Avaliação do papel do sistema endocanabinoide na morte celular da retina de embriões de galinha (E7): efeitos do aumento de 2-araquidonoilglicerol induzido pela inibição da MAGL

• Ano de defesa: 2026
• Autor(a) principal: Bockmann, Eduardo Cosendey
• Orientador(a): Calaza, Karin da Costa
• Banca de defesa: Pandolfo, Pablo, França, Guilherme Rapozeiro, Portugal, Camila Cabral, Frantz, Eliete Dalla Corte
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/43225
• topic: retina, endocanabinoides, morte celular, 2-AG, CB1, CB2, desenvolvimento neural; Retina; Endocanabinoides; Morte celular; 2-AG; CB1; CB2; Desenvolvimento neural; Retina; Endocanabinoides; Morte celular; Receptor CB1 de canabinoide; Receptor CB2 de canabinoide; Retina; Endocannabinoids; Cell death; 2-AG; CB1; CB2; Neural development

O sistema endocanabinoide é um importante modulador da fisiologia do sistema nervoso central, participando de processos como diferenciação, migração celular, sinaptogênese e morte celular programada. Embora seu papel em tecidos adultos esteja relativamente bem caracterizado, seus efeitos durante o desenvolvimento neural permanecem pouco compreendidos, particularmente na retina, um modelo clássico para o estudo da neurogênese e da morte celular fisiológica. Neste trabalho, investigou-se o impacto da modulação dos endocanabinoides anandamida e 2- araquidonoilglicerol (2-AG) sobre a viabilidade celular em culturas primárias de retina de embriões de galinha no estágio E7. Para isso, as culturas foram tratadas com inibidores seletivos das principais enzimas responsáveis pela degradação dos endocanabinoides, URB597 (hidrolase de amidas de ácidos graxos – FAAH) e URB602 (monoacilglicerol lipase – MAGL), sendo avaliadas após 24 horas de tratamento e dois dias de cultivo (E7C2). A viabilidade celular foi analisada por meio do ensaio de redução do sal tetrazólio (MTT) e por ensaio de viabilidade celular com marcadores fluorescentes, enquanto alterações em proteínas associadas à morte celular foram investigadas por Western blot. Os resultados demonstraram que a inibição da MAGL pelo URB602, mas não da FAAH pelo URB597, promoveu uma redução significativa da viabilidade celular, indicando um papel específico do aumento de 2-AG na indução de morte celular na retina embrionária. O bloqueio isolado dos receptores canabinoides clássicos CB1 e CB2, bem como de receptores não canônicos, como TRPV1, TRPA1 e PPARγ, não foi suficiente para prevenir esse efeito. Entretanto, o uso do agonista inverso do receptor CB2 (SR144528) atenuou de forma significativa a morte celular induzida pelo aumento de 2-AG. Além disso, a depleção de colesterol de membrana reduziu os efeitos citotóxicos observados, sugerindo a participação de microdomínios lipídicos na organização funcional dessa via de sinalização. Em conjunto, estes achados indicam que o aumento de 2-AG desencadeia morte celular na retina embrionária por mecanismos dependentes da atividade do receptor CB2 e da organização lipídica da membrana plasmática. Este trabalho amplia a compreensão do papel do sistema endocanabinoide durante o desenvolvimento da retina e contribui para o entendimento dos possíveis efeitos da modulação endocanabinoide em períodos críticos do neurodesenvolvimento