Modelo murino de inflamação intestinal crônica: Avaliação quantitativa da dinâmica da microbiota intestinal

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2007
Autor(a) principal: Bisso, Mônica Lourenço
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Programa de Pós-graduação em Patologia
Patologia
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/17877
Resumo: Aim: Evaluate and characterize the possible differences in the gut microbiota of normal and immune mice submitted to an antigen specific gut inflammation, and its response in the GALT, as well as the maintenance or disruption of homeostasis. Methods: Eight-week-old male C57BL/6 mice were divided in groups 1 and 2, where group 2 received chemotherapy in the drinking water during the challenge diet period (4 weeks). Groups 1 and 2 were subdivided in four subgroups (CR, IR, CA e IA): IA was inoculated with peanut protein extract (immunize group), and received peanut during the challenge diet; group IR was inoculated with peanut protein extract, but continuous feeding on commercial chow; Group CR was sham immunized with saline (control group) and was only fed on commercial chow; and finally group CA was sham immunized with saline, and received peanut during the challenge diet period. One pellet of stool sample was collected from each mouse, weekly during of challenge diet for quantitative identification of colony-forming units (CFUs) of aerobic microorganisms (enterococos, coliformes and mesophiles) of the microbiota. After 28 days, all animals were sacrificed, to determine the extent of macro and microscopic inflammatory process of the gut. Results: We observed that as of the third week of chemotherapy the CFUs present significant reduction compared to control groups and a significant modification of the gut microbiota kinetics was also observed. Animals of both IA groups presented significant alterations of the histological architecture with more severe alterations in the group that drank chemotherapy. Conclusion: in our model the use of chemotherapy did not ameliorate gut alterations or clinical signs in animals submitted to an antigen specific chronic inflammation of the gut.
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Groups 1 and 2 were subdivided in four subgroups (CR, IR, CA e IA): IA was inoculated with peanut protein extract (immunize group), and received peanut during the challenge diet; group IR was inoculated with peanut protein extract, but continuous feeding on commercial chow; Group CR was sham immunized with saline (control group) and was only fed on commercial chow; and finally group CA was sham immunized with saline, and received peanut during the challenge diet period. One pellet of stool sample was collected from each mouse, weekly during of challenge diet for quantitative identification of colony-forming units (CFUs) of aerobic microorganisms (enterococos, coliformes and mesophiles) of the microbiota. After 28 days, all animals were sacrificed, to determine the extent of macro and microscopic inflammatory process of the gut. Results: We observed that as of the third week of chemotherapy the CFUs present significant reduction compared to control groups and a significant modification of the gut microbiota kinetics was also observed. Animals of both IA groups presented significant alterations of the histological architecture with more severe alterations in the group that drank chemotherapy. Conclusion: in our model the use of chemotherapy did not ameliorate gut alterations or clinical signs in animals submitted to an antigen specific chronic inflammation of the gut.INTRODUÇÃO: O trato gastrintestinal é um complexo ecossistema constituído pelo tubo digestivo propriamente dito, órgãos e tecidos com função imunológica e por uma microbiota residente, estabelecendo um sistema de controle, proteção e estímulos tróficos importantes para a ontogenia e homeostasia do organismo. Modificações significativas nessas interações são capazes de exercer influência mútua na microbiota e na mucosa intestinal, induzindo a perda da homeostasia e o desenvolvimento de estados inflamatórios.OBJETIVO: Avaliar as possíveis diferenças no intestino delgado entre camundongos normais e experimentais submetidos a uma resposta inflamatória intestinal crônica antígeno específico, baseados nas alterações quantitativas da microbiota. MATERIAIS E MÉTODOS: utilizamos camundongos machos, adultos (2 meses) da linhagem isogênica C57BL/6, criados e mantidos, no Núcleo de Animais de Laboratório Instituto de Biologia da UFF. Esses animais foram divididos em grupo 1 e 2 (média 24 animais/grupo), cuja diferença de tratamento ocorre apenas na última fase experimental, quando o grupo 1 recebeu água de beber, concomitante a dieta desafio, enquanto o grupo 2 recebeu o quimioterápico - sulfametoxazol e trimetoprima - diluído na água de beber. Os grupos 1 e 2 foram subdivididos em quatro subgrupos (CR, IR, CA e IA). Os subgrupos CA e CR foram inoculados com salina e os subgrupos IA e IR foram inoculados com extrato de amendoim. Após as inoculações os subgrupos, CA e IA, foram submetidos à dieta desafio, exclusiva de amendoim, os subgrupos CR e IR continuaram a receber a ração, durante quatro semanas. Após esse período os grupos 1 e 2 foram submetidos à eutanásia. Os níveis de IgG total foram avaliados através do teste de ELISA e a análise histomorfométrica foi realizada no duodeno. A análise microbiológica quantitativa foi realizada com amostras de pellets e conteúdo cecal. Foram pesquisadas as bactérias aeróbias: enterococos, coliformes e mesófilos totais. Os resultados foram expressos em unidades formadoras de colônias por grama de amostra (ufc/g). RESULTADOS: Os animais dos subgrupos IA e IR apresentaram níveis de IgG antiamendoim significativamente mais elevados que os dos gupos CA e CR (p<0.001). A introdução do amendoim na dieta dos animais dos subgrupos IA induziu alterações compatíveis com inflamação crônica sem no entanto alterar a arquitetura dos sub grupos CA. Os subgrupos CR e IR que não comeram amendoim também não apresentaram alterações histomorfométricas. Estes resultados são válidos tanto para os animais que receberam quimioterápico na água de beber, como seus controles. Com relação a microbiota observamos uma diminuíção das UFC de mesófilos totais, enterococos e coliformes no subgrupo IA, comparando com seu controle (CA) e os grupos CR e IR sem oferta de quimioterápico. Os grupos que receberam quimioterápico apresentaram uma alteração da cinética da microbiota mais acentuada, quando comparados com seus pares que não consumiram o fármaco. CONCLUSÃO: podemos dizer que a partir do nosso modelo experimental o quimioterápico interfere no curso da resposta inflamatória intestinal crônica sem trazer melhoras para os animais inflamados.Programa de Pós-graduação em PatologiaPatologiaTeixeira, Gerlinde Agate Platais BrasilCPF:09867432122http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4788104A6Tórtora, João Carlos de OliveiraCPF:11355726922http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783868A2Pedruzzi, Monique de M. BittetiCPF:01352944422http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782654H9Verícimo, Maurício AfonsoCPF:45283869768http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4701891P4Rosado, Alexandre SoaresCPF:00985271322http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4784957A6Dias, Eliane PedraCPF:77790588753http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786983U3&dataRevisao=nullBisso, Mônica Lourenço2021-03-10T20:42:59Z2008-05-272021-03-10T20:42:59Z2007-12-30info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://app.uff.br/riuff/handle/1/17877porCC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2021-03-10T20:42:59Zoai:app.uff.br:1/17877Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202021-03-10T20:42:59Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
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