Ferramentas moleculares aplicadas à caracterização da microbiota vaginal de mulheres no climatério.
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Resumo: | Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. |
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Oliveira, Jennefer Aparecida GonçalvesCota, Renata Guerra de SáSilva, Silvana de QueirozSorpreso, Isabel Cristina EspositoCota, Renata Guerra de Sá2022-10-05T20:52:10Z2022-10-05T20:52:10Z2022OLIVEIRA, Jennefer Aparecida Gonçalves. Ferramentas moleculares aplicadas à caracterização da microbiota vaginal de mulheres no climatério. 2022. 96 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2022.http://www.repositorio.ufop.br/jspui/handle/123456789/15598Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.O climatério é definido como o período na vida da mulher que compreende a transição entre a fase reprodutiva e não reprodutiva, que é acompanhada por diversas mudanças fisiológicas e corporais que impactam tanto na saúde como na qualidade de vida das mulheres. Dentre as alterações que recentemente vem recebendo grande atenção da comunidade científica destaca- se a composição da microbiota vaginal, que parece estar diretamente relacionada a saúde vaginal, de forma que a ocorrência de disbiose parecem explicar, pelo menos em parte quadros de vaginoses, vaginites, infecções sexualmente transmissíveis e câncer cervical. Assim, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar a microbiota vaginal de mulheres no climatério e o papel das espécies predominantes na manutenção da comunidade e na saúde da mulher, para atingir isso os objetivos específicos foi construída e caracterizada uma coorte de mulheres no climatério; avaliou-se o gênero Lactobacillus e o Clostridium como marcadores do estado de saúde e doença vaginal; e foi realizada a caracterização a microbiota vaginal utilizando o sequenciamento de nova geração e investigar o potencial probióticos das espécies e seu papel nos quadros de disbiose Foram avaliadas uma coorte de 98 mulheres com idades entre 40 a 65 anos; classificadas em três grupos seguindo os critérios de STRAW+10 (reprodutivo, transição menopausal e pós menopausa). Foram realizadas entrevistas, coleta de sangue e swab de material vaginal. A microbiota foi avaliada por qPCR para os gêneros Lactobacillus e Clostridium. Deste conjunto inicial, foram selecionadas 66 amostras vaginais para análise por sequenciamento metagenômico. Nossos resultados evidenciaram que o grupo reprodutivo (n=20) é o de menor ocorrência de sintomas enquanto a transição menopausal (n=21) apresentou maior frequência e intensidade de sintomas. Vale ressaltar que nas fases transição menopausal (n=21) e pós-menopausa(n=57), os sintomas psicológicos e urogenitais foram classificados como intensos, sendo os sintomas urogenitais de maior ocorrência na pós menopausa. Os resultados das análises de qPCR mostraram que esse método é eficaz para avaliação de disbiose e que gênero Lactobacillus é um bom marcador de saúde vaginal. A partir da abordagem metagenômica de análise da composição da microbiota vaginal, verificamos um predomínio de Lactobacillus iners nas mulheres climatéricas. Em conjunto concluímos que as mulheres climatéricas apresentam grande ocorrência de disbiose, o que pode explicar, pelo menos em parte os sintomas e as “queixas” das mulheres e que o L. iners pode ser considerado um biomarcador de microbiota de transição entre saudável e disbiose.Climacteric is defined as the period in a woman's life that comprises the transition between the reproductive and non-reproductive phases, which is accompanied by several physiological and body modifications that impact both health and quality of life for women. Among the changes that have recently received high attention from the scientific community, the composition of the vaginal microbiota stands out and seems to be directly related to vaginal health, in which the dysbiosis could possibly explain, at least in part, vaginosis, vaginitis, sexually transmitted infections, and cervical cancer. Thus, the main objective of this work was to evaluate the vaginal microbiota of climacteric women and the role of the predominant species in the maintenance of the community and in women’s health. To achieve this, the specific objectives consisted of building and characterizing a cohort of climacteric women; evaluate the genus Lactobacillus and Clostridium as markers of health status and vaginal diseases; characterize the vaginal microbiota using next-generation sequencing and evaluate the probiotic potential of the species and their role in dysbiosis. A cohort of 98 women aged 40 to 65 years were evaluated and classified into three groups following the STRAW+10 criteria (reproductive, menopausal transition, and post-menopause). Interviews, blood collection, and swab of vaginal material were performed. The microbiota was evaluated by qPCR for the genera Lactobacillus and Clostridium. From this initial set, 66 vaginal samples were selected for analysis by metagenomic sequencing. Our results showed that the reproductive group (n=20) had the lowest symptoms occurrence, while the menopausal transition (n=21) had the highest frequency and intensity of symptoms. It is worth mentioning that in the menopausal transition (n=21) and post- menopause (n=57) phases, the psychological symptoms were classified as intense while the urogenital symptoms were classified as intense and with greater occurrence in post-menopause. The results of qPCR analysis showed that this method is effective for evaluating dysbiosis and that the Lactobacillus genus is a good marker of vaginal health. From the metagenomic approach of analyzing the composition of the vaginal microbiota, we found a predominance of Lactobacillus iners in climacteric women. Together, we concluded that climacteric women have a high occurrence of dysbiosis, which may explain, at least in part, the symptoms and "complaints" of women and that L. iners can be considered a biomarker of transition microbiota between healthy and dysbiosis.http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 27/10/2022 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.info:eu-repo/semantics/openAccessMicrobiota vaginalClimatérioSaúde da mulherFerramentas moleculares aplicadas à caracterização da microbiota vaginal de mulheres no climatério.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOPLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/ec13046d-bb4e-4411-8c11-fc19f8619066/download8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD53falseAnonymousREADORIGINALDISSERTAÇÃO_FerramentasMolecularesAplicadas.pdfDISSERTAÇÃO_FerramentasMolecularesAplicadas.pdfapplication/pdf4183321https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/b1de34ac-8a3d-4aa8-9ae9-17620a377edd/download255a7a6a5e3d579b756540ede5fd9991MD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/d6204dea-d59f-427b-9eab-8629fcaad198/download9868ccc48a14c8d591352b6eaf7f6239MD52falseAnonymousREADTHUMBNAILDISSERTAÇÃO_FerramentasMolecularesAplicadas.pdf.jpgDISSERTAÇÃO_FerramentasMolecularesAplicadas.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3926https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/17dd2f00-a2f3-4474-a7a2-fe195faa481d/download41e241868a9328794edc21b4f0b371fbMD54falseAnonymousREAD123456789/155982024-11-10 11:55:06.483http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/abertoopen.accessoai:repositorio.ufop.br:123456789/15598https://www.repositorio.ufop.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332024-11-10T14:55:06Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)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 |
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