Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2016
Autor(a) principal: Betarelli, Rafael Pedroso lattes
Orientador(a): Zangeronimo, Márcio Gilberto
Banca de defesa: Murgas, Luis David Solis, Gil, Joan Enric Rodrigues, Sales, José Nélio de Sousa, Sousa, Raimundo Vicente de
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-graduação em Ciências Veterinárias
Departamento: Departamento de Medicina Veterinária
País: brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/11753
Resumo: Um estudo foi realizado objetivando-se avaliar os efeitos da glutationa reduzida (GSH) sobre a função espermática, durante a capacitação e posterior indução da reação acrossômica in vitro, em sêmen suíno refrigerado. Isso foi feito por meio da avaliação de vários marcadores de capacitação in vitro e outros parâmetros globais de qualidade de sêmen, tais como viabilidade, motilidade total, exocitose acrossomal induzida por progesterona, fragmentação de DNA, níveis de desordens lipídicas na membrana espermática, espécies reativas de oxigênio (ERO), resíduos de cisteínas livres em extratos de cabeça e cauda espermáticas e fosforilação prot eica de resíduos de tirosina. Um total de 62 ejaculados, provenientes de 35 reprodutores suínos saudáveis Pietrain, entre 2 e 3 anos de idade, foram usados nas diferentes análises deste trabalho. A adição de GSH, no meio de capacitação (CM), impediu a maioria das alterações concomitantes à capacitação. Além disso, o GSH provocou uma queda rápida e intensa da motilidade total (P<0,05), a qual foi mantida dur ante todo o período de incubação. Apesar destes resultados, o GSH não afetou o início da exocitose acrossomal in vitro induzida pela progesterona (IVAE) observada após 4h de incubação no CM. Os resultados mostraram que a capacitação in vitro de sêmen suíno está relacionada com um aumento significante tanto da quebra total das pontes dissulfeto quanto dos níveis de ERO intracellular. Esses fenômenos podem desempenhar um papel, na obtenção do estado capacitante da célula espermática, embora eles não sejam fundamentais na realização da posterior IVAE. Finalmente, a motilidade dos espermatozoides parece ser , parcialmente, controlada por mecanismos iônicos e de oxidação-redução, tal como indicou a incubação com GSH em condições separadas. Portanto es te estudo demonstra a existência de vias paralelas e separadas dentro dos eventos da capacitação espermática controladas pelo GSH e, assim, contribui para uma melhor compreensão desses fenômenos e traz um novo direcionamento para trabalhos futuros dentro dessa linha de pesquisa.
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Isso foi feito por meio da avaliação de vários marcadores de capacitação in vitro e outros parâmetros globais de qualidade de sêmen, tais como viabilidade, motilidade total, exocitose acrossomal induzida por progesterona, fragmentação de DNA, níveis de desordens lipídicas na membrana espermática, espécies reativas de oxigênio (ERO), resíduos de cisteínas livres em extratos de cabeça e cauda espermáticas e fosforilação prot eica de resíduos de tirosina. Um total de 62 ejaculados, provenientes de 35 reprodutores suínos saudáveis Pietrain, entre 2 e 3 anos de idade, foram usados nas diferentes análises deste trabalho. A adição de GSH, no meio de capacitação (CM), impediu a maioria das alterações concomitantes à capacitação. Além disso, o GSH provocou uma queda rápida e intensa da motilidade total (P<0,05), a qual foi mantida dur ante todo o período de incubação. Apesar destes resultados, o GSH não afetou o início da exocitose acrossomal in vitro induzida pela progesterona (IVAE) observada após 4h de incubação no CM. Os resultados mostraram que a capacitação in vitro de sêmen suíno está relacionada com um aumento significante tanto da quebra total das pontes dissulfeto quanto dos níveis de ERO intracellular. Esses fenômenos podem desempenhar um papel, na obtenção do estado capacitante da célula espermática, embora eles não sejam fundamentais na realização da posterior IVAE. Finalmente, a motilidade dos espermatozoides parece ser , parcialmente, controlada por mecanismos iônicos e de oxidação-redução, tal como indicou a incubação com GSH em condições separadas. Portanto es te estudo demonstra a existência de vias paralelas e separadas dentro dos eventos da capacitação espermática controladas pelo GSH e, assim, contribui para uma melhor compreensão desses fenômenos e traz um novo direcionamento para trabalhos futuros dentro dessa linha de pesquisa.A study was conducted with the objective of evaluating the effects of reduced glutathione (GSH) over spermatic function during capacitation and posterior induction of acrosome reaction in vitro, in refrigerated pig semen. This was done by evaluating many in vitro capacitation markers and other global parameters of semen quality, such as feasibility, total motility, acrosome exocytosis induced by progesterone, DNA fragmentation, levels of lipid disorders in the spermatic membrane, reactive oxygen species (ROS), free cysteine residue in sperm head and tail extracts and protein phosphorylation of tyrosine residue. A total of 62 ejaculates derived from 35 healthy breeding Pietrain pigs, between 2 and 3 years of age, were used in the different analyses conducted in this work. The addition of GHS in the capacitation medium (CM) prevented most changes consequent to capacitation. In addition, the GSH caused quick fall and intense total motility (P < 0.05), which was maintained during the entire incubation period. Despite these results, the GH did not affect the beginning of in vitro acrosome exocytosis induced by progesterone (IVAE), observed after four hours of CM incubation. The results showed that in vitro pig semen capacitation is related to the significant increase of both total break of disulfide bonds and the levels of intracellular ROS. These phenomena can fulfill a role in obtaining the capacitating state of the spermatic cell, although they are not fundamental in performing the posterior IVAE. Finally, spermatozoid motility seems to be partially controlled by ionic and oxidation-reduction mechanisms, as was indicated by the GSH incubation in separate conditions. Therefore, this study demonstrates the existence of parallel and separated paths within the spermatic capacitation events controlled by the GSH, thus contributing for the better understanding of these phenomena, and brings a new direction for future works in this line of research.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Universidade Federal de LavrasPrograma de Pós-graduação em Ciências VeterináriasUFLAbrasilDepartamento de Medicina VeterináriaReprodução AnimalSuíno – EspermatozóidesSuíno – FecundidadeGlutationa reduzida (GSH)Cultura in vitroSwine – SpermatozoaSwine – FertilityReduced glutathione (GSH)In vitro cultureEfeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigeradosEffects of reduced glutathione on in vitro capacitation and subsequent acrosome reaction in cooled boar spermatozoainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisZangeronimo, Márcio GilbertoMurgas, Luis David SolisGil, Joan Enric RodriguesSales, José Nélio de SousaSousa, Raimundo Vicente dehttp://lattes.cnpq.br/8675150821866102Betarelli, Rafael Pedrosoinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLAORIGINALTESE_Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados.pdfTESE_Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados.pdfapplication/pdf1604781https://repositorio.ufla.br/bitstreams/106e7c79-3ef7-4a33-9076-355bc184ed7f/download77f0238bcc0a385902349b89a7fb224aMD51trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8953https://repositorio.ufla.br/bitstreams/4c6d4800-91cb-425b-882f-1dec6675bcf2/download760884c1e72224de569e74f79eb87ce3MD52falseAnonymousREADTEXTTESE_Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados.pdf.txtTESE_Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados.pdf.txtExtracted texttext/plain101801https://repositorio.ufla.br/bitstreams/d12d7e76-7ac4-4138-88ec-dfce0f69b162/downloada1f67cf400a4dd42690a118816a5e8cfMD53falseAnonymousREADTHUMBNAILTESE_Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados.pdf.jpgTESE_Efeitos da glutationa reduzida sobre os processos de capacitação e reação acrossômica in vitro em espermatozoides suínos refrigerados.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3214https://repositorio.ufla.br/bitstreams/6aeb6b8e-f391-4621-8603-4a1a6a35a136/download373a77914a9d4ce7a4baed790da63f67MD54falseAnonymousREAD1/117532025-10-06 12:11:39.419open.accessoai:repositorio.ufla.br:1/11753https://repositorio.ufla.brRepositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufla.br/server/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2025-10-06T15:11:39Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)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