://repositorio.uel.br/bitstreams/ed09b30b-5c2d-4cf8-a003-37dcca2c00a6/download02756f4c95f8ec06d5b6cccd4b015f84MD53THUMBNAIL3082.pdf.jpg3082.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3590https://repositorio.uel.br/bitstreams/26fd8eaf-0e11-4c5e-9035-abce98b8fe8a/downloadcab260a3079e553a2a0246b6f54e3d56MD54123456789/135302025-04-03 16:18:42.215open.accessoai:repositorio.uel.br:123456789/13530https://repositorio.uel.brBiblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2025-04-03T19:18:42Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)false |
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Resumo: A maturação de frutos do cafeeiro é um processo bioquímico e fisiológico que altera cor, sabor aroma e textura Esses processos envolvem a expressão de diferentes enzimas e proteínas tais como as expansinas, responsáveis por promoverem o relaxamento da parede celular A caracterização do padrão de expressão de expansinas do cafeeiro (CaExp1, 2 e 3) em diferentes tecidos do fruto despertou o interesse no estudo da região promotora desses genes Deste modo este trabalho teve por objetivo clonar as regiões promotoras dos genes, CaExp1, CaExp2 e CaExp3 de C arabica em duas cultivares IAPAR 59 e IAPAR 59 Graúdo; comparar e caracterizar in silico as regiões promotoras assim como validar a função do promotor (ProCaExp2) Os fragmentos dos promotores foram gerados utilizando o kit Genome Walker e ligados ao vetor PCR 21–TOPO As sequencias foram comparadas utilizando os bancos de dados: PLACE, RegSite, MatInspector e PlantCare A análise in silico dos promotores revelou a presença de motivos de resposta a luminosidade nos quatro promotores Também foi observada a presença de motivos para fitorreguladores como etileno e auxina no ProCaExp2 e ABA, Brassinosteróides e GA nos ProCaExp1 e ProCaExp3 O ProCaExp2 foi fusionado ao gene GUSA e inserido via A tumefaciens no tomateiro A análise histomíquica do gene GUSA foi realizada em diferentes tecidos das plantas transformadas e controles não transformados A análise da expressão do gene GUSA demonstrou que o ProCaExp2 direciona a expressão do gene para o endosperma antes do início da maturação e para o endosperma e polpa durante a maturação do fruto A disponibilidade de promotores específicos é uma importante ferramenta biotecnológica para direcionar a expressão de genes para os frutos sem interferir em outros processos metabólicos das plantas |
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