Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda: extração de folhas de mamona, purificação, identificação e atividade biológica

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2016
Autor(a) principal: Ramos, Vinicius de Oliveira
Orientador(a): Saczk, Adelir Aparecida
Banca de defesa: Alves, Dejane Santos, Freitas, Matheus Puggina de, Silva, Rogério Antônio, Marcussi, Silvana
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Agroquímica
Departamento: Departamento de Química
País: brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/12021
Resumo: Atuando em conjunto com o desenvolvimento tecnológico que aumenta a produtividade nas lavouras, estão os estudos para controle dos organismos daninhos. Dentre todos, os métodos tradicionais que se utilizam de agroquímicos para controlar suas populações vem perdendo efeito no controle dos insetos herbívoros. Isso, em grande parte, se deve ao uso indiscriminado e sem acompanhamento técnico adequado. Estes fatores, associados à prática de monocultura, têm selecionado populações de insetos resistentes aos defensivos agrícolas. A busca por novos métodos de controle que não afetam fisiologicamente a população de insetos benéficos e com menor impacto ambiental se faz necessária neste contexto. Neste trabalho, foi realizada a investigação de inibidores de tripsina que atuam reduzindo a eficiência na absorção de aminoácidos por lagartas da espécie Spodoptera frugiperda (Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae). Para tanto, foram desenvolvidos métodos de otimização quimiométricas para a extração, purificação, identificação e caracterização estrutural da molécula inibidora e avaliação de como o inseto é afetado durante seu desenvolvimento além do estudo da forma como este composto atua especificamente na tripsina da lagarta-do-cartucho. A extração do inibidor foi otimizada através de quimiometria, nas condições de 1 g farinha de folhas de mamona (FFM) em 48,6 mL de etanol 71,7%, extraído por 60 minutos em banho ultrassônico, a 40 °C, com uma reextração nas mesmas condições produziu extrato com atividade antitríptica de 94.837,14 mUTI g-1. O extrato de FFM foi purificado em HPLC preparativo e dois compostos com inibição de tripsina aparente. Estes dois compostos foram identificados como adenosina e ricinina, contudo após purificação, apenas ricinina causou inibição em tripsina in vitro com 103,21 mUTI mg-1. O extrato foi adicionado à dieta e oferecido às lagartas, resultando em redução da digestão, uma vez que todos os tratamentos apresentaram maior concentração de proteínas nas fezes quando comparados ao controle.
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spelling 2016-11-29T17:29:41Z2016-11-29T17:29:41Z20162016-09-16RAMOS, V. de O. Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda: extração de folhas de mamona, purificação, identificação e atividade biológica. 2016. 111 p. Tese (Doutorado em Agroquímica)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2016.https://repositorio.ufla.br/handle/1/12021Atuando em conjunto com o desenvolvimento tecnológico que aumenta a produtividade nas lavouras, estão os estudos para controle dos organismos daninhos. Dentre todos, os métodos tradicionais que se utilizam de agroquímicos para controlar suas populações vem perdendo efeito no controle dos insetos herbívoros. Isso, em grande parte, se deve ao uso indiscriminado e sem acompanhamento técnico adequado. Estes fatores, associados à prática de monocultura, têm selecionado populações de insetos resistentes aos defensivos agrícolas. A busca por novos métodos de controle que não afetam fisiologicamente a população de insetos benéficos e com menor impacto ambiental se faz necessária neste contexto. Neste trabalho, foi realizada a investigação de inibidores de tripsina que atuam reduzindo a eficiência na absorção de aminoácidos por lagartas da espécie Spodoptera frugiperda (Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae). Para tanto, foram desenvolvidos métodos de otimização quimiométricas para a extração, purificação, identificação e caracterização estrutural da molécula inibidora e avaliação de como o inseto é afetado durante seu desenvolvimento além do estudo da forma como este composto atua especificamente na tripsina da lagarta-do-cartucho. A extração do inibidor foi otimizada através de quimiometria, nas condições de 1 g farinha de folhas de mamona (FFM) em 48,6 mL de etanol 71,7%, extraído por 60 minutos em banho ultrassônico, a 40 °C, com uma reextração nas mesmas condições produziu extrato com atividade antitríptica de 94.837,14 mUTI g-1. O extrato de FFM foi purificado em HPLC preparativo e dois compostos com inibição de tripsina aparente. Estes dois compostos foram identificados como adenosina e ricinina, contudo após purificação, apenas ricinina causou inibição em tripsina in vitro com 103,21 mUTI mg-1. O extrato foi adicionado à dieta e oferecido às lagartas, resultando em redução da digestão, uma vez que todos os tratamentos apresentaram maior concentração de proteínas nas fezes quando comparados ao controle.Acting in collaboration with the technological development, which increases crop productivity, are the studies on control of harmful organisms. Among all methods used, the traditional methods that employ agrochemicals to control its populations have been losing effect in the control of herbivore insects. This is due to, in great part, the indiscriminate and without adequate technical monitoring use. These factors, associated with the practice of monoculture, has selected populations of insects resistant to agricultural pesticides. The search for new control methods that do not physiologically affect populations of beneficial insects and present lower environmental impact is necessary in this context. In this work, we conducted an investigation of trypsin inhibitors that act reducing the absorption efficiency of amino acids by caterpillars of the species Spodoptera frugiperda (Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae). For this, chemometric optimization methods were developed for the extraction, purification, identification and structural characterization of the inhibitory molecule, and evaluation of how the insect is affected during its development, in addition of studying the from in which this compound acts, specifically, over the trypsin of the armyworm. The extraction of the inhibitor was optimized by means of chemometrics, un der conditions of 1 g of castor bean leaf meal (CBLM) in 48.6 mL of ethanol 71.7%, extracted by 60 min of ultrasonic bath at 40oC, with re-extraction in the same conditions, which produced extract with anti-trypsin activity of 94,837.14 mUTI g-1. The CBLM extract was purified in prep HPLC, and two compounds with apparent trypsin inhibition, identified as adenosine and ricinine. However, after purification, only ricinine inhibited trypsin in vitro, with 103.21 mUTI g-1. The extract was added to the diet offered to the caterpillars, resulting in a reduction of digestion, since all treatments presented higher concentration of proteins in the feces when compared to the control.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)Universidade Federal de LavrasPrograma de Pós-Graduação em AgroquímicaUFLAbrasilDepartamento de QuímicaQuímicaRicinus communisSpodoptera frugiperdaRicininaInibidor de tripsinaRicinineTrypsin inhibitorInibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda: extração de folhas de mamona, purificação, identificação e atividade biológicaTrypsin inhibitor of Spodoptera frugiperda: castor leaves extraction, purification, identification and biological activityinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisSaczk, Adelir AparecidaAlves, Dejane SantosFreitas, Matheus Puggina deSilva, Rogério AntônioMarcussi, SilvanaRamos, Vinicius de Oliveirainfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLAORIGINALTESE_Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda extração de folhas.pdfTESE_Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda extração de folhas.pdfapplication/pdf2781969https://repositorio.ufla.br/bitstreams/5628304b-4999-4ea3-8843-f25d5b3d4391/download2021ec36b2c6443849d93cbeb49bf666MD51trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8925https://repositorio.ufla.br/bitstreams/84eb5872-6569-4631-9a2e-83d5d105c1fe/downloadb8680a72aba1154c473a67df97ef44b9MD52falseAnonymousREADTEXTTESE_Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda extração de folhas.pdf.txtTESE_Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda extração de folhas.pdf.txtExtracted texttext/plain102929https://repositorio.ufla.br/bitstreams/c4cd7bb4-cc49-4a8f-8a0f-09a316331fba/download014651f58ce95829996f2e0734b47e90MD53falseAnonymousREADTHUMBNAILTESE_Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda extração de folhas.pdf.jpgTESE_Inibidor de tripsina de Spodoptera frugiperda extração de folhas.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2848https://repositorio.ufla.br/bitstreams/1f361dbe-ba74-4966-81b0-1e48b66c26c2/downloadfe7bb38bb538ecdfcd7eeb7ee601f99dMD54falseAnonymousREAD1/120212025-08-13 11:15:20.748open.accessoai:repositorio.ufla.br:1/12021https://repositorio.ufla.brRepositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufla.br/server/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2025-08-13T14:15:20Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)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