Adição do fator de crescimento semelhante à insulina-I ou melatonina ao meio de maturação de oócitos bovinos submetidos ao choque térmico

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2015
Autor(a) principal: Ascari, Ivan Júnior
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
Programa de Pós-Graduação em Zootecnia
UFLA
brasil
Departamento de Zootecnia
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/11113
Resumo: High ambient temperatures can cause reduced reproductive rates. In this context, IGF-I and melatonin can act as thermo-protector, reducing oxidative stress during the in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes subjected to heat shock. The aims of this study were to evaluate the effects of IGF-I or melatonin added to the IVM medium of bovine oocytes, subjected to heat shock, on the quality and competence of oocyte development and the quality of the embryos. Follicles of three to eight millimeters in diameter were aspirated from ovaries collected at abattoirs of predominantly crossbred cows (Holstein-Gyr). We selected the cumulus-oocyte complexes that presented homogeneous cytoplasm with at least three layers of cells. Two experiments were performed, in which the addition of IGF-I (0, 25 e 100 ng/mL) or melatonin (0, 10-6 e 10-4 M) to the IVM medium, under two incubation conditions, were evaluated. The incubation conditions were conventional, with 24 hours at 38.5°C, or heat shock with 12 hours at 41ºC followed by 12 hours at 38.5°C. There was no interaction between incubation condition and IGF-I or melatonin in any analyze (P > 0.05). In Experiment I, the addition of IGF-I increased mitochondrial activity (P < 0.01) and the production of reactive oxygen species - ROS (P < 0.01), while reducing blastocyst rate in the seven and eight days (P < 0.01), as well as apoptotic cells rate of inner cell mass (P < 0.01). Heat shock increased the percentage of TUNEL-positive oocytes (P < 0.01) and the production of ROS (P < 0.01), and reduced mitochondrial activity (P < 0.01). In Experiment II, the addition of melatonin reduced the production of ROS (P < 0.01) in the oocytes, while heat shock increased (P < 0.01) its production. Mitochondrial activity was not affected (P > 0.05) by melatonin, but was reduced by heat shock. Heat shock also reduced the percentage of oocytes that have progressed to metaphase II stage (P < 0.01) and blastocyst rate in seven (P = 0.02) and eight (P < 0.01) days. In conclusion, the supplementation of IGF-I or melatonin to IVM medium improves the quality of the embryos produced. One of the most important results of IGF-I was the increased mitochondrial activity, whereas, for melatonin, it was the reduction of oxidative stress in the oocyte.
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We selected the cumulus-oocyte complexes that presented homogeneous cytoplasm with at least three layers of cells. Two experiments were performed, in which the addition of IGF-I (0, 25 e 100 ng/mL) or melatonin (0, 10-6 e 10-4 M) to the IVM medium, under two incubation conditions, were evaluated. The incubation conditions were conventional, with 24 hours at 38.5°C, or heat shock with 12 hours at 41ºC followed by 12 hours at 38.5°C. There was no interaction between incubation condition and IGF-I or melatonin in any analyze (P > 0.05). In Experiment I, the addition of IGF-I increased mitochondrial activity (P < 0.01) and the production of reactive oxygen species - ROS (P < 0.01), while reducing blastocyst rate in the seven and eight days (P < 0.01), as well as apoptotic cells rate of inner cell mass (P < 0.01). Heat shock increased the percentage of TUNEL-positive oocytes (P < 0.01) and the production of ROS (P < 0.01), and reduced mitochondrial activity (P < 0.01). In Experiment II, the addition of melatonin reduced the production of ROS (P < 0.01) in the oocytes, while heat shock increased (P < 0.01) its production. Mitochondrial activity was not affected (P > 0.05) by melatonin, but was reduced by heat shock. Heat shock also reduced the percentage of oocytes that have progressed to metaphase II stage (P < 0.01) and blastocyst rate in seven (P = 0.02) and eight (P < 0.01) days. In conclusion, the supplementation of IGF-I or melatonin to IVM medium improves the quality of the embryos produced. One of the most important results of IGF-I was the increased mitochondrial activity, whereas, for melatonin, it was the reduction of oxidative stress in the oocyte.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)Temperaturas ambientais elevadas podem levar a redução nos índices reprodutivos. Nesse contexto, o IGF-I e a melatonina podem atuar de forma termoprotetora e na redução do estresse oxidativo durante a maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos submetidos ao choque térmico. Objetivou-se, com a realização deste estudo, avaliar o efeito do IGF-I ou da melatonina adicionados ao meio MIV de oócitos bovinos submetidos ao choque térmico, sobre a qualidade e a competência de desenvolvimento de oócitos e a qualidade dos embriões.. Folículos de três a oito milímetros de diâmetro foram puncionados de ovários de vacas predominantemente mestiças (Holandês-Gir) coletados em abatedouro. Foram selecionados os complexos cumulus-oócitos que apresentaram citoplasma homogêneo com, no mínimo, três camadas de células. Foram realizados dois experimentos, em que adição de IGF-I (0, 25 e 100 ng/mL) ou de melatonina (0, 10-6 e 10-4 M) ao meio MIV e duas condições de incubação foram avaliadas. As condições de incubação foram a convencional: 24 horas a 38,5ºC ou choque térmico: 12 horas a 41ºC seguido por 12 horas a 38,5ºC. Não houve interação entre condição de incubação e IGF-I ou melatonina em todas as análises (P > 0,05). No Experimento I, a adição de IGF-I aumentou a atividade mitocondrial (P < 0,01) e a produção de espécies reativas de oxigênio - EROS (P < 0,01), enquanto reduziu a taxa de blastocistos nos dias sete e oito (P < 0,01) e a taxa de células apoptóticas da MCI (P < 0,01). O choque térmico aumentou a porcentagem de oócitos TUNEL-positivos (P < 0,01) e a produção de EROS (P < 0,01) e reduziu a atividade mitocondrial (P < 0,01). No Experimento II, a adição de melatonina reduziu a produção de EROS (P < 0,01) nos oócitos, enquanto o choque térmico aumentou (P < 0,01). A atividade mitocondrial não foi afetada (P > 0,05) pela melatonina, porém foi reduzida pelo choque térmico. O choque térmico reduziu a porcentagem de oócitos que progrediram ao estágio de metáfase II (P < 0,01) e a taxa de blastocistos nos dias sete (P = 0,02) e oito (P < 0,01). Em conclusão, a suplementação de IGF-I ou melatonina ao meio MIV possibilita a melhoria da qualidade dos embriões produzidos. Um dos resultados mais relevantes do IGF-I foi o aumento da atividade mitocondrial, enquanto que da melatonina foi a redução do estresse oxidativo no oócito.Universidade Federal de LavrasPrograma de Pós-Graduação em ZootecniaUFLAbrasilDepartamento de ZootecniaAlves, Nadja GomesCamargo, Luiz Sérgio de AlmeidaLima, Renato Ribeiro deZangeronimo, Márcio GilbertoOberlender, GuilhermeAscari, Ivan Júnior2016-04-29T17:04:34Z2016-04-29T17:04:34Z2016-04-292015-12-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfASCARI, I. J. Adição do fator de crescimento semelhante à insulina-I ou melatonina ao meio de maturação de oócitos bovinos submetidos ao choque térmico. 2016. 119 p. Tese (Doutorado em Zootecnia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2016.http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/11113porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLA2016-04-29T17:04:51Zoai:localhost:1/11113Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufla.br/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2016-04-29T17:04:51Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)false
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